依賴IL-5增殖的細胞株TF-1-9E3的馴化及驗證

李詩潔,代維燕,王雪蓮,柯文鋒,韓 飛,陳永奇,劉 暢,白仲虎

(1.珠海瑞思普利醫藥科技有限公司,珠海 519040; 2.江南大學 糧食發酵工藝與技術國家工程實驗室,無錫 214122; 3.江南大學 生物工程學院 工業生物技術教育部重點實驗室,無錫 214122; 4.江南大學 生物工程學院 糖化學與生物技術教育部重點實驗室,無錫 214122)

IL-5(Human interleukin-5)是一種由鏈間二硫鍵連接的同源二聚體細胞因子,由Th2淋巴細胞、肥大細胞、Ⅱ型固有淋巴細胞(ILC2s)、自然殺傷性T細胞、嗜酸性粒細胞表達和產生[1]。IL-5也是嗜酸性粒細胞的關鍵調節因子,在嗜酸性粒細胞的增殖、激活和成熟中起核心作用[2-3],可以促進嗜酸性粒細胞從骨髓釋放到循環中[4-5]。由于嗜酸性粒細胞在嚴重嗜酸性粒細胞哮喘的發病機制中具有突出作用,引起氣道上皮損傷和支氣管重塑[6],且嗜酸性粒細胞與較高的惡化頻率有關,導致患者肺功能下降[7]。嗜酸性粒細胞表面表達IL-5Rα,可以與IL-5特異性結合。IL-5與IL-5Rα結合形成復合物后,這個中間復合物將招募共同的β(βc)受體[IL-5與IL-3(Human interleukin-3)及GM-CSF(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor)共享βc受體,CD131]形成三元復合物,JAK/STAT信號級聯隨之被激活,促進嗜酸性粒細胞的增殖,因此,通過阻斷炎癥因子IL-5的信號通路進而減少嗜酸性粒細胞的數量已經成為治療嚴重嗜酸性粒細胞哮喘非常有效的方法[8]。

目前阻斷IL-5與IL-5Rα結合的抗體[Reslizumab(靶向IL-5),Mepolizumab(靶向IL-5)、Benralizumab(靶向IL-5Rα)]的特異性單克隆抗體已被批準用于不受控制的嗜酸性粒細胞性(2型)哮喘的附加治療。IL-5是嗜酸性粒細胞哮喘的關鍵細胞因子,盡管已經有上市的靶向IL-5或IL-5Rα的抗體藥存在,但均為注射給藥,隨著吸入給藥方式的發展[9],阻斷IL-5與IL-5Rα結合的抗體(納米抗體、抗體片段等)用于吸入給藥治療哮喘備受關注,因此,優化候選抗體生物活性篩選方法非常重要。……