一例關于羊細菌性腸炎的流行病學調查報告

張育紅

羊群在養殖管理期間經常會出現各種疫病，羊腸炎是一種常見、多發性的疫病，根據發病原因可以將其分為原發性腸炎和繼發性腸炎，原發性腸炎致病原因大多為養殖環境的問題導致的，而繼發性羊腸炎的發病原因通常比較復雜，并且具有一定的傳染性。羊腸炎在診斷防治期間，原發性羊腸炎的臨床癥狀較為簡單，易于診斷，對癥治療即可。但是繼發性腸炎除了應用臨床診斷之外，為了提升診斷的精準性，還需要采取實驗室診斷才能夠分析出致病原，從而對癥治療。2021 年7 月23 日，青海省同仁市地區畜牧獸醫單位辦公室人員接到當地某小型羊群養殖場負責人反映，此養殖場內共計存欄羊只82 只，自7 月18 日起，有28 只羊相繼開始了不同程度的腹瀉癥狀，自行進行治療，連續治療2～3 天后無較為顯著的療效，并且患病羊只還出現死亡的現象。在收到羊只疫病的相關報告信息后，青海省同仁市畜牧獸醫站快速反應，及時派流行病學調查的專業技術人員及當地的獸醫專業技術人員一起對此起羊群腹瀉疾病開展現場緊急流行病學的調查和分析，通過對當地環境觀察、患病羊只臨床癥狀表現、致死羊只的剖檢分析、現場養殖工作人員的詢問以及采樣送至實驗室診斷等操作。最后將此起羊群腹瀉疾病的致病原因分析為是由于近期氣候環境不良、飼養管理條件差、以及養殖戶的自身技術經驗不足導致羊群出現細菌性的腸炎。現將本次羊群腹瀉的流行病學調查情況報告如下。

一、羊群腹瀉基本情況

1、現場詢問基本情況

依照養殖場負責人的反應，本養殖場共有羊只82 只，自2022 年7 月18 日起，在養殖場內相繼有12 只羊出現了腹瀉的癥狀，截止7 月18 日共有28 只羊出現患病。如圖1

圖1 該養殖場羊只患病數據

該養殖場羊只的排泄物顏色為褐色、稀便，內容物無血絲，患病羊只的體表溫度在38℃～39℃之間。患腹瀉的羊只大多出現脫水、消瘦、虛弱的癥狀，極個別的腹瀉羊只伴有流淚、流鼻涕的現象。觀察圖1，7 月20 日，距離首只患病羊只發病的第3 天，出現了1 只患病羊只死亡的現象，7 月22 日，距離首只患病羊只發病的第5 天清晨，出現1 只患病羊只死亡，7 月23 日，距離首只患病羊只發病的第6 天，出現1 只患病羊只死亡。截止2021年的7 月23 日，養殖場內的發病羊只已經增加至28 只，死亡患病羊只共3 只，發病情況呈現上升的趨勢。

此養殖戶的羊只養殖模式為放養與圈養結合的模式，圈養位置位于同仁市加吾鄉加吾崗村自家庭院中，放養位置在村西120m 處草地。該養殖場對成年羊只通常不飼喂干飼料，羔羊的飼喂少量的飼料，飼料在當地獸藥店自行購買。購買后不進行大量存放，購買后一個月內喂食完畢，再進行購入。至2021 年以來，本養殖場沒有開展過外部引進羊只，外銷情況暫無，繁殖模式為自繁自養。取食用水為自來水資源，參與養殖活動的飼養人員近三個月未進入過其他的養殖場、活畜禽交易市場，沒有跟獸醫藥銷售工作人員及獸醫進行接觸，無野生動物接觸歷史，同養殖區域以及其他的養殖場內的羊群表現均正常化。

二、現場情況調查

1、羊舍的基本環境

此養殖場為當地常見的家庭養殖模式，羊舍的位置于自家簡易房，簡易房與自家院子連接，在內部共飼養羊只82 只。由于本月陰雨天氣較多，羊舍內部的養殖環境衛生條件差，糞土混合潮濕堆積，內部地面、墊料出現潮濕霉變。現場所有羊只混合喂養，羊群夜間休息地點潮濕陰冷，濕度較大。

