再生障礙性貧血患者外周血γδT細胞亞群與紅細胞生成素、血小板生成素水平關系

曹 翔, 曹春燕

南通市通州區(qū)人民醫(yī)院 血液內科,江蘇 南通 226000

再生障礙性貧血(aplastic anemia,AA)是一種T細胞免疫異常介導的自身免疫性疾病,其中,異常T細胞活化與AA中T細胞穩(wěn)態(tài)的不平衡有關。有研究報道,細胞免疫功能紊亂在AA發(fā)病中起重要作用。γδT細胞是大顆粒淋巴細胞,屬T細胞亞群之一[1]。有研究發(fā)現(xiàn),AA患者在得到有效治療且造血功能恢復后,γδT細胞亞群減少,提示其或可通過直接細胞毒作用或分泌抑制因子影響機體造血功能[2]。AA患者存在血小板生成素(thrombopoietin,TPO)、紅細胞生成素(erythrogenin,EPO)異常表達現(xiàn)象[3]。TPO是近年來發(fā)現(xiàn)的具調節(jié)血小板生成及骨髓巨噬細胞生長作用的造血生長因子。EPO是一種由腎及肝分泌產(chǎn)生的造血正調控因子,與紅細胞表面的EPO受體結合后,刺激骨髓紅細胞生成。目前,TPO、EPO與AA患者病情嚴重程度及γδT細胞亞群的關系尚無定論。本研究旨在探討AA患者外周血γδT細胞亞群與EPO、TPO水平的關系。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取自2019年2月至2023年2月于通州區(qū)人民醫(yī)院門診及住院部治療的193例AA患者納入AA組。納入標準:符合AA的診斷標準[4];臨床資料完整。排除標準:合并嚴重心腦血管疾病及肝腎功能不全;合并自身免疫性疾病;合并惡性腫瘤;合并骨髓增生異常綜合征等其他血液系統(tǒng)疾病;合并出血性疾病;合并其他類型貧血性疾病。另選取同期58例健康體檢者納入健康組。AA組中,男性113例,女性80例;年齡(51.89±10.72)歲;吸煙史58例,飲酒史64例;合并糖尿病36例,高血壓45例,高脂血癥50例。健康組中,男性31例,女性27例;年齡(52.05±11.34)歲;吸煙史13例,飲酒史15例;合并糖尿病10例,高血壓12例,高脂血癥13例。兩組研究對象一般資料比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

1.2 研究方法

1.2.1 外周血γδT細胞亞群、EPO、TPO水平檢測 應用美國Coulter公司ELITEESP流式細胞儀,用三色免疫熒光標記法及流式細胞術檢測患者外周血γδT細胞亞群;采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測患者血清EPO、TPO水平,試劑盒由美國R&D公司提供。

1.2.2 治療方法 所有AA患者均給予鹿龍再生湯治療,主要包括黨參、黃芪、鹿角膠、仙鶴草、熟地等,應用本院自動煎藥機煎煮,真空袋包裝,每日1劑,分早晚2次服用。

1.3 觀察指標 (1)比較AA組、健康組的外周血γδT細胞亞群、EPO、TPO水平,并分析患者外周血γδT細胞亞群與EPO、TPO水平的相關性。(2)比較不同病情嚴重程度患者外周血γδT細胞亞群、EPO、TPO水平,分析各指標聯(lián)合檢測對AA病情嚴重程度的評估價值及對患者病情加重的影響。(3)于治療3個月后參照《血液病診斷及療效標準》(第二版)[4]將患者分為有效組(n=154)與無效組(n=39),比較兩組治療后γδT細胞亞群、EPO、TPO水平。

2 結果

2.1 AA組與健康組外周血γδT細胞亞群、EPO、TPO水平比較 AA組γδT細胞、CD4+γδT細胞、CD8+γδT細胞、EPO、TPO水平高于健康組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 AA組與健康組外周血γδT細胞亞群、EPO、TPO水平比較

2.2 AA患者外周血γδT細胞亞群與EPO、TPO水平相關性 AA患者外周血γδT細胞、CD8+γδT細胞與EPO、TPO水平呈正相關(P<0.05)。見表2。

表2 AA患者外周血γδT細胞亞群與EPO、TPO水平相關性

2.3 重型組與非重型組外周血γδT細胞亞群、EPO、TPO水平比較 重型組γδT細胞、CD4+γδT細胞、CD8+γδT細胞、EPO、TPO水平高于非重型組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 重型組與非重型組外周血γδT細胞亞群、EPO、TPO水平比較

