血清GFAP、Hcy水平與急性缺血性腦卒中的相關(guān)性研究

凌小婷,王承翰,翟寧能,廖 林,林發(fā)全

廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗科/廣西高校臨床檢驗診斷學(xué)重點實驗室,廣西南寧 530021

急性缺血性腦卒中(AIS)又稱急性腦梗死,因腦部血液供應(yīng)障礙導(dǎo)致腦組織缺血、缺氧、壞死,從而出現(xiàn)神經(jīng)功能缺損癥狀的一種腦血管疾病,多發(fā)于中老年群體[1-2]。由于該疾病具有起病急、進(jìn)展快、致殘率和致死率高的特點,故該病的早期診斷、早期治療和及時評估病情變化對于指導(dǎo)正確診療和改善疾病預(yù)后具有重要的臨床意義。血清膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)是一種以單體形式存在的Ⅲ型中間絲狀蛋白,目前已有臨床研究發(fā)現(xiàn)GFAP 水平可用于評估神經(jīng)功能缺損,可能與AIS的嚴(yán)重程度密切相關(guān)[3-4]。同型半胱氨酸(Hcy)水平升高為心腦血管疾病發(fā)生的重要危險因素,其可參與AIS的發(fā)生、發(fā)展[5-6]。為明確GFAP與Hcy作為潛在生物標(biāo)志物在AIS早期診斷和評估病情上的臨床價值,本研究對GFAP、Hcy單獨及聯(lián)合診斷AIS的價值進(jìn)行探討,并分析二者與AIS嚴(yán)重程度的相關(guān)性,以期為AIS的早期診斷、預(yù)防與治療提供參考?，F(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2022年1月至2023年2月在本院就診的110例AIS患者作為觀察組,其中男84例,女26例;年齡32～85歲,平均(60.02±11.03)歲;平均住院時間(10.59±5.90)d。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》[7]中關(guān)于AIS的診斷標(biāo)準(zhǔn);(2)經(jīng)顱腦CT和(或)MRI檢查確診為AIS;(3)發(fā)病至入院時間<48 h;(4)接受相關(guān)臨床實驗室檢查且臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)伴有原發(fā)性心、肝、肺、腎、血液系統(tǒng)等疾病者;(2)合并顱腦損傷、腦出血等其他腦部疾病者;(3)存在惡性腫瘤者;(4)合并意識障礙或有精神疾病者。另外選取本院同期健康體檢者59例作為對照組,排除心腦血管疾病、糖尿病、高血壓等,其中男38例,女21例,年齡38～78歲,平均(57.03±8.47)歲。兩組性別、年齡比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。按照美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)評分進(jìn)行神經(jīng)功能缺損程度評定,分值越高表示神經(jīng)功能缺損程度越嚴(yán)重,按評定結(jié)果將觀察組分為輕型組(NIHHS評分<5分)73例,中型組(NIHHS評分5～15分)32例,重型組(NIHHS評分≥16分)5例。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)(2023-K006-01),所有研究對象均知情同意。

1.2方法 采集所有受檢者清晨空腹外周靜脈血5 mL,以3 000 r/min的速度離心5 min,取上清液置于-20 ℃環(huán)境中儲存以待檢測,血樣檢測期間應(yīng)避免反復(fù)凍融。采用磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法檢測GFAP水平,分析儀器采用全自動化學(xué)發(fā)光分析儀(Aceso 80A),試劑盒由北京美聯(lián)泰科生物技術(shù)有限公司提供;采用循環(huán)酶法檢測Hcy水平,分析儀器采用全自動生化分析儀(C16000),試劑盒由廣西康柏萊科技有限公司提供。另外,采用貝克曼 LH780 全血細(xì)胞分析儀及配套試劑檢測受檢者血常規(guī),采用全自動生化分析儀(H7600)檢測總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、空腹血糖(FBG)水平。

1.3觀察指標(biāo) (1)比較觀察組和對照組白細(xì)胞計數(shù)(WBC)、TC、TG、HDL-C及FBG水平;(2)比較觀察組和對照組血清GFAP、Hcy水平;(3)比較輕型組、中型組、重型組及不同住院時間AIS患者GFAP、Hcy水平;(4)評估血清GFAP、Hcy單獨及聯(lián)合檢測AIS的價值;(5)分析GFAP、Hcy與AIS患者NIHHS評分、住院總時間及WBC的相關(guān)性。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS25.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。不符合正態(tài)分布的計量數(shù)據(jù)以M(P25,P75)表示,兩組間比較采用非參數(shù)Mann-WhitneyU檢驗,多組間比較采用Kruskal-WallisH檢驗;采用Spearman相關(guān)進(jìn)行相關(guān)性分析,通過受試者工作特征(ROC)曲線評估GFAP、Hcy水平檢測對AIS的評估價值,曲線下面積(AUC)之間的比較采用Z檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1觀察組和對照組TC、TG、HDL-C、FBG及WBC水平比較 觀察組患者的TC水平、WBC高于對照組,HDL-C水平低于對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 觀察組和對照組TC、TG、HDL-C、FBG及WBC水平比較[M(P25,P75)]

2.2觀察組和對照組血清GFAP、Hcy水平比較 觀察組患者血清GFAP、Hcy水平高于對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 觀察組和對照組血清GFAP、Hcy水平比較[M(P25,P75)]

2.3輕型組、中型組和重型組血清GFAP、Hcy水平的比較 輕型組、中型組和重型組GFAP、Hcy水平比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。中型組患者GFAP、Hcy水平高于輕型組,且重型組患者高于中型組和輕型組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 輕型組、中型組和重型組血清GFAP、Hcy水平的比較[M(P25,P75)]