2、患病羊只臨床癥狀

在羊舍內部觀察羊群，發現該養殖區域的羊群出現集體偏瘦的現象。患病羊只精神狀態不良、身形消瘦、毛發無光澤，且凌亂、取食量較少、發病嚴重的患病羊只不取食，觀察其舌苔發現有增厚、呼氣有異味；觀察患病羊只的排便情況，多數羊只的糞便為水樣、糊樣，無血便，在排泄物中混合少量的黏液以及脫落腸黏膜組織物。其中有8 只患病羊只觀察其肛門出現松弛，在其肛門周邊有糞便的污染，并且周邊沾滿羊毛，同時伴有大便失禁癥狀。有6 只患病羊只出現體表溫度的上升、呼吸短深急促、眼結膜位置出現潮紅、發紺，眼窩位置出現凹陷下去，伴有流淚。發病羊只的皮膚彈性減差、排尿量少。發病時間較長，較為嚴重的患病羊有5 只，其體表溫度降低、四肢無力、臥地不起、精神狀態沉郁，隨著病情的發展，其機體功能出現衰竭，最終倒地抽搐直至死亡。發病羊只集中在羊群中的成年母羊、妊娠期羊只，極少數患病羊只出現異食的現象。

3、剖檢診斷分析

取一只具有典型癥狀的患病致死的羊只進行剖檢觀察，可以發現患病羊只的胃部、腸道位置有顯著的病變，腸道黏膜充血嚴重、伴有腫脹，在黏膜上方還有大小不一的血塊依附。此外，在患病羊只的膽囊黏膜部位也有不同程度的水腫，在心包膜上方有大小不一的出血點，脾臟顏色為紅色或黑紫色，并且伴有顯著的充血、腫大等不良現象。在其腎臟與心外膜之間有針尖大小出血點，部分患病羊只表現出皮下水腫，腸壁位置也存有出血點。

三、實驗室診斷方式

依據患病羊只所表現出的臨床癥狀及剖檢觀察進行分析，初步將其診斷為羊細菌性腸炎，致病細菌為沙門氏菌。為了進一步的驗證致病原，收集病死羊只的腸系膜淋巴及母羊的分泌物至專業實驗室進行開展實驗室技術鑒定，從而達到精確確診的效果。對于疑似的患病羊只，采集其腹瀉病死羊的腸道淋巴、脾臟、膽囊等組織樣品，或收集患病母羊的排泄物及血清等開展實驗室的診斷。

1、使用涂片鏡檢

在實驗室無菌的條件下，將病死羊的腸系黏膜淋巴組織、母羊的分泌物等病料，進行涂片鏡檢。運用革蘭氏染色、鏡檢兩種方式進行觀察。可見此細菌的革蘭氏染色表現為陰性短棒桿菌，菌體的兩側為鈍圓形、菌體無莢膜、菌株大部分的周邊有鞭毛，少部分無鞭毛，菌株在無外力的作用下，可以自行的進行運動。

2、分離培養

在實驗室無菌的條件下，將收集到的病死羊膽囊組織、患病母羊的排泄物等病料置于普通的營養瓊脂培養基上進行接種觀察，接種后將培養基置于35℃下的恒溫培養箱內進行長達24小時的靜置培養。經過24 小時后觀察發現，在瓊脂培養基上生長出多個中間凸起的圓形菌落，菌落的顏色為無色半透明狀，外表光滑。將菌落挑取后接種置于強選擇性培養基上，置于35℃的恒溫培養箱內進行培養。在經過一段時間的培養觀察可以發現，培養基內生長出中心部位顏色為黑色的菌落，并且隨著時間的推移，培養基內的液體顏色變的渾濁、且均勻。

3、生化鑒定

從普通瓊脂培養基中挑取疑似菌落接種置于三糖鐵瓊脂培養基內，將其放置在恒溫35℃的恒溫箱中進行觀察培養24 小時。如果在試管底層產酸產氣或僅為產酸，或者在試管底層產生硫化氫，底層顏色變黑，可以依據此反應判斷出此疫病的感染細菌為沙門氏菌。

4、熒光抗體檢測方式

使用已經消毒后的接種環接觸到收集的病死羊病料或患病母羊病料制作增菌培養液，將其制成較薄的涂片，將其置于35℃恒溫箱中或者是置于室溫中使其自然晾干。使用甲醛10mL、三氯甲烷30mL、乙醇60mL 充分混合制成固定液，并利用固定液將涂片進行長達5～10 分鐘的固定，隨后使用95%乙醇充分的浸泡清洗，最后自然晾干備用。

