小兒化積顆粒調節胃腸功能的藥效學及質量控制研究

劉全國，宮 辰，陳金鵬，劉 毅，蓋曉紅，田成旺*，陳常青*

1. 海南葫蘆娃藥業集團股份有限公司，海南 海口 570216

2. 天津中醫藥大學，天津 301617

3. 天津藥物研究院，和光中藥科技（天津）有限公司，天津 300462

4. 天津市中藥質量標志物重點實驗室，天津 300462

5. 藥物成藥性評價與系統轉化全國重點實驗室，天津 300462

積滯是小兒常見的脾胃系疾病之一，3～8 歲兒童高發，未得到及時診治會影響患兒的體格與智力發育。西醫多采用針對病因的藥物治療，但缺乏系統評價以支持其療效。中醫藥治療小兒積滯歷史悠久，經驗豐富[1]。積滯的主要病機為中焦積而不化，氣滯不行。而化積組方對于積滯有良好的療效。

小兒化積片為海南葫蘆娃藥業有限公司生產的明星產品，具有消食化積的作用，用于治療小兒脾胃不和、停食停乳、積聚痞塊、肚腹膨脹、四肢倦怠、面色萎黃、不思飲食等癥，有著多年的臨床應用基礎，療效確切。該方由山楂（焦）、麥芽（炒）、六神曲（麩炒）、檳榔（炒）、雞內金（炒）、牽牛子（炒）組成。山楂具有消食健胃、行氣散瘀和化濁降脂的功效，為消食導積要藥[2-3]，其中的山楂中總黃酮類有促進胃腸功能、調節脂質代謝的作用[4]；麥芽具有行氣消食、健脾開胃、回乳消脹，善消導米面諸果食積等功效；六神曲具有健脾和胃、消食調中的作用，用于脾胃虛弱、飲食停滯、胸痞腹脹、小兒食積等癥[5]；檳榔藥效廣泛，具有驅殺寄生蟲及助消化等藥理作用[6-7]。其中的主要藥效成分檳榔堿具有增加胃腸蠕動、增強唾液分泌、促進消化等功能[8]；雞內金具有健胃消食、澀精止遺、通淋化石的作用，用于食積不消、嘔吐瀉痢、小兒疳積等癥；牽牛子具有瀉水通便、消痰滌飲、殺蟲攻積的作用，用于消食化積等癥。6 味藥組方使用可消食化積，理氣行滯。

小兒化積片市售劑型為片劑，該劑型對于幼兒來講存在片重大、水送服用困難等情況；另外口嚼服藥，兒童不配合，順應差，在一定程度上限制了患者的用藥，難以滿足臨床及市場需求。因此在臨床和市場調研的基礎上將小兒化積片改變為適合兒童服用的顆粒劑。本研究使用ICR 幼齡小鼠以及SD大鼠進行化積顆粒的胃腸功能性實驗，觀察其對小鼠的胃腸功能性影響，效果良好，并且提示毒性成分在安全有效范圍內；此外，在原劑型小兒化積片中定量項為有機酸的基礎上，增加了藥效成分檳榔堿的含量測定方法，對其在化積顆粒中的含量測定、方法學考察進行研究，建立化積顆粒更完整、全面的質量控制方法，為小兒化積顆粒的質量控制研究奠定基礎，臨床應用提供可靠的保障。

1 材料

1.1 動物

SPF 級ICR 幼齡小鼠100 只，體質量12～14 g，雌雄各半，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供，生產許可證號SCXK（京）2012-0001（用于小鼠腸推進實驗）。

SPF 級SD 大鼠40 只，體質量50～70 g，雌雄各半，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供，生產許可證號SCXK（京）2012-0001（用于大鼠胃酸分泌實驗）。

