保婦康栓聯合干擾素治療宮頸高危型人乳頭瘤病毒感染下焦濕熱證的臨床觀察

賈金峰,高 峰,呂曉霞

(山西省臨汾市堯都區人民醫院,山西 臨汾 041000)

人乳頭瘤病毒(HPV)是一種DNA 病毒,具有嗜上皮性,特異性較高,可通過感染皮膚黏膜處鱗狀上皮,使其異常增生,持續的高危型HPV(HR-HPV)感染是導致宮頸高級別癌前病變及宮頸癌的主要原因[1]。據統計,我國每年新發宮頸癌患者13.15 萬人,在世界總宮頸癌新發病例中占25%,嚴重威脅患者的生命,需及時進行防治[2]。干擾素具有廣譜抗病毒作用,可調節免疫,抑制炎性反應。保婦康栓是中藥制劑,具有清熱燥濕、消腫止痛的功效,常用于治療濕熱瘀滯型帶下病。本研究觀察保婦康栓聯合干擾素治療宮頸HR-HPV 感染下焦濕熱證的臨床療效,現報道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選擇2020年1月至2022年1月在臨汾市堯都區人民醫院治療的86例宮頸HR-HPV 感染下焦濕熱證患者,按隨機數字表法分為對照組和觀察組,每組43例。對照組年齡22~69歲,平均(51.41±3.02)歲;病程2~7個月,平均(5.15±0.31)個月。觀察組年齡21~57歲,平均(51.53±3.15)歲;病程1~7個月,平均(5.06±0.22)個月。兩組患者一般資料比較,差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。本研究經臨汾市堯都區人民醫院醫學倫理委員會批準(倫理審批號:20A7758)。

1.2 診斷標準

(1)西醫診斷標準 參照《婦產科學》制定診斷標準[3]。癥狀:陰道分泌物增多,有氣味,分泌物呈淡黃色或膿性,可在婦科指檢或性生活后產生接觸性出血,伴隨分泌物刺激,導致外陰瘙癢或不適。體征:婦科檢查示子宮頸糜爛樣改變,或伴隨光滑、充血現象。宮頸脫落細胞HR-HPV 的DNA 檢測結果示存在1種或多種亞型(HPV33、52、39、59、35、31、68、66、58、56)。符合上述標準,即可診斷為宮頸HR-HPV 感染。

(2)中醫診斷標準 參考《中醫婦科學》中帶下病下焦濕熱證的辨證標準[4]。帶下量多質稠如膿,臭穢,或夾血色,或陰部紅腫灼痛,或陰中灼痛,或發熱汗出,或少腹疼痛拒按,口干飲少,或頭昏重痛,或脘腹脹滿,大便干結,或小便黃熱或有尿痛,舌紅,苔黃膩而厚,脈滑數或弦數。

1.3 納入標準 符合上述診斷標準;確診后病情持續1年及以上;依從性良好;參與本研究后1年內無生育計劃;患者及家屬簽署知情同意書。

1.4 排除標準 合并凝血功能障礙、臟腑功能不全、其他感染、免疫系統疾病、惡性腫瘤者;精神障礙,無法正常溝通者;對本研究所用藥物過敏或存在禁忌證者;參與本研究前6個月使用過激素、抗病毒藥物或免疫調節劑治療者;妊娠期或哺乳期女性;有盆腔放射治療、子宮切除和宮頸手術史者。

2 治療方法

2.1 對照組 采用重組人干擾素α2b凝膠[兆科藥業(合肥)有限公司,國藥準字S20010054,5 g/支]治療,每次1支,每日4次,涂于陰道,每次涂藥后按摩2~3 min。連續治療3個月。

2.2 觀察組 在對照組基礎上采用保婦康栓(海南碧凱藥業有限公司,國藥準字Z46020058,1.74 g/粒)治療,每晚睡前使用1粒,即洗凈外陰部,將栓劑塞入陰道深部。連續治療3個月。

