藏羊寄生蟲病的診斷治療與科學有效預(yù)防措施應(yīng)用

段亞麗

藏羊是我國重要的家畜之一，在我國分布很廣是一種具有特殊營養(yǎng)和醫(yī)療價值的肉用家畜。由于它有較高的經(jīng)濟利用價值，因此近年來被列為重要養(yǎng)殖對象之一。隨著養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展和人民生活水平的提高，牧區(qū)藏羊寄生蟲疾病呈逐年上升趨勢。寄生蟲是一種在我國分布廣泛，危害嚴重的家畜疾病。由于它對人類健康和畜牧業(yè)生產(chǎn)有較大影響，為了控制其發(fā)生、流行及傳播蔓延，應(yīng)加強該病的診治工作。目前，許多地方已經(jīng)開始重視這一問題，并采取了一系列有效措施來進行預(yù)防與治療取得了一定成效，但仍存在一些不足之處，需進一步改進。

一、青海省海東市平安區(qū)藏羊養(yǎng)殖情況

海東市平安區(qū)位于青海省東部湟水中游河谷地帶，海拔2305m 左右，年平均氣溫6.7℃，無霜期94 天，年均降水量在380毫米以上，屬典型溫帶大陸性氣候。近年，海東市平安區(qū)畜牧養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，截至2020 年末全區(qū)共有各類牲畜存欄數(shù)達到100 多萬頭（只），其中大通種羊場是全省最大、全國第二的良種繁育基地和肉用性能測定站，也是全省唯一通過國家級畜禽遺傳資源保護單位認證的企業(yè)。其中藏羊養(yǎng)殖歷史悠久，規(guī)模化程度高，品種純度好，品質(zhì)優(yōu)良，已成為當?shù)剞r(nóng)牧民群眾增收致富奔小康的主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)之一。但由于受自然條件限制及傳統(tǒng)觀念等因素制約，該區(qū)域藏羊飼養(yǎng)管理水平相對較低，疫病防控能力薄弱，尤其是寄生蟲病危害較為嚴重。為了進一步提高該地區(qū)藏羊生產(chǎn)經(jīng)營效益和市場競爭力，確保藏羊健康生長發(fā)育以及產(chǎn)品安全質(zhì)量，應(yīng)對該地區(qū)藏羊常見寄生蟲病進行調(diào)查分析并提出相應(yīng)的綜合防治措施。

二、寄生蟲病危害

藏羊的寄生蟲類型較多，主要體內(nèi)寄生蟲和體外寄生蟲兩大類。其中線蟲種類最多，有捻轉(zhuǎn)血矛線蟲、細頸囊尾蚴兩種。絳蟲34 種，其中牦牛莫尼茨絳蟲、仰口裂頭蚴、班氏絲蟲三種在該區(qū)普遍發(fā)生。寄生蟲對于藏羊的危害也很大，如寄生在腸道內(nèi)引起腹瀉或消化不良性疾病，影響采食量，降低飼料利用率。寄生在肌肉組織中可導(dǎo)致貧血、消瘦甚至死亡。寄生在肝臟內(nèi)則會造成肝炎、肝硬化等癥狀。在海東市平安區(qū)藏羊是最為常見的養(yǎng)殖種類之一，但由于當?shù)剞r(nóng)牧民群眾缺乏科學知識和相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)，加之經(jīng)濟條件有限，使得該區(qū)域藏羊的飼養(yǎng)管理水平相對落后，從而導(dǎo)致了寄生蟲病的廣泛傳播蔓延。因此，加強對該地區(qū)藏羊寄生蟲病的監(jiān)測和預(yù)防工作顯得尤為重要。