本實驗動物使用經機構實驗動物管理與使用委員會（IACUC）批準（倫理批準號2016040101）。溫度、濕度、換氣次數由中央系統自動控制，溫度20～26 ℃，相對濕度40%～70%，通風次數為10～15 次/h 全新風，光照為12 h 明、12 h 暗。大鼠飼料由天津市華榮實驗動物科技有限公司提供，飲用多重微孔濾膜過濾系統制備的無菌水（四級過濾紫外滅菌）。

1.2 藥品與試劑

小兒化積顆粒（批號20151217，相當于8.93 g生藥/g 干膏粉）、小兒化積顆粒3 批中試樣品（批號20160620、20160625、20160629）由天津藥物研究院有限公司提供；化積片（批號150101）購自承德新愛民制藥有限公司；異氟烷（批號C002150201）購自河北一品制藥股份有限公司；NaOH（批號20120202）購自天津市風船化學試劑科技有限公司；阿拉伯膠（批號20130507）購自天津市化學試劑批發公司；印度墨汁（批號20090115）購自國藥集團化學試劑有限公司；胃蛋白酶測試盒（批號20160419）購自南京建成生物工程研究所；對照品氫溴酸檳榔堿（批號111684-200401，質量分數99.5%）、枸櫞酸（批號100396-201302，質量分數100.0%）購自中國食品藥品檢定研究院；乙腈為色譜純，甲醇為分析純，磷酸為分析純，三乙胺為分析純，水為娃哈哈純凈水。

1.3 儀器

AB204-N 型電子天平、DL53 型電位滴定儀[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]；BT-25S 型電子天平（德國Sartorius 公司）；Varioskan Flash 酶標儀（美國Thermo Fisher Scientific 公司）；LXJ-ⅡB 型低速大容量多管離心機（上海安亭科學儀器有限公司）；1260 型高效液相色譜儀（美國Agilent 公司）；PHS-25 型pH 計（上海雷磁公司）。

2 方法

2.1 小兒化積顆粒調節胃腸功能的作用

2.1.1 對幼齡小鼠腸推進運動的影響 50 只ICR幼齡小鼠隨機分為對照組及小兒化積顆粒高、中、低劑量（5.00、2.50、1.25 g/kg）組和化積片（2.5 g/kg）組，每組10 只，雌雄各半。每天ig 給藥1 次，連續3 d，給藥體積20 mL/kg，對照組ig 等體積去離子水。于末次給藥（給藥前小鼠禁食5 h）后40 min，各組小鼠ig 2%印度墨汁（用5%阿拉伯膠溶液配制），20 min 后脫頸椎處死小鼠，剖開腹部，輕輕取出并分離整個胃至肛門的腸段，平鋪于蠟板上，測量幽門到回盲部的長度，作為小腸全長，再測量幽門到墨汁推進前沿的長度為小腸推進長度，計算腸推進率。將各給藥組與對照組平均腸推進率比較，進行統計學t檢驗。

2.1.2 對幼齡小鼠胃排空的影響 50 只ICR 幼齡小鼠隨機分為對照組及小兒化積顆粒高、中、低劑量（5.00、2.50、1.25 g/kg）組和化積片（2.5 g/kg）組，每組10 只，雌雄各半。按“2.1.1”項下方法給藥，于末次給藥前禁食4 h、末次藥后40 min，ig 0.1%酚紅溶液（0.2 mL/只），20 min 后處死小鼠，摘取胃，置于燒杯中，沿胃大彎剪開胃，用5 mL 蒸餾水沖洗胃內容物，調pH 值為6.0～6.5，3000 r/min離心10 min，分離上清液。用酶標儀在波長420 nm下測定各樣品中酚紅的吸光度（A）值，以0.1%酚紅0.2 mL 加蒸餾水至5 mL 溶液的A值作為酚紅吸收基數，計算各組動物胃中酚紅殘留率，各給藥組與對照組胃中酚紅殘留率進行統計學t檢驗。