3 療效觀察

3.1 觀察指標 ①T 淋巴細胞亞群指標[CD+4、CD+8、Foxp3+調節性T 細胞(Foxp3+Tregs)]及免疫球蛋白M(Ig M)水平。采用流式細胞儀(上海寰熙醫療器械有限公司)檢測兩組患者治療前后CD+4、CD+8、Foxp3+Tregs水平,采用免疫比濁法檢測兩組患者Ig M 水平。②巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)、基質細胞衍生因子1(SDF-1)、腫瘤壞死因子受體相關因子6(TRAF6)、Toll樣受體4(TLR4)水平。采用酶聯免疫吸附法(試劑盒由深圳市科潤達生物工程有限公司提供)檢測兩組患者治療前后 M-CSF、SDF-1、TRAF6、TLR4水平。③氧化應激指數(OSI)、總還原態(TAS)、總氧化態(TOS)、活性氧(ROS)水平。采用全自動生化分析儀(濟南博鑫生物技術有限公司)檢測兩組患者治療前后OSI、TAS、TOS 水平。采用Fenton法(試劑盒由上海生物工程有限公司提供)檢測兩組患者治療前后ROS水平。④HPV-DNA 水平。通過無菌棉簽刮取兩組患者治療前后宮頸上皮組織,采用聚合酶鏈反應(PCR)法檢測HPV-DNA 水平。

3.2 療效評定標準 參照《中醫病證診斷療效標準》擬定療效評定標準[5]。痊愈:諸癥消失,陰道分泌物量、氣味、顏色等均恢復正常,實驗室指標正常;好轉:諸癥減輕,陰道分泌物量、氣味、顏色等均好轉,實驗室指標明顯改善;無效:臨床癥狀,陰道分泌物量、氣味、顏色及實驗室指標均無改善。總有效率=(痊愈例數+好轉例數)/總例數×100%。

3.3 統計學方法 采用SPSS 23.0統計軟件分析數據。計量資料以均數±標準差(±s)表示,組內比較采用配對樣本t檢驗,組間比較采用獨立樣本t檢驗;計數資料用百分率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

3.4 結果

(1)CD+4、CD+8、Foxp3+Tregs、Ig M 水平比較治療前,兩組患者CD+4、CD+8、Foxp3+Tregs、Ig M 水平比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。治療后,兩組患者CD+4、Foxp3+Tregs、Ig M 水平均較治療前升高,且觀察組均高于對照組,差異均有統計學意義(P<0.05);兩組患者CD+8水平均較治療前降低,且觀察組CD+8水平低于對照組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組宮頸高危型人乳頭瘤病毒感染下焦濕熱證患者治療前后T淋巴細胞亞群指標及免疫球蛋白M 水平比較(±s)

表1 兩組宮頸高危型人乳頭瘤病毒感染下焦濕熱證患者治療前后T淋巴細胞亞群指標及免疫球蛋白M 水平比較(±s)

注:1.Foxp3+Tregs,Foxp3+調節性T 細胞;Ig M,免疫球蛋白M。2.與本組治療前比較,△P<0.05;與對照組治療后比較,▲P<0.05。

組別 例數 時間CD+4(%)CD+8(%)Foxp3+Tregs(%)Ig M 水平(g/L)觀察組 43 治療前11.12±1.23 12.82±1.80 8.42±1.10 1.21±0.28治療后17.11±2.09△▲ 11.05±1.01△▲10.95±2.01△▲ 1.77±0.35△▲對照組 43 治療前11.15±1.35 12.75±1.75 8.30±1.15 1.25±0.25治療后14.14±1.65△ 11.84±1.39△ 9.84±1.59△ 1.51±0.31△

(2)TRAF6、M-CSF、TLR4、SDF-1水平比較 治療前,兩組患者TRAF6、M-CSF、TLR4、SDF-1 水平比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。治療后,兩組患者TRAF6、M-CSF、TLR4、SDF-1水平均較治療前降低,且觀察組均低于對照組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組宮頸高危型人乳頭瘤病毒感染下焦濕熱證患者治療前后巨噬細胞集落刺激因子、基質細胞衍生因子1、腫瘤壞死因子受體相關因子6、Toll樣受體4水平比較(±s)

