GCDFP-15、Calponin 與宮頸癌發(fā)病風險及預后生物學行為的關系

葉薇，盧雪芳，羅艷敏

江西省安遠縣人民醫(yī)院 （江西安遠 342100）

宮頸癌是指宮頸細胞發(fā)生癌變，其發(fā)病率和病死率在婦科疾病中均較高。其主要組織學類型為宮頸鱗癌，也有部分是宮頸腺癌[1-2]。巨囊性病液體蛋白-15（gross cystic disease fluid protein 15，GCDFP-15）是一種15 kDa 的單鏈蛋白，常見于組織囊性病變的囊泡液中。其編碼基因位于7 號染色體，是一種高度特異和敏感的乳腺癌標志，可用于乳腺癌的鑒別診斷[3]。類肌鈣蛋白（Calponin）是一種多功能蛋白，可調節(jié)平滑肌和非肌肉細胞中肌動蛋白的功能。研究表明，Calponin 水平對于腫瘤發(fā)展具有重要意義，低水平Calponin 會增強腫瘤細胞的遷移、增殖和血管生成能力[5]。尋找一種有效的分子標記物對宮頸癌的預后具有重要意義[5]。鑒于此，本研究分析GCDFP-15、Calponin 水平與宮頸癌發(fā)病風險及預后生物學行為的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年12 月至2022 年12 月醫(yī)院收治的68例宮頸癌患者為研究對象，收集患者的臨床資料、手術記錄及隨訪資料。按照國際婦產科協(xié)會2009 臨床分期分為Ⅰ期35 例、Ⅱ期33 例。本研究經醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準，患者均簽署知情同意書。

納入標準：臨床資料完整；術前未接受抗腫瘤治療。排除標準：合并其他重大疾病；認知功能不全；合并嚴重血液系統(tǒng)疾病。

1.2 方法

收集所有患者的宮頸癌手術標本，采用中性甲醛（4%）固定，石蠟包埋后進行切片（切片厚度為4 μm）。加入二甲苯進行脫蠟，加入5%的過氧化氫；常溫下孵育10 min，加入磷酸鹽緩沖液孵育5 min，再用蒸餾水沖洗3 次，隨后加入體積分數為5%的山羊血清抗體封閉10 min，后分別滴加基因科技股份有限公司的單克隆鼠抗人GCDFP-15 抗體、鼠抗人Calponin 抗體，在4 ℃溫度下孵育過夜；再用蒸餾水沖洗3 次，滴加相應二抗在37 ℃溫度下孵育30 min，再用蒸餾水沖洗3 次，5 min/次；加入二代辣根酶標記的工作液在37 ℃溫度下發(fā)育10 min；對其進行樹膠封片處理，并置于顯微鏡下觀察結果。

1.3 觀察指標及判定標準

收集兩組患者的臨床資料、GCDFP-15 及Calponin 水平。采用單因素和多因素分析影響宮頸癌患者預后的影響因素。GCDFP-15 陽性的判定標準：細胞質著色為棕黃色，且陽性細胞占比＞5%。Calponin 陽性的判定標準：細胞質著色為肌上皮細胞或部分間質細胞[6]。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 20.0 統(tǒng)計軟件進行數據分析。計數資料以率表示，采用χ2檢驗。采用Logistic回歸分析宮頸癌預后的影響因素。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 GCDFP-15、Calponin 水平與宮頸癌臨床病理特征的關系

GCDFP-15、Calponin 水平與臨床分期、淋巴結轉移有關（P＜0.05），與年齡、病理類型、癌灶大小、肌層浸潤無關（P＞0.05），見表1。

表1 GCDFP-15、Calponin 水平與宮頸癌臨床病理特征的關系[例（%）]

2.2 影響宮頸癌預后的單因素分析

單因素分析結果顯示，臨床分期、淋巴結轉移、GCDFP-15 及Calponin 水平與宮頸癌預后有關（P＜0.05），而年齡、病理類型、癌灶大小、肌層浸潤與宮頸癌預后無關（P＞0.05），見表2。

表2 宮頸癌預后與臨床病理的單因素分析[例（%）]

2.3 影響宮頸癌預后的多因素分析

將2.2 中比較差異有統(tǒng)計學意義的變量作為自變量并賦值，將宮頸癌患者預后作為因變量（＞4 年=0，≤4 年=1），自變量賦值見表3。多因素分析結果顯示，臨床分期、淋巴結轉移、GCDFP-15 及Calponin 水平均為影響宮頸癌患者預后的獨立影響因素（P＜0.05），見表4。

表3 生物學行為與宮頸癌預后關系的多因素分析

3 討論

目前，臨床只有宮頸癌是明確病因的癌癥，即宮頸癌的發(fā)生與人乳頭瘤病毒有關。導致宮頸癌年輕化的主要原因是生活方式的改變和早期性生活。了解該類疾病的發(fā)病機制，尋找潛在的預后和針對性治療指標，對提高該類患者的生存率具有積極意義[7-8]。

本研究結果顯示，GCDFP-15、Calponin 水平與宮頸癌患者臨床分期、淋巴結轉移有關（P＜0.05），與年齡、病理類型、癌灶大小、肌層浸潤無關（P＞0.05）。單因素分析表明，臨床分期、淋巴結轉移、GCDFP-15 及Calponin 水平與宮頸癌預后有關（P＜0.05），而年齡、病理類型、癌灶大小、肌層浸潤與宮頸癌預后無關（P＞0.05）。多因素分析結果顯示，臨床分期、淋巴結轉移、GCDFP-15 及Calponin 水平均為影響宮頸癌患者預后的獨立影響因素（P＜0.05）。簡華勇等[9]的研究表明，GCDFP-15 及Calponin 水平與乳腺癌術后復發(fā)轉移相關。王亮等[10]的研究表明，GCDFP-15 及Calponin 水平與宮頸癌的預后有關。還有研究表明，約5%的肺腺癌被報道為GCDFP-15 陽性[11]。GCDFP-15 是一種特異度和敏感度較高的乳腺及其腫瘤標志物，被認為是乳腺囊腫液中的主要組成蛋白，可在具有大汗腺特征的細胞中表達，包括腺泡和唾液腺、皮膚和外陰。臨床將其用于轉移性乳腺癌、涎腺導管瘤及其他部位原發(fā)癌的鑒別[12]。李世玉等[13]的研究表明，Calponin 為陰性時，會加快腫瘤新生血管的形成并使數量及密度增加，進而加速患者病情進展。還有研究表明，Calponin 水平過高會抑制細胞增殖并促進細胞凋亡[14]。Calponin 是一種結合原肌球蛋白和F-肌動蛋白的鈣調蛋白，是平滑肌細胞的一種特異性蛋白，具有調節(jié)平滑肌收縮功能。Calponin 在正常的平滑肌細胞及肌上皮細胞中呈陽性表達，參與細胞骨架形成、肌肉收縮和細胞黏附，在肌纖維母細胞、平滑肌腫瘤等組織中均有表達，且還在腫瘤發(fā)生、發(fā)展和轉移中發(fā)揮著重要作用。

綜上所述，GCDFP-15 及Calponin 水平均對宮頸癌患者預后產生影響，檢測GCDFP-15 及Calponin 水平對于改善宮頸癌的預后具有積極意義。