中山大學附屬第一醫院于君教授團隊揭示非酒精性脂肪肝炎導致肝癌的機制

近日，中山大學附屬第一醫院精準醫學研究院名譽院長于君教授團隊研究成果“Targeting N6-methyladenosine reader YTHDF1 with siRNA boosts anti-tumor immunity in NASH-HCC by inhibiting EZH2-IL-6 axis”發表于肝臟疾病領域頂級期刊Journal of Hepatology雜志（IF=26）。該研究首次揭示了YTHDF1在非酒精性脂肪肝炎導致的肝細胞癌（NASH-HCC）中的功能作用、分子機制及其與腫瘤免疫微環境的相互作用，為改善NASHHCC抗PD-1耐藥提供了聯合治療新策略。

肝細胞癌（HCC）是世界上第六大最常見的癌癥，也是第三大癌癥死亡原因。非酒精性脂肪肝炎（NASH）是指除酒精和其他明確的肝損因素之外導致的肝細胞內脂肪過度沉積為主要特征的臨床病理綜合征，與肥胖、胰島素抵抗和高脂血癥有關，最終可能發展為肝纖維化、肝硬化和肝癌。隨著人們生活水平的提高，NASH相關的肝癌（NASH-HCC）占肝癌患者的比例也越來越高。然而，NASH-HCC的發生機制目前尚不清楚，仍缺乏有效的靶向藥物對NASH-HCC進行治療，臨床也尚未有NASH-HCC的藥物或者生物療法。利用單克隆抗體靶向免疫檢查點阻斷（ICB）已成為HCC的一種新興治療手段，然而NASHHCC對ICB治療沒有響應，因此亟須探究NASH-HCC對ICB治療耐藥的原因，尋找NASH-HCC潛在的治療靶點，從而克服NASH-HCC對ICB治療耐藥。

m6A是真核mRNA中最豐富的化學修飾，參與調節RNA的穩定性、核加工、轉運、定位、翻譯，它和RNA-蛋白相互作用來調節RNA的命運。YTH N6-甲基腺苷RNA結合蛋白1（YTHDF1）是RNA m6A修飾的“閱讀器”蛋白，可以通過YTH結構域特異性地識別RNA上m6A修飾的位點，促進核糖體附著在含有m6A修飾的mRNA上。然而對于YTHDF1在HCC，特別是NASH-HCC發病機制中的作用，以及對腫瘤免疫微環境的調節功能，目前還知之甚少。

該研究發現YTHDF1在NASH-HCC患者腫瘤組織中相較于腫瘤周圍組織顯著升高，利用YTHDF1肝臟特異性過表達小鼠以及飲食模型誘導的NASH-HCC自發成瘤模型，發現YTHDF1可以促進NASH-HCC的發生和發展。RNA seq結果提示YTHDF1主要影響免疫系統相關信號通路，sc-RNA seq和流式分析結果顯示YTHDF1誘導髓源性抑制細胞（MDSCs）的積累并抑制細胞毒性CD8+T細胞的功能。

MDSCs的募集和功能主要受到細胞因子的調控，為了研究YTHDF1如何影響MDSCs的功能，該研究通過細胞因子ELISA array結合腫瘤細胞與免疫細胞體外共培養實驗發現YTHDF1通過誘導IL-6的分泌，介導MDSCs的募集和激活，導致細胞毒性CD8+T細胞功能障礙。

通過m6A-seq，RIP-seq，ribo-seq和蛋白質組等多組學研究鑒定出EZH2 mRNA是YTHDF1的關鍵下游靶點。YTHDF1識別EZH2 mRNA上m6A修飾位點促進EZH2的翻譯，EZH2進一步促進IL-6的表達和分泌。LNP包裹siRNA治療是FDA批準的可用于臨床治療的方案，LNP-siRNA或者YTHDF1基因敲除靶向YTHDF1聯合anti-PD-1治療可顯著提高NASH-HCC腫瘤對ICB治療的敏感性。

該研究首次發現YTHDF1-EZH2-IL-6信號軸可以招募和激活MDSCs，導致細胞毒性CD8+T細胞功能障礙，從而促進NASHHCC的發生和發展。靶向YTHDF1可以提高NASH-HCC抗anti-PD1免疫治療應答新靶點的敏感度。

中山大學附屬第一醫院精準醫學研究院名譽院長于君教授為該論文通訊作者，特聘副研究員王莉娜為第一作者。