表2 兩組宮頸高危型人乳頭瘤病毒感染下焦濕熱證患者治療前后巨噬細胞集落刺激因子、基質細胞衍生因子1、腫瘤壞死因子受體相關因子6、Toll樣受體4水平比較(±s)

注:1.TRAF6,腫瘤壞死因子受體相關因子6;M-CSF,巨噬細胞集落刺激因子;TLR4,Toll樣受體4;SDF-1,基質細胞衍生因子1。2.與本組治療前比較,△P<0.05;與對照組治療后比較,▲P<0.05。

組別 例數 時間 TRAF6水平(ng/mL)M-CSF水平(mg/L)TLR4水平(pg/mL)SDF-1水平(ng/mL)觀察組 43 治療前 2.58±0.59 17.45±4.89 32.18±5.17 7.45±1.40治療后 0.66±0.14△▲ 6.45±1.84△▲ 5.96±0.94△▲ 2.98±0.82△▲對照組 43 治療前 2.43±0.65 17.56±4.94 32.63±5.55 7.53±1.45治療后 1.12±0.33△9.32±2.63△ 10.51±2.33△ 4.06±1.21△

(3)OSI、TAS、TOS、ROS水平比較 治療前,兩組患者OSI、TAS、TOS、ROS水平比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。治療后,兩組患者OSI、TOS、ROS水平均較治療前降低,觀察組OSI、TOS、ROS水平低于對照組,差異均有統計學意義(P<0.05);兩組患者TAS水平均較治療前升高,觀察組TAS水平均高于對照組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 兩組宮頸高危型人乳頭瘤病毒感染下焦濕熱證患者治療前后氧化應激指數及總還原態、總氧化態、活性氧水平比較(±s)

表3 兩組宮頸高危型人乳頭瘤病毒感染下焦濕熱證患者治療前后氧化應激指數及總還原態、總氧化態、活性氧水平比較(±s)

注:1.OSI,氧化應激指數;TAS,總還原態;TOS,總氧化態;ROS,活性氧。2.與本組治療前比較,△P<0.05;與對照組治療后比較,▲P<0.05。

組別 例數 時間OSI TAS 水平(mmol Trolox Eq/L)TOS水平(μmol H2 O2 Eq/L)ROS水平(μmol/L)觀察組 43 治療前121.93±25.88 1.03±0.02 132.05±21.01 650.20±30.95治療后27.62±6.59△▲ 1.15±0.09△▲ 40.16±10.03△▲423.61±20.08△▲對照組 43 治療前120.62±26.15 1.05±0.03 130.04±20.01 652.31±32.01治療后52.35±9.61△ 1.09±0.07△ 61.12±12.02△ 450.93±25.56△

(4)HPV-DNA 水平比較 治療前,兩組患者HPV-DNA 水平比較,差異無統計學意義(P>0.05)。治療后,兩組患者HPV-DNA 水平均較治療前降低,且觀察組低于對照組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 兩組宮頸高危型人乳頭瘤病毒感染下焦濕熱證患者治療前后人乳頭瘤病毒-DNA水平比較(±s)

表4 兩組宮頸高危型人乳頭瘤病毒感染下焦濕熱證患者治療前后人乳頭瘤病毒-DNA水平比較(±s)