2.1.3 對幼齡大鼠胃酸分泌以及胃蛋白酶活性的影響 50 只幼齡SD 大鼠隨機分為對照組及小兒化積顆粒高、中、低劑量（3.2、1.6、0.8 g/kg）組和化積片（1.6 g/kg）組，每組10 只，雌雄各半。每天ig給藥1 次，連續3 d，對照組ig 等體積去離子水。動物禁食不禁水16 h，末次給藥后1 h，異氟烷麻醉，仰位固定，腹部剃毛，常規消毒，于劍突下沿正中線剪1 個約1.5 cm 切口，輕取胃，在胃幽門與十二指腸結合部用手術線結扎胃幽門，縫合切口。術后禁食、禁水4 h 后，用異氟烷麻醉后脫頸椎處死，剖開切口，結扎胃賁門，取出胃，沿胃大彎剖開，收集胃液，3000 r/min 離心10 min，吸取上清液，測量胃液體積。取胃液0.5 mL 置入小錐形瓶中，加入酚酞指示劑1 滴，以0.01 mol/L 氫氧化鈉滴定至出現紅色（顏色不再加深）為終點。計算胃酸分泌速度。用試劑盒測定胃液胃蛋白酶活性（比色法），將各給藥組與對照組的胃液體積、胃酸分泌速度及胃蛋白酶活性進行統計學t檢驗。

2.2 檳榔堿的含量測定

2.2.1 色譜條件 Dikma Diamonsil-C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流動相為乙腈-三乙胺溶液（15∶85，2 mL 三乙胺加入1000 mL 水中，磷酸調節pH 值至7.0）；檢測波長為215 nm；體積流量1.0 mL/min；柱溫30 ℃；進樣量10 μL。

2.2.2 溶液的制備

（1）對照品溶液的制備：精密稱取氫溴酸檳榔堿對照品適量，加流動相制成0.360 4 mg/mL 的氫溴酸檳榔堿對照品儲備液（即檳榔堿對照品儲備液質量濃度為0.236 9 mg/mL）。精密吸取氫溴酸檳榔堿對照品儲備液1.0 mL，置10 mL 量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液。

（2）供試品溶液的制備：取小兒化積顆粒，研細，取約5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加乙醚50 mL，再加碳酸鹽緩沖液（取碳酸鈉1.91 g 和碳酸氫鈉0.56 g，加水溶解成100 mL）3 mL，放置30 min，振搖；加熱回流30 min，取乙醚液，殘渣加乙醚加熱回流提取2 次，50mL/次，每次15 min，合并3 次乙醚液，加入磷酸溶液l mL，混勻，回收乙醚，殘渣加50 %乙腈溶液溶解，轉移至25 mL 量瓶中，加50%乙腈至刻度；搖勻，濾過，取續濾液，即得。

（3）陰性供試品溶液的制備：按小兒化積顆粒處方制法，制得缺炒檳榔的陰性顆粒，按供試品的溶液的制備方法制備，即得陰性供試品溶液。

2.2.3 HPLC 分析 分別精密吸取氫溴酸檳榔堿對照品溶液、供試品溶液和陰性供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定，即得。

2.3 有機酸的含量測定

2.3.1 溶液的制備

（1）枸櫞酸對照品溶液制備：取枸櫞酸對照品適量，精密稱定，加水溶解制成質量濃度為1.120 4 mg/mL 的枸櫞酸對照品溶液。

（2）供試品溶液的制備：取小兒化積顆粒，研細，取約2 g，精密稱定，精密加水50 mL，搖勻，密塞，稱定質量，超聲30 min，取出，稱定質量，用水補足減失的質量，濾過，精密量取續濾液25 mL，照電位滴定法，用0.05 mol/L 氫氧化鈉滴定液進行滴定至pH 8.7，即得。每毫升氫氧化鈉滴定液（0.05 mol/L）相當于3.202 mg 的枸櫞酸。

