蜂王漿如何在蜂群中保持活性

劉玉玲 王志 郝京玉 王琦 陳東海 牛慶生│編譯

吉林省養蜂科學研究所，吉林132108

蜂王漿是蜂王的主要食物來源，是由年輕工蜂的咽下腺和上顎腺分泌的，傳統上認為它具有多種營養和藥理作用，如降壓、抗腫瘤、類胰島素、消毒作用等。

蜂王是后天培養而不是天生的，用蜂王漿喂養蜂王幼蟲是這一過程的關鍵。沒有這種特殊的食物，幼蟲將無法正常發育。蜂王完全以蜂王漿為食，這是它們體積大、壽命長的原因。它們平均比工蜂大42%、重60%，壽命是工蜂的40倍。蜂王的壽命為4～5年，而工蜂僅為7周。蜂王每天能產2000～3000枚卵，卵重相當于其體重的2.5倍。蜂王長壽的秘密和非凡的生殖能力完全是因為它的飲食—蜂王漿，這通常被認為是蜂王和工蜂在形態和功能上存在顯著差異的主要原因。

中國蜂王漿生產可追溯到20世紀50年代。1957年，無王群生產蜂王漿，產量極低。1959年，中國農業科學院將王漿生產確定為重點項目。1960～1980年期間蜂王漿產量為每群3天10克的低水平，是1960年時的兩倍。1979年，產量迅速增加，全國年產量達到150噸。從那時起，特別是在20世紀90年代，蜂王漿產量飛速增長。目前，中國蜂王漿產量約為每年2000噸，是世界上最大的蜂王漿生產國，平均每群蜂王漿產量為8kg，近一半蜂王漿（1000噸）用于國內消費。

日本是世界第二大蜂王漿消費國和最大的進口國，每年從中國進口近700噸蜂王漿，占中國蜂王漿出口總量的60%以上。

蜂王漿有新鮮、干燥和加工狀態。一般情況下，蜂王漿從蜂群中取出后會迅速冷凍，以保持其生物活性。然而，一些養蜂人和消費者指出，蜂王漿在蜂群內質量穩定，并在34℃下發揮其生物功能正是基于這樣一個事實：在它們的發育階段，蜂王幼蟲在蜂群內34℃的溫度下，以蜂王漿為食長達6天，并且發育良好。說明在此條件下，蜂王漿品質穩定，功能最佳。針對這一現象，主張蜂王漿應在室溫下長期保存。

未經處理的蜂王漿按原樣出售和食用，也可以在-20℃或更低溫度下儲存，而凍干型，無論是純的還是與其他成分混合，通常被封裝或以片劑形式儲存在低溫或室溫下。然而，如果儲存不當，蜂王漿會變質或變壞，蛋白質逐漸變質，粘度和可滴定酸含量增加，失去其商業價值，這些變化可能是由美拉德反應或脂質氧化引起的。新鮮蜂王漿的蛋白質由水溶性蛋白質（WSP）和水不溶性部分組成。根據所使用的提取條件，水溶性蛋白質（WSP）是主要組分，占總蛋白質的46%～89%。研究蜂王漿的組成、生理活性與新鮮度之間的關系，以確定一種可用于評價蜂王漿質量的標志物；研究蜂王漿在貯藏過程中成分的變化可尋找新鮮度的標志。蜂王漿的生物活性成分10-羥基-2-癸烯酸和維生素含量在40℃貯藏7天期間沒有變化，蜂王漿的特定蛋白質即蜂王漿蛋白（RJP-1），在各種條件下（從4℃到50℃貯藏7天）逐漸降解。RJP-1的降解率與貯藏溫度和貯藏時間成正比，RJP-1純化至均一性，并鑒定為分子量為57kDa的單體糖蛋白。

作為一種可能的質量標志，研究蜂王漿對雄性小鼠的抗疲勞作用。所有小鼠被迫游泳15分鐘，然后休息一段時間后，測量疲勞的最大游泳時間。與其他組相比，蜂王漿組的游泳耐力顯著增加。該組小鼠在游泳后表現出顯著降低的血清乳酸和血清氨的積累以及降低的肌糖原消耗。在這些試驗中，40℃儲存7天的蜂王漿組和對照組之間沒有顯著差異。結果表明蜂王漿能改善小鼠運動后的體力疲勞，這種抗疲勞作用似乎與蜂王漿的新鮮度有關，可能與57kDa蛋白的含量相關。此外，57kDa蛋白能刺激肝細胞DNA合成，延長肝細胞增殖，增加白蛋白生成。因此，57kDA蛋白可以作為蜂王漿品質的合適標記，57kDa蛋白質被命名為royalactin（蜂王漿衍生的肝細胞激活蛋白）。