三、藏羊寄生蟲病的診斷

1、寄生蟲的PCR 檢測

對于已知的寄生蟲檢測，除了用傳統(tǒng)的顯微鏡檢查外還可以采用PCR 方法進行檢測。PCR 是通過將待測樣品中含有的DNA 片段作模板，然后以特異性引物進行擴增來實現(xiàn)基因擴增的目的并以此判斷樣本是否感染某種寄生蟲。在具體的運用中，首先需要提取出蟲體或其分泌物中包括線粒體、細胞核等在內(nèi)的基因組DNA。接著選擇合適的引物，再按照一定比例混合后進行PCR 反應(yīng)。最后利用瓊脂糖凝膠電泳觀察結(jié)果。

PCR 檢測能較精確地進行寄生蟲種類和感染強度鑒定，且操作簡便易行，具有很高的應(yīng)用價值。但該法也存在一些缺點，如不能直接從糞便中檢出蟲卵，而應(yīng)經(jīng)過離心處理才能得到較為純凈的蟲體。另外，核酸等溫擴增技術(shù)（ITS）是一種快速、靈敏度高的分子標記方法，可作為傳統(tǒng)PCR 的補充，用于對蟲卵進行定性分析。例如，依賴解旋酶的等溫擴增技術(shù)（HDA)、依賴限制性內(nèi)切酶的等溫擴增技術(shù)（REMAX）以及基于聚合酶鏈式反應(yīng)的等溫擴增技術(shù)（PCR）都可以用來檢測蟲卵。這類技術(shù)主要通過各種酶在不同溫度下將待測樣品中的靶序列切割成片段，然后再利用相應(yīng)的引物和探針進行擴增來達到目的。

另外，高通量測序技術(shù)的快速發(fā)展也為寄生蟲的快速和高效檢測提供了新思路。目前，已經(jīng)有多種方法被應(yīng)用到寄生蟲的快速檢測上。其中包括：使用核酸提取試劑盒從樣本中提取基因組DNA；采用巢式PCR 對樣本進行擴增；采用實時熒光定量PCR 對樣本進行擴增；采用多重PCR 對樣本進行擴增。這些方法各有優(yōu)缺點，但是均能夠滿足寄生蟲檢測的要求。目前，微生物擴增高通量測序法作為一種新型的分子生物技術(shù)，具有靈敏度高、特異性好、操作簡便等特點。因此，該方法很適合于病原體的檢測。主要用到的擴增位點是16S、gyrB、rpoE 基因以及ITS 序列，通過設(shè)計引物并優(yōu)化反應(yīng)條件來提高其特異性及敏感性。在此基礎(chǔ)之上建立了基于MLVA 的體系。經(jīng)過與數(shù)據(jù)庫對比和分析，能全面了解動物體內(nèi)或群體內(nèi)寄生蟲感染狀況，從而制定出合理有效的預(yù)防控制方案。

2、體液游離寄生蟲DNA 在診斷中的應(yīng)用

體液游離DNA 是指存在于人體血液、尿液或其他體液中的一類DNA 分子，包括血型抗原、抗凝血因子、補體系統(tǒng)及免疫球蛋白等。人或動物的體液能檢到游離的寄生蟲核酸，但其數(shù)量很少。由于它們具有高度保守性，因此常被用作診斷寄生蟲感染的生物標記。目前已發(fā)現(xiàn)了多種寄生蟲的體液游離DNA 基因，如弓形蟲、隱孢子蟲、蛔蟲、鞭毛蟲、阿米巴原蟲等。由蟲體或蟲卵細胞、碎片在脫落、消化過程中產(chǎn)生的體液游離DNA 稱為“蟲源性”(parasitic)DNA。而由病原微生物入侵機體后所產(chǎn)生的體液游離DNA 則稱為“內(nèi)源性”(endogenous)DNA。該項技術(shù)在寄生蟲病的診斷上具有較強的優(yōu)勢，利用血漿、血清、尿液中的寄生蟲特異性抗原進行檢測可快速準確地判斷出患者是否感染某種寄生蟲及其感染程度，從而指導(dǎo)臨床用藥和治療方案的確定。該項技術(shù)具有高度的特異性與靈敏性，能夠?qū)Σ煌N類的寄生蟲做出正確的診斷，目前，已在瘧原蟲、弓形蟲、蛔蟲等多種寄生蟲病的診斷及流行病學調(diào)查工作中得到廣泛應(yīng)用。