（3）氫氧化鈉滴定液配制及標定：照《中國藥典》2020 年版四部通則8006 項下，依法配制0.05 mol/L 氫氧化鈉滴定液，并進行標定。

2.3.2 測定方法 照電位滴定法（《中國藥典》2020年版四部通則0701）測定。

3 結果

3.1 小兒化積顆粒對胃腸運動的作用

3.1.1 小兒化積顆粒對幼齡小鼠腸推進運動的影響如表1 所示，與對照組比較，小兒化積顆粒高、中劑量組及化積片組能夠顯著延長幼齡小鼠腸推進率（P＜0.05）。其中小兒化積顆粒中劑量組延長幼齡小鼠腸推進率與同劑量的化積片比較未見顯著性差異。結果表明，小兒化積顆粒和化積片均有推動幼齡小鼠腸運動的作用，小兒化積顆粒的腸推進作用與同劑量的化積片相當。

表1 小兒化積顆粒對幼齡小鼠腸推進運動的影響 (±s,n = 10)Table 1 Effect of Xiaoer Huaji Granules on intestinal propulsion in young mice (±s, n = 10)

表1 小兒化積顆粒對幼齡小鼠腸推進運動的影響 (±s,n = 10)Table 1 Effect of Xiaoer Huaji Granules on intestinal propulsion in young mice (±s, n = 10)

與對照組比較：*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001，下表同*P < 0.05**P < 0.01***P < 0.001 vs control group, same as below tables

組別 劑量/(g·kg?1) 腸推進率/%對照 － 56.7±9.2小兒化積顆粒 5.00 67.5±11.3*2.50 67.0±10.9*1.25 57.5±9.1化積片 2.5 65.6±6.1*

3.1.2 小兒化積顆粒對幼齡小鼠胃排空的影響 如表2 所示，與對照組比較，小兒化積顆粒各劑量組及化積片組能夠顯著減少幼齡小鼠胃中酚紅殘留率（P＜0.05）。其中小兒化積顆粒中劑量組減少幼齡小鼠胃中酚紅殘留率與同劑量的化積片比較未見顯著性差異，結果表明，小兒化積顆粒和化積片均有推動幼齡小鼠胃排空的作用，小兒化積顆粒的胃排空作用與同劑量的化積片相當。

表2 小兒化積顆粒對幼齡小鼠胃排空的影響 (±s,n = 10)Table 2 Effect of Xiaoer Huaji Granules on gastric emptyin function in young mice (±s, n = 10)

表2 小兒化積顆粒對幼齡小鼠胃排空的影響 (±s,n = 10)Table 2 Effect of Xiaoer Huaji Granules on gastric emptyin function in young mice (±s, n = 10)

組別 劑量/(g·kg?1) 胃中酚紅殘留率/%對照 － 28.381±4.328小兒化積顆粒 5.00 17.510±3.821***2.50 15.227±3.786***1.25 17.675±3.111***化積片 2.5 15.889±3.954***

3.1.3 小兒化積顆粒對幼齡大鼠胃酸分泌以及胃蛋白酶活性的影響 如表3 所示，與對照組比較，小兒化積顆粒各劑量組和化積片組均顯著增加大鼠胃液體積和胃蛋白酶活性（P＜0.05、0.01、0.001），小兒化積顆粒高、中劑量組和化積片組顯著提高胃酸分泌速度（P＜0.05、0.01）；小兒化積顆粒中劑量組增加大鼠胃液體積、胃蛋白酶活性和提高胃酸分泌速度與同劑量的化積片比較未見顯著性差異。結果表明，小兒化積顆粒和化積片均有增加大鼠胃液體積、胃蛋白酶活性和提高胃酸分泌速度的作用，并且小兒化積顆粒的作用與同劑量的化積片相當。

表3 小兒化積顆粒對幼齡大鼠胃液分泌和胃蛋白酶活性的影響 (±s, n = 10)Table 3 Effects of Xiaoer Huaji Granules on gastric secretion and pepsin activity in young rats (±s, n = 10)