注:與本組治療前比較,△P<0.05;與對照組治療后比較,▲P<0.05。

組別例數治療前水平治療后水平觀察組43 5.38±1.09 1.26±0.24△▲對照組43 5.32±1.03 1.65±0.35△

(5)臨床療效比較 觀察組總有效率為97.67%(42/43),高于對照組的86.05%(37/43),差異有統計學意義(P<0.05)。見表5。

表5 兩組宮頸高危型人乳頭瘤病毒感染下焦濕熱證患者臨床療效比較

4 討論

HPV 是一種嗜上皮組織的環狀雙鏈DNA 病毒,主要由病毒基因組DNA 及兩種病毒衣殼蛋白組成,無包膜[6]。持續的宮頸HR-HPV 感染可引發宮頸癌,嚴重影響患者的生命安全[7]。HPV 的主要感染部位為黏膜上皮及皮膚上皮,其中HPV 的E2、E1蛋白調節病毒基因組DNA 的復制及轉錄,E4 蛋白促進病毒成熟。HR-HPV 中含有多種早期致癌蛋白,對宮頸上皮細胞有刺激生長和轉化作用。HPV 感染早期,機體免疫系統可將HPV 清除,但當人體免疫防御機制發生障礙,或宿主、病毒產生基因突變時,HPV 中的DNA 片段會侵入宿主細胞染色體,調控相關基因,產生HPV 持續感染,誘導疾病產生[8]。干擾素是廣譜抗病毒藥物,不僅能抑制病毒增殖,調節機體免疫功能,還能進入單核細胞,抑制腫瘤細胞增殖、分裂[9]。

宮頸HR-HPV 感染歸屬中醫“帶下病”范疇。先天稟賦不足,無力抵御濕、熱、毒邪侵襲,加之情志不暢、飲食不節,郁久化熱,濕濁內生,阻滯經絡,毒邪無法排出,侵犯沖任二脈,發為帶下病,治療以清熱燥濕為主[10]。保婦康栓的主要成分為莪術油、冰片,其中莪術油屬于冰羥基莪術油,具有清熱解毒、燥濕殺蟲的功效,冰片具有清熱解毒、止痛生肌作用。藥理學研究表示,莪術油中含有莪術醇、莪術酮、莪術雙酮等有效成分,具有抗病毒、抗癌、提升機體免疫力等作用[11]。冰片中含有龍腦、異龍腦成分,具有抗菌、抗炎、鎮痛作用[12]。外治法安全性高,毒副作用少,可避免藥物服用的肝臟首過效應,減少胃腸刺激。

宮頸HR-HPV 感染患者免疫功能低下,CD+8屬于抑制性T 淋巴細胞,CD+4屬于輔助性T 淋巴細胞,Ig M 與免疫功能呈正相關,Foxp3+Tregs水平低下可提示免疫系統功能紊亂[13]。本研究結果顯示,治療后,觀察組CD+4、Foxp3+Tregs、Ig M 水平均高于對照組,CD+8水平低于對照組,表明保婦康栓聯合干擾素治療宮頸HR-HPV 感染下焦濕熱證患者,可改善免疫功能。M-CSF主要由巨噬細胞、纖維細胞等分泌,可參與免疫應答及炎性反應[14];SDF-1由肝竇內皮細胞、肝星狀細胞等產生,是一種小分子蛋白,廣泛表達于干細胞、免疫細胞,可誘導機體發生炎性反應[15];TRAF6、TLR4可激活干擾素-κB(NF-κB)信號通絡,促進炎癥產生[16]。本研究結果顯示,治療后,觀察組TRAF6、TLR4、M-CSF、SDF-1水平均低于對照組,表明保婦康栓聯合干擾素治療宮頸HR-HPV 感染下焦濕熱證患者,可抑制炎性反應。HR-HPV 感染常伴隨氧化應激反應[17]。OSI、TOS、ROS、TAS與氧化應激反應相關。本研究結果顯示,治療后,觀察組OSI、TOS、ROS 水平均低于對照組,TAS 水平高于對照組,表明保婦康栓聯合干擾素治療宮頸HR-HPV 感染下焦濕熱證患者,可抑制氧化應激反應。本研究結果還顯示,治療后,觀察組HPV-DNA 水平低于對照組,總有效率高于對照組,表明保婦康栓聯合干擾素治療宮頸HR-HPV 感染下焦濕熱證患者,可降低HPVDNA 水平,提升臨床療效。

綜上所述,保婦康栓聯合干擾素治療宮頸HRHPV 感染下焦濕熱證,可改善患者的免疫功能,抑制機體的炎性反應及氧化應激反應,降低HPV-DNA 水平,療效優于單獨使用干擾素,值得臨床借鑒。