2.4 ROC曲線分析 聯(lián)合檢測的ROC曲線下面積高于外周血γδT細胞亞群、EPO、TPO單獨檢測,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表4、圖1。

圖1 ROC曲線分析

2.5 多因素Logistic分析結果 多因素分析結果顯示,合并血流感染、反復出血、γδT細胞>9.25%、CD4+γδT細胞>0.83%、CD8+γδT細胞>4.28%、EPO>73.10 mU/ml、TPO>486.37 pg/ml是影響AA患者病情的獨立危險因素(P<0.05)。見表5。

表5 多因素Logistic分析結果

2.6 有效組與無效組外周血γδT細胞亞群、EPO、TPO水平比較 有效組治療后γδT細胞、CD8+γδT細胞、EPO、TPO水平低于無效組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表6。

表6 有效組與無效組外周血γδT細胞亞群、EPO、TPO水平比較

3 討論

AA是由多種病因引起的,以骨髓造血功能衰竭及全血細胞減少為特征的血液系統(tǒng)疾病,表現(xiàn)為貧血、神疲乏力等[5]。有研究報道,AA患者中性粒細胞長期低下且機體免疫功能紊亂,易并發(fā)細菌及病毒感染,導致病情反復或加重。

分析患者免疫功能變化對于該疾病病情評估至關重要[6]。γδT細胞是大顆粒淋巴細胞,為T細胞亞群。有研究報道,AA患者造血功能恢復后,γδT細胞T細胞亞群減少,提示其或可影響機體造血功能[7]。血小板減少是引起AA患者出血的主要原因,患者發(fā)病時,血小板減少除了與血小板生成減少直接相關,還可能與再生障礙性免疫機制異常或由于輸血引起同種免疫反應導致血小板減少有關[8-9]。EPO、TPO是與骨髓造血功能密切相關的指標。EPO是一種造血正調控因子,與主要表達于紅細胞表面的EPO受體結合,刺激骨髓紅細胞的生成和釋放;TPO是調節(jié)血小板生成及骨髓巨噬細胞生長的造血生長因子,可直接影響骨髓造血功能[10-11]。本研究發(fā)現(xiàn),AA組中γδT細胞、CD4+γδT細胞、CD8+γδT細胞、EPO、TPO水平高于健康組,表明AA患者存在γδT細胞亞群及EPO、TPO水平異常升高現(xiàn)象,這主要與AA患者存在細胞免疫功能紊亂及造血功能異常有關。

AA的發(fā)病機制尚未闡明。目前認為,其主要與藥物、化學毒物、電離輻射等有關[12]。有研究報道,病毒對造血干細胞影響較大,會導致AA發(fā)生及疾病進展[13]。動物研究證實,病毒對造血干細胞的增殖、分化具有直接抑制作用[14]。病毒部分遺傳物質可與骨髓造血細胞的遺傳物質整合,直接損害骨髓造血干細胞,并通過對骨髓造血細胞增殖、分化負調控,導致骨髓造血功能障礙[15]。本研究結果顯示,合并血流感染、反復出血、γδT>9.25%、CD4+γδT>0.83%、CD8+γδT>4.28%、EPO>73.10 mU/ml、TPO>486.37 pg/ml是影響AA患者病情加重的危險因素,提示患者病情加重與感染、細胞免疫功能紊亂等有關,這主要是因為患者機體自身免疫性細胞功能異常,引起骨髓造血組織免疫損傷,從而引發(fā)造血細胞過度凋亡,加重疾病嚴重程度[16]。AA患者反復出血,加重損傷微血管,引起出血風險增加及血液丟失,進而導致貧血加重。本研究結果顯示,聯(lián)合檢測評估AA嚴重程度的ROC曲線下面積>0.9,表明各指標聯(lián)合檢測對AA嚴重程度具有評估價值。有效組治療后γδT細胞、CD8+γδT細胞、EPO、TPO水平低于無效組,提示各指標變化與AA治療療效有關,這主要與患者得到有效治療后造血功能恢復有關,提示這些指標或可用于AA治療療效的臨床評估。

綜上所述,AA患者外周血γδT細胞亞群、EPO、TPO異常升高是病情加重的危險因素,各指標聯(lián)合檢測對患者病情嚴重程度具有評估價值。