表3 小兒化積顆粒對幼齡大鼠胃液分泌和胃蛋白酶活性的影響 (±s, n = 10)Table 3 Effects of Xiaoer Huaji Granules on gastric secretion and pepsin activity in young rats (±s, n = 10)

組別 劑量/(g·kg?1) 胃液體積/mL 胃酸分泌速度/(mmol·h?1) 胃蛋白酶活性/(U·mL?1)對照 － 2.0±1.0 54.3±27.1 19.70±7.47小兒化積顆粒 3.2 3.8±0.9*** 81.7±17.1* 50.59±22.64**1.6 3.4±1.0** 101.4±28.5** 36.24±15.15*0.8 3.1±0.6** 73.4±21.1 29.78±11.43*化積片 1.6 3.6±1.0** 105.3±37.0** 28.53±6.75*

3.2 檳榔堿的含量測定

3.2.1 專屬性實驗 分別精密吸取氫溴酸檳榔堿對照品溶液、供試品溶液、陰性供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定，記錄色譜圖。結果表明，該色譜條件下，對照品溶液中氫溴酸檳榔堿的色譜峰峰形良好，供試品溶液中氫溴酸檳榔堿相應保留時間處的色譜峰峰形良好，氫溴酸檳榔堿色譜峰與雜質峰的分離度大于1.5，陰性供試品溶液中在氫溴酸檳榔堿色譜峰相應保留時間處無色譜峰出現，該色譜條件專屬性良好。

3.2.2 柱效及分離度測定 在選定色譜條件下，對供試品溶液中氫溴酸檳榔堿色譜峰的理論塔板數和分離度進行測定，氫溴酸檳榔堿色譜峰的理論塔板數為6625（以氫溴酸檳榔堿色譜峰計）。氫溴酸檳榔堿色譜峰可達基線分離，且與其相鄰的色譜峰的分離度大于1.5，符合要求。

3.2.3 標準曲線的繪制 分別精密吸取氫溴酸檳榔堿對照品儲備液0.2、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL 置10 mL 量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，按上述色譜條件測定，分別進樣10 μL，記錄色譜圖，讀取峰面積。以檳榔堿進樣量為橫坐標（x），峰面積為縱坐標（y），繪圖，得標準曲線。結果表明，在進樣量為0.047 38～1.184 5 μg，檳榔堿呈良好的線性關系（回歸方程為y＝3 424.352x－2.591 8，r＝1.000 0）。

3.2.4 穩定性實驗 取小兒化積顆粒，制備供試品溶液和氫溴酸檳榔堿對照品溶液分別于室溫放置0、2、4、8、12、24 h 后分別進樣，測定，記錄氫溴酸檳榔堿色譜峰面積，結果表明，供試品溶液在室溫放置24 h 內穩定，峰面積RSD 為0.47%；對照品溶液在室溫放置24 h 內穩定，峰面積RSD 為0.35%，穩定性良好。

3.2.5 重復性實驗 取小兒化積顆粒約5 g，精密稱定，按供試品溶液制備方法制備，制備6 份，測定，記錄氫溴酸檳榔堿色譜峰面積，計算小兒化積顆粒中氫溴酸檳榔堿的含量，結果表明，檳榔堿質量分數平均值為0.115 8 mg/g，RSD 為0.56%，重復性良好。

3.2.6 加樣回收率實驗 取小兒化積顆粒9 份，每份約2.5 g，精密稱定，平行9 份，分別置于9 個錐形瓶中，各取3 份，分別精密加入氫溴酸檳榔堿對照品儲備液0.6、1.2、1.8 mL，加入乙醚50 mL，分別再加碳酸鹽緩沖液3mL，制備9 份供試品溶液，進樣，測定，計算回收率。結果表明，平均回收率為103.35%，RSD 為3.76%，符合要求。