用臺灣中部和南部地區意大利蜜蜂生產的蜂王漿進行蜂王漿新鮮度指標研究。新鮮蜂王漿在37℃室溫下儲存3個月，每周取樣進行毛細管電泳分析。為了鑒定新鮮蜂王漿樣品中的蛋白質峰，使用兩種緩沖液，使用pH2.5磷酸鹽和pH6.0檸檬酸鹽。使用pH2.5的磷酸鹽緩沖液可以分離四個峰（N1至N4），而使用pH6.0的檸檬酸鹽緩沖液可以分離兩個峰（R1和R2）。對儲存樣品的分析顯示，儲存1周后，蜂王漿樣品中的蛋白質峰模式有顯著變化；儲存在37℃的樣品比儲存在室溫的樣品有更大的變化。使用每個峰的高度進行比較，得到3個不同的比值，N1/N2、N3/N4和R2/RI。這3個比值均可作為評價蜂王漿新鮮度的指標，R2/R1的值尤其敏感。該方法用于評價隨機購買的20個新鮮蜂王漿樣品的新鮮度，樣本的Nl/N2在1.23和1.46之間，N3/N4在0.10和0.42之間，R2/RI在0.23和0.43之間。

研究蜂王漿在-20℃、4℃和室溫下避光貯藏7個月的品質變化。結果表明，蜂王漿在室溫貯藏過程中，顏色、粘度、水溶性蛋白（WSP）和單糖組分發生了顯著變化，而在-20℃貯藏過程中變化不明顯。粘度和褐變強度隨著貯藏時間的延長而增加，并隨著環境溫度的升高而增強。通過凝膠過濾獲得蜂王漿WSP的兩個主要組分，而通過SDSPAGE獲得4～5個不同的蛋白質組分。結果表明，蜂王漿在貯藏過程中的品質劣變是由美拉德褐變反應引起的。

那么為什么蜂王漿在蜂群內35℃不變質呢？當卵孵化時，新出現的幼蟲能夠自發地吮吸蜂王漿。出生卵重0.1mg，蜂王產下的卵直立于蜂巢底部。在卵狀態的三天里，卵慢慢地一寸一寸地向蜂巢底部傾斜，在第三天，長成新月形幼蟲出現在年輕工蜂為它分泌的新鮮蜂王漿的王臺上。在接下來的三天里，不管什么種姓（工蜂、雄蜂或蜂王），幼蟲都會被喂食蜂王漿。工蜂給幼蟲喂食的方法是在幼蟲身體周圍堆積蜂王漿，使蜂王漿的攝入變得容易。其實幼蟲趴在它的食物上，就是工蜂不斷為它分泌的新鮮蜂王漿。在這三天時間里，工蜂和雄蜂幼蟲的食欲很小，但每天必須攝入相當數量的食物，這表明它們必須晝夜不停地進食，而保育工蜂必須連續不斷地仔細照料它們。據報道，工蜂對每個幼蟲的訪問持續時間僅為2至3秒，24小時內至少有1000次訪問。

三天后，工蜂和雄蜂幼蟲將停止接受新鮮的蜂王漿，取而代之的是蜂蜜和花粉的混合物。相比之下，蜂王幼蟲接受大量新鮮的蜂王漿，這是它們的專屬食物，在整個幼蟲階段堆積在王臺的底部。為了觀察不連續喂食對蜂王幼蟲的影響，進行了一個實驗。幼蟲羽化48小時后，在特制的架上裝有幼蟲的蜂王王臺被封閉在尼龍篩網中，這樣工蜂就不能喂養它們。結果，僅僅一個晚上后，蜂王漿在細胞中變干，所有的幼蟲都死了。很明顯，如果工蜂不將蜂王漿連續分泌到王臺中，那么蜂王漿在35℃的群體溫度下會在12小時內變干。在正常情況下，幼蟲每天接受工蜂超過1000次的喂食，以確保有足夠的新鮮蜂王漿。研究表明，蜂王漿的積累在移蟲后的第一天最少，在移蟲后的第三天即72小時，達到高峰。但在第四天，幼蟲消耗了王臺中的大部分蜂王漿。養蜂人經常注意到，當處女蜂王出現時，蜂王王臺里會剩下一些蜂王漿。然而，這些又干又舊，沒有價值。由此可見，幼蟲在蜂王王臺中所攝取的蜂王漿是工蜂不斷分泌的新鮮蜂王漿。因此，幼蟲攝入的蜂王漿不是在35℃下儲存9天的即食餐，而是工蜂連續分泌的。

目前，鮮蜂王漿的國際貯藏標準是-10℃，日本規定蜂王漿必須保存在-15℃到-20℃之間。2002年7月25日，中國農業農村部發布了蜂王漿冷凍和干粉蜂王漿儲存的國家質量標準，規定新鮮蜂王漿應保存在-18℃以下，保質期為24個月。如果蜂王漿干粉在室溫下密封保存，保質期為3個月，如果溫度為-5℃，保質期可延長至24個月。根據上述討論，很明顯，除了冷凍以外，沒有什么能保證蜂王漿的質量，特別是在保護生物活性方面，如丙種球蛋白、超氧化物歧化酶（SOD）、活性肽、類胰島素、類固醇和酶。因此，在這些條件下保存的蜂王漿可以保證保健和治療的有效性。