四、藏羊寄生蟲病治療方法

1、體內(nèi)寄生蟲病

體內(nèi)寄生蟲的治療要先確定具體類型，再選擇相應(yīng)的驅(qū)蟲藥物。常用的有阿苯達唑（ABZ)、左旋咪唑（LEM)、阿苯達唑（IPM)、吡喹酮（PYD）等，其中以阿苯達唑效果最好。以鼻蠅蛆病為例，該寄生蟲會寄居于鼻腔內(nèi)，因此可以使用阿苯達唑進行驅(qū)殺。當寄生部位位于口腔時，則需要用到左旋咪唑或是阿苯達唑。若寄生部位位于肺臟，則需采用吡喹酮進行驅(qū)殺。病情嚴重后藏羊會出現(xiàn)打噴嚏、咳嗽以及流淚等癥狀，此時可通過注射伊維菌素和地塞米松來緩解病癥。對于它的治療可以選擇肌肉注射或者靜脈滴注兩種方式，在藏羊的后臀部進行肌肉注射，注射時間可以選擇在傍晚或者清晨，每次用藥劑量應(yīng)控制在0.5mL左右，連續(xù)給藥3d 即可。而靜脈滴注則要將藥劑注入血管中，一般情況下一次性給藥量為1-2mg，持續(xù)給藥4h 即可。或者也可選擇口服藥物進行驅(qū)蟲，選擇敵百蟲藥物，以口服為主，按照0.6%濃度的比例進行配置，每日服用兩次，連服7d 即可。

2、體外寄生蟲病

相對于體內(nèi)寄生蟲，體外寄生蟲病是一種較為常見的疾病類型，主要包括螨、虱子以及蜱蟲等，這些寄生蟲會寄生在動物體表之上，并且還會造成嚴重的危害。體外寄生蟲的治療效果可以直接觀察到，但是其具體的發(fā)病原因和機制卻并不明確，因此需要通過實驗室檢查來確定病因，然后采取針對性的處理方式。對于體外寄生蟲來說，其種類繁多，不同的種類具有不同的特點，因此在治療過程當中所使用的方法也存在著一定差異。以羊蜱寄生蟲為例，其屬于節(jié)肢動物門蛛形綱蜱目，而羊螨則屬于蛛形綱蜱科。這兩種寄生蟲都能夠?qū)е卵蛑怀霈F(xiàn)瘙癢癥狀，如果不能及時發(fā)現(xiàn)，可能引發(fā)更為嚴重的后果。而且這種寄生蟲還具有一定的傳染性，一旦感染，整個養(yǎng)殖場內(nèi)的羊群都有被感染的風險，甚至還會影響人類健康。在治療時可以選擇滅蟲丁粉藥物進行噴灑，這樣不僅能夠有效地殺除寄生在皮膚上的寄生蟲，同時還不會對周圍環(huán)境造成污染。在藥量控制上要根據(jù)藏羊體重而定，通常是每公斤10mg 左右，并且需要連續(xù)噴灑3 次以上才能起到良好的效果。或使用伊維菌素注射液按照說明書要求進行肌肉注射，一般情況下一次用量為25mL，但具體用藥劑量應(yīng)該根據(jù)實際病情來確定。