3.2.7 耐用性實驗 液相色譜的變動因素有體積流量、波長、酸度、流動相比例、柱溫、色譜柱。取供試品溶液，結果表明，液相色譜條件如體積流量、波長、酸度、流動相比例、柱溫有所變動均對測定結果無明顯影響；色譜柱品牌改變對測定結果無明顯影響，同品牌不同批號的色譜柱無影響。

3.2.8 3 批中試樣品的含量測定 取3 批小兒化積顆粒中試樣品，按供試品溶液制備方法制備得供試品溶液，測定，結果表明，3 批小兒化積顆粒中試樣品中檳榔堿質量分數分別為0.11、0.10、0.11 mg/g。由此可知不同批次的小兒化積顆粒中檳榔堿含量穩定，為臨床使用提供了可靠的保障。

3.3 有機酸的含量測定

3.3.1 繪制滴定曲線 取小兒化積顆粒，研細，取約2 g，精密稱定，精密加水50 mL，搖勻，密塞，稱定質量，超聲30 min，取出，稱定質量，用水補足減失的質量，濾過，精密量取續濾液25 mL，照電位滴定法，用0.05mol/L 氫氧化鈉滴定液進行滴定。記錄消耗氫氧化鈉滴定液的體積及相應的pH值，以消耗氫氧化鈉滴定液體積為x，以pH 值為y，在Originlab originPro 軟件中作圖，繪制?pH/?V-V的滴定曲線，對曲線上的任一點計算其一階導數值，一階導數最大值對應的pH 值為突躍點，即滴定終點。據此確定滴定終點的pH 值為8.7。

3.3.2 專屬性實驗 按小兒化積顆粒處方制法，制得空白輔料顆粒，按供試品的制備方法制備，即得陰性供試品溶液。照電位滴定法，用0.05 mol/L 氫氧化鈉滴定液電位滴定至pH 8.7，即得。每毫升氫氧化鈉滴定液（0.05 mol/L）相當于3.202 mg 的枸櫞酸。結果表明，滴定中陰性供試品溶液消耗的氫氧化鈉滴定液的體積極微，因此，陰性供試品溶液無干擾。

3.3.3 穩定性實驗 取小兒化積顆粒12 g，精密加水300 mL，制備供試品溶液，于室溫放置0、2、4、8、12 h 后分別滴定，相似度計算結果顯示，0～12 h測得的色譜圖與0 h 色譜圖相似度分別為1.000、0.996、1.000、1.000，結果表明，峰面積RSD 為0.18%，供試品溶液在室溫放置12 h 內穩定。

3.3.4 重復性實驗 取小兒化積顆粒約2 g，精密稱定，按供試品溶液制備方法制備，制備6 份，依法滴定，各成分峰面積RSD 為0.28%；用相似度評價軟件計算，各色譜圖與其所得共有模式的相似度分別為1.000，結果表明該方法重復性良好。

3.3.5 加樣回收率實驗 取小兒化積顆粒6 份，每份約1.0 g，精密稱定，分別置于6 個錐形瓶中，分別精密加入1.120 4 mg/mL 枸櫞酸對照品儲備溶液6 mL，再精密加水50 mL，搖勻，密塞，稱定質量，超聲30 min，取出，稱定質量，用水補足減失的質量，濾過，精密量取續濾液25 mL，照電位滴定法，用0.05 mol/L 氫氧化鈉滴定液電位滴定至pH 8.7，即得。每毫升氫氧化鈉滴定液（0.05 mol/L）相當于3.202 mg 的枸櫞酸，結果表明，平均回收率為97.37%，RSD 為0.91%，符合要求。

3.3.6 3 批中試樣品的含量測定 取3 批中試樣品，按供試品溶液制備方法制備供試品溶液，依法測定，結果表明，3 批小兒化積顆粒中試樣品中有機酸質量分數分別為7.24、7.1、7.23 mg/g。結果表明，不同批次小兒化積顆粒中有機酸含量穩定，為臨床上的使用提供了有效保障。