2.4不同住院時間AIS患者血清GFAP、Hcy水平比較 不同住院時間AIS患者GFAP水平比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);住院時間在8～14 d患者的GFAP水平高于住院時間<8 d的患者,住院時間>14 d患者的GFAP水平高于住院時間<8 d的患者,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 不同住院時間AIS患者血清GFAP、Hcy水平比較[M(P25,P75)]

2.5血清GFAP、Hcy單獨及聯(lián)合診斷AIS的價值 血清GFAP、Hcy單獨及2項指標(biāo)聯(lián)合檢測評估發(fā)生AIS的AUC分別為0.816、0.772、0.857,2項指標(biāo)聯(lián)合檢測的AUC顯著高于Hcy單獨檢測(Z=-3.811,P<0.05)。見表5,圖1。

圖1 血清GFAP、Hcy單獨及聯(lián)合診斷AIS的ROC曲線

表5 血清GFAP、Hcy單獨及聯(lián)合診斷AIS的價值

2.6血清GFAP、Hcy水平與AIS嚴(yán)重程度及WBC的相關(guān)性分析 Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示,血清GFAP與Hcy呈正相關(guān)(r=0.253,P=0.001),GFAP水平與NIHSS評分、住院時間、WBC均呈現(xiàn)正相關(guān)(r=0.238、0.300、0.226,P<0.05),Hcy水平與NIHSS評分、WBC呈正相關(guān)(r=0.342、0.274,P<0.05)。

3 討 論

缺血性腦卒中是最常見的腦卒中類型,大約占全球中風(fēng)患者的87%,其中以AIS尤為嚴(yán)重,直接影響到患者的生命安全及生存質(zhì)量,宜早預(yù)防、早診斷、早治療[8]。

GFAP是一種以單體形式存在的Ⅲ型中間絲狀蛋白,是神經(jīng)系統(tǒng)中星形膠質(zhì)細(xì)胞的主要成分;在正常生理情況下,GFAP對神經(jīng)元起到支持、營養(yǎng)與保護(hù)的作用,但當(dāng)血腦屏障受損時會刺激星形膠質(zhì)細(xì)胞大量分泌 GFAP,先擴(kuò)散入腦脊液再進(jìn)入血液循環(huán),從而導(dǎo)致血液中GFAP水平升高。既往研究發(fā)現(xiàn),血清GFAP水平為缺血性腦卒中早期診斷提供有價值參考,其在缺血性腦卒中發(fā)作8 h內(nèi)升高,48～72 h達(dá)到高峰[9],且高GFAP水平與缺血性腦卒中患者神經(jīng)功能缺損的嚴(yán)重程度和腦損傷程度有關(guān),對于評估患者病情和預(yù)測預(yù)后具有重要意義[10-11]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),觀察組血清GFAP水平高于對照組,中型組患者GFAP水平高于輕型組,重型組患者高于中型組和輕型組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。GFAP水平與NIHSS評分呈正相關(guān)(r=0.238,P<0.05)。住院時間在8～14 d患者的GFAP水平高于住院時間<8 d的患者,住院時間>14 d患者的GFAP水平高于住院時間<8 d的患者,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),提示GFAP水平與AIS患者的神經(jīng)功能缺損程度和病情預(yù)后密切相關(guān),可作為診斷AIS患者不良預(yù)后的生物標(biāo)志物。AIS患者是由于動脈粥樣硬化導(dǎo)致的腦部缺血、缺氧[12],而Hcy是促進(jìn)動脈粥樣硬化發(fā)生和血栓形成的重要因子,其可能的機制是Hcy水平升高導(dǎo)致血管內(nèi)皮選擇性通透功能障礙,引起脂蛋白和膽固醇在血管壁沉積,滅活血管舒張因子一氧化氮,同時會增加血小板凝集和凝血因子活性[13]。本研究結(jié)果顯示,觀察組的Hcy水平高于對照組,輕型組、中型組和重型組患者的Hcy水平比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),且Hcy水平與NIHSS評分呈正相關(guān)(r=0.342,P<0.05)。提示Hcy可作為評估AIS嚴(yán)重程度的生物標(biāo)志物,與既往研究結(jié)果一致[14-16]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),觀察組的WBC、TC水平高于對照組,而HDL-C水平低于對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。有研究發(fā)現(xiàn),高水平TC和高水平WBC可能是AIS發(fā)生的危險因素[17]。且本研究中Hcy水平與NIHSS評分、WBC呈正相關(guān)(r=0.342、0.274,P<0.05)。由于缺血、缺氧會增加局部炎癥反應(yīng)從而導(dǎo)致炎癥因子增加,炎癥因子異常增加可加劇腦缺血再灌注引起的神經(jīng)元損傷,因此,炎癥反應(yīng)的水平也與缺血性腦卒中嚴(yán)重程度密切相關(guān)[18]。

在本研究中,血清GFAP、Hcy單獨及聯(lián)合檢測AIS的AUC分別為0.816、0.772、0.857,聯(lián)合2項指標(biāo)檢測的AUC顯著高于Hcy單獨檢測(Z=-3.811,P<0.001)。因此GFAP、Hcy是輔助診斷AIS的重要指標(biāo),在 AIS診斷和疾病評估中有較高的價值,且二者聯(lián)合檢測診斷的臨床價值更高。但由于本研究樣本量少、樣本選擇范圍局限,存在一些不足,仍需多中心、橫斷面隨機對照試驗來驗證。

綜上所述,AIS患者血清GFAP、Hcy水平均升高,且與病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān),可用作臨床AIS早期檢測和評估病情嚴(yán)重程度的有效指標(biāo),具有一定臨床參考價值。