五、藏羊寄生蟲病預(yù)防措施

1、做好早期驅(qū)蟲工作

首先，對藏羊體內(nèi)寄生蟲進行預(yù)防性驅(qū)蟲，這是一種比較經(jīng)濟實惠而又行之有效的方法。其主要包括以下幾個方面：一是每年春季和秋季分別給藏羊進行兩次驅(qū)蟲處理。二是每年春末夏初季節(jié)給藏羊投喂驅(qū)蟲藥，如阿苯達唑、吡喹酮等。三是定期清理圈舍內(nèi)糞便，將糞便集中起來統(tǒng)一發(fā)酵后再施入農(nóng)田中，以減少糞便中蟲卵數(shù)量。其次，在放牧過程中要盡量避免到有蜱寄生的地方放牧，并且要注意觀察藏羊身體狀況，一旦發(fā)現(xiàn)異常及時采取相應(yīng)措施加以治療。可以集中在下半年進行，有利于提高驅(qū)蟲效果。再次，如果是由于飼養(yǎng)管理不當引起的寄生蟲疾病，則應(yīng)該加強飼養(yǎng)管理，改善環(huán)境條件，從源頭上控制寄生蟲的繁殖。最后，還需要重視藥物使用問題，嚴格按照說明書規(guī)定劑量用藥，切不可盲目加大用量或增加服藥次數(shù)。

2、水源管理

藏羊的大多數(shù)寄生蟲都是通過外部環(huán)境感染的，因此做好水源管理工作至關(guān)重要。首先，應(yīng)保證飲水干凈衛(wèi)生，不含任何雜質(zhì)和污染物，其次要定期更換水槽中的水，避免水中滋生大量細菌、病毒等微生物而導(dǎo)致寄生蟲病發(fā)生。相關(guān)人員可以定期進行檢測。例如，在夏季高溫季節(jié)時，要注意飲用水的溫度，防止因水溫過高而造成寄生蟲卵死亡。同時，也要注意飲用水是否被糞便所污染，如果有，會使得幼蟲發(fā)育速度加快，進而引起疾病暴發(fā)。最后，相關(guān)人員要定期更換水源，以免蟲體對水質(zhì)產(chǎn)生影響，從而降低發(fā)病率。同時，還要定期對水源進行消毒處理，殺滅水中可能存在的病原體，減少疾病傳播途徑。具體可以用漂白粉或生石灰水來浸泡水源，并將其倒入池塘內(nèi)，這樣既能夠殺死水中的寄生蟲，又不會給人們帶來危害，一舉兩得。

3、科學處理糞便

糞便中含有大量的寄生蟲蟲卵、細菌和其他微生物等，這些都是導(dǎo)致疾病發(fā)生的重要因素之一。所以，養(yǎng)殖戶應(yīng)當采取一定的方法來處理動物糞便，避免因為處理不當而引發(fā)各種傳染性疾病。首先，養(yǎng)殖戶需要在每天早晨喂食之前清理一次糞便，然后再把剩余的飼料殘渣收集起來發(fā)酵，這種方式不僅能夠消滅其中可能攜帶的寄生蟲，也有利于提高飼料利用效率。其次，養(yǎng)殖戶還要定期對圈舍進行清掃消毒工作，及時清除糞便以及垃圾，防止出現(xiàn)蚊蠅滋生的現(xiàn)象，例如，針對一些角落空間較大的地方可以使用殺蟲劑噴灑，或者用蒼蠅拍將其徹底趕走。最后，如果條件允許，養(yǎng)殖戶最好選擇一款高效且安全的除臭劑，氣體可能會引起呼吸道感染等癥狀。另外，也可以針對糞便進行化學處理，例如，通過氧化反應(yīng)來殺死蟲卵和幼蟲，從而達到殺滅目的。

4、做好日常飼養(yǎng)管理工作

在藏羊養(yǎng)殖過程中應(yīng)該重視衛(wèi)生清潔工作，并且制定科學合理的飼喂方案，保證藏羊健康生長發(fā)育，同時也為后期疾病預(yù)防奠定良好基礎(chǔ)。首先，控制好喂養(yǎng)時間。一般來說，藏羊每天需要進食兩次，分別是早上6 點和下午6 點左右。其次，要注意飼料營養(yǎng)搭配均衡，滿足藏羊各個階段對于各種營養(yǎng)物質(zhì)的需求。可以通過多種維生素對藏羊進行補充，提高免疫力。例如，可以給藏羊服用一定量的VC、VE 以及胡蘿卜素等。再次，要定期清理圈舍內(nèi)的排泄物，避免出現(xiàn)細菌滋生情況。最后，喂養(yǎng)的喂具、水源、地面等進行消毒。在養(yǎng)殖過程中很可能通過喂具或者其他污染源導(dǎo)致傳染病發(fā)生流行，因此應(yīng)加強管理工作，做好衛(wèi)生清潔工作，及時處理排泄物，防止病原微生物傳播蔓延。