4 討論

積滯是一類以食欲較差甚至不思飲食、脘腹部脹滿疼痛、大便酸臭稀溏或秘結、噯氣酸腐或嘔吐為主要特征的脾胃系疾病，中醫治療以消食化積、理氣行滯為基本原則[1]。中醫認為積滯的病機為乳食停而不化，積而不消，氣滯不行。積滯若遷延不愈易發展為“疳證”，二者有接續關系，故有時合稱疳積。本病相當于現代醫學中的功能性消化不良。其中3～8 歲兒童高發，未得到及時診治會影響患兒的體格與智力發育[2]。因此對小兒積滯的治療研究有很大的意義。

胃腸的推進作用和胃液的分泌情況可以判斷藥物的消食化積能力，其中胃液中所含的胃酸、胃蛋白酶是參與消化的主要成分，對營養物質起到初步消化作用，并為后來的吸收創造了條件[9]；本研究通過幼齡小鼠和大鼠的胃排空實驗、胃腸推進實驗和胃液分泌實驗驗證了化積組方的消食化積能力，其中化積片與小兒化積顆粒均有較好的胃腸推進、胃排空以及胃液分泌作用，并且相同劑量的化積片和小兒化積顆粒作用一致。結果表明了化積組方良好的消食化積療效。

山楂中的有機酸類成分可以通過促進消化酶分泌增強小鼠的胃腸運動，并可拮抗阿托品引起的腸平滑肌松弛，有機酸具有抗炎癥反應，抗氧化、抑制血小板聚集的藥理作用[10]，對心血管疾病的防治具有重要的臨床應用價值。有機酸是山楂健胃消食、改善血液循環、降低高血壓和改善高脂血癥的關鍵生物活性成分之一[11]。由于山楂中的強極性有機酸類（如枸櫞酸、蘋果酸）等在常規C18反相色譜柱分離較困難，結合文獻報道[12]，本研究采用電位滴定法對小兒化積顆粒中的有機酸含量進行測定。但是有機酸存在于多種藥材中，專屬性差。

研究表明，檳榔堿可以顯著增加胃底、胃體對食物的推動力，并能加強胃竇部碾磨食糜的能力，促進胃各部位動力效應協調，顯著提高胃動力低下大鼠的胃排空率和小腸推進率。檳榔堿為檳榔藥材的藥效成分，并且也是毒性成分，選擇檳榔堿作為小兒化積顆粒質量控制指標成分，既可以對小兒化積顆粒進行質量控制，也可以對其毒性成分進行限定，保證其毒性成分在安全限定范圍內，提高了其安全性和有效性。因此，小兒化積顆粒在對有機酸進行質量控制的基礎上增加了藥效成分檳榔堿的測定，建立了檳榔堿含量的方法，并進行方法學研究，包括供試品溶液的制備方法考察、系統適用性實驗、線性關系考察、穩定性、重復性和加樣回收率實驗等，結果均符合規定。該方法具有分離效果好、靈敏、準確等優點，可以用于小兒化積顆粒質量標準中的定量控制，以保證小兒化積顆粒質量均一性及療效的穩定性。

本研究通過幼齡小鼠和大鼠的胃排空、腸運動、胃液分泌以及胃蛋白酶活性實驗，證明小兒化積顆粒對幼齡小鼠以及大鼠具有消食化積的功效，與劑量呈正相關，對于小兒積滯的治療具有重大意義；并且對其中的藥效成分進行質量控制研究，不同批次間的有效成分含量穩定，為小兒化積顆粒的質量控制研究奠定基礎和臨床應用提供安全有效的保障。然而，現有文獻多集中于臨床應用及聯合用藥的報道，缺乏對于具體藥效機制的研究。因此，在后續研究中，應借助分子生物學、蛋白質組學等現代研究手段，闡明小兒化積顆粒調節胃腸功能的作用機制，從而更好地服務于臨床。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突