5、抗性基因的篩選

寄生蟲防控的一大研究熱點是篩選寄生蟲抗藥性基因，目前已經(jīng)有很多種方法用以檢測和鑒定蟲體是否攜帶耐藥基因，如PCR 技術(shù)（聚合酶鏈式反應(yīng)）、DNA 測序法及蛋白質(zhì)印跡法等。但這些方法存在著一些不足之處，比如成本高、耗時長且操作繁瑣等。而基于核酸擴增的Sanger 雙脫氧末端終止法則克服了上述缺點，具有簡單快速、靈敏度高等優(yōu)點，可應(yīng)用于多種寄生蟲的檢測。惡性瘧原蟲Pfcrt 基因在不同地區(qū)的分離株中均能穩(wěn)定表達，并且該基因可以作為一種有效的標記來區(qū)分感染者和未感染者。帶科絳蟲六鉤蚴宿主細胞染色體上含有3 個串聯(lián)重復(fù)序列，其中一個是由5 端非編碼區(qū)組成的保守區(qū)域，另一個是由10 個核苷酸堿基構(gòu)成的開放閱讀框，第三個是由48 個核苷酸堿基構(gòu)成的開放閱讀框。這三個開放閱讀框分別被稱為“CON”、“RELATIVED”以及“FUNGUM”。多種寄生蟲的基因數(shù)據(jù)庫已建立，包括線粒體基因組數(shù)據(jù)庫、轉(zhuǎn)錄組學數(shù)據(jù)等。有助于全面了解寄生蟲特征及其與宿主間的關(guān)系，從而制定出更加科學合理的防控策略。

另一方面，宿主對寄生蟲感染具有一定免疫力，但在不同地區(qū)和季節(jié)中存在差異。該地區(qū)部分藏羊體內(nèi)寄生的三種常見寄生蟲（肝片吸蟲、細頸囊尾蚴及捻轉(zhuǎn)血矛線蟲），分析其感染情況并比較各類之間的差異性。同時探討了不同季節(jié)下，藏羊體內(nèi)三種寄生蟲的感染率變化規(guī)律，以期為該地區(qū)綿羊寄生蟲病的有效控制提供理論依據(jù)。

6、中草藥驅(qū)蟲的應(yīng)用

與化學驅(qū)蟲藥相比，中草藥有許多優(yōu)勢，如毒副作用小，不易產(chǎn)生抗藥性，不會污染環(huán)境，成本低廉等。近年深受廣大牧民喜愛，已成為一種重要的動物疫病預(yù)防手段。通過觀察藏羊使用中草藥進行驅(qū)蟲后，對其生長性能、血液生化指標以及臟器指數(shù)的影響，來評價其是否安全可靠。驅(qū)蟲中草藥多含有生物堿、萜類和有機酸等成分，具有較強的殺蟲抑菌效果，能夠殺滅多種病原體，且無殘留，是一種綠色環(huán)保型藥物。同時，所含的蛋白質(zhì)、氨基酸及微量元素也可促進機體新陳代謝，增強免疫力。

藏羊是青海地區(qū)常見的牲畜之一，也是當?shù)刂饕哪翗I(yè)品種之一，長期以來一直為群眾提供著豐富而優(yōu)質(zhì)的畜產(chǎn)品。但是，由于飼養(yǎng)管理不當導(dǎo)致的大量感染或不適當飼喂造成了蟲卵孵化困難等原因，使得該類型動物發(fā)病率很高，給廣大農(nóng)牧民帶來極大的經(jīng)濟損失，甚至威脅到社會穩(wěn)定，為此需要引起高度重視。