在病料涂片上滴入幾滴沙門氏菌熒光抗體，并將其置于盒內環境中處理30 分鐘，環境溫度控制在35℃。處理結束后取出濃度為0.01mL/L、pH 值為9.0 的磷酸鹽緩沖液將多余的熒光抗體沖洗掉，隨后使用相同濃度的磷酸鹽緩沖液浸洗10 分鐘，取出后使用蒸餾水再次沖洗，等待其自然晾干后滴入pH 值為9.0的碳酸鹽緩沖甘油，隨后蓋上蓋玻片進行封片，置于熒光顯微鏡下進行觀察判斷。

為了確保熒光抗體檢測方式的準確性，在觀察涂片時要觀察至少10 個視野。發現在涂片內有黃綠色的發亮桿菌，在其他位置有橙黃色的熒光。橙黃色熒光為其他種類的雜菌和無關雜質，而黃綠色的發亮桿菌為沙門氏菌。

二、調查結果

1、現場情況的調查

①養殖區域的分布

經過技術人員的現場調查，該羊養殖場的位置位于青海省同仁市加吾鄉加吾崗村，屬于家庭養殖散戶模式，羊舍為一間大房間所隔離出的三間簡易房，在房子的門口為家庭庭院，也是羊群的日常活動區域。養殖戶的門口與村村通公路相臨，在村西處120m 處有草地，也是該養殖場的羊群放牧主要地點。

②羊群發病及死亡基本情況調查

2022 年7 月18 日該養殖戶在放養羊群時觀察發現，有12只羊出現拉稀的癥狀、取食量減少、精神沉郁、排泄物為褐色的稀便、伴有血絲、具有脫水的臨床癥狀。發現羊群患病后，該養殖戶立即至當地獸藥店購買用于治療羊群腹瀉的藥物，由于該養殖戶對化學藥劑了解不足，其無法準確的將使用劑量及藥物名稱進行復述。在采取皮下注射治療后，治療效果并不顯著。觀察出現感病癥狀后的第3 天，7 月20 日死亡1 只成年母羊，隨后同羊舍內部的羊只表現出陸續發病的癥狀，其中發病最多的為成年羊只和母羊。在此期間，該養殖戶除了在獸藥店自行購買藥劑進行皮下注射治療后，并未使用其他措施用于輔助治療。7 月18 日～7 月23 日，共有發病羊只28 只，死亡羊只3 只，其中死亡2 只母羊、1 只成年羊，發病概率為34%，病死概率為11%。7 月23 日，同仁市畜牧獸醫站流行學調查技術人員在對該養殖現場的情況、羊群發病癥狀、病理觀察及實驗室診斷后，立即對此羊群采取防控管理措施，對于已發病的羊群實施緊急隔離治療。并且依據實際的發病癥狀制定相應的治療方案，對癥用藥，截止7月26 日以來，該羊群患病情況得到了基本的控制，并且逐漸好轉。

2、追溯流行病學調查

依據羊群患病的流行病學問詢調查、現場觀察分析、臨床癥狀資料的查閱及實驗室診斷結果進行分析，排除羊群患大腸桿菌病及小反芻獸疫等可能性。在經過當地動物疫病的預防控制中心人員的分析交流后，診斷為由于當月的陰雨天氣較多、該養殖戶在飼喂羊群期間多喂養未經充分發酵的濕草，并且水分含量較多。同時，此養殖戶接觸羊群養殖的時間短，對于飼養技術了解不夠深入，導致飼養管理出現眾多不規范的地方，羊舍內部衛生條件差、濕度大等等因素，造成了本次羊群細菌性腸炎的發生。養殖戶在羊群患病后，雖然立即的進行購藥治療，但是購買藥品時描述不夠明確，購買藥物不對癥，起不到較好的治療效果。同時，該養殖場內羊群生長瘦弱，患病病程較長、機體素質差的羊只后期出現脫水，機體衰竭致死。

3、應用防治管理措施

①緊急措施

對于已經患病的羊只需要加強護理，并且將其立即進行隔離治療。對已經出現病死的羊只必須采取焚燒、深埋等無害化處理。羊舍內部的糞便、被糞便所污染的墊料等要全部清理出，并使用消毒藥劑進行全面消毒后深埋無害化處理。對羊舍內部的地面、墻壁、工具全部消毒，增強通風效果，降低羊舍內部濕度。同時，由于該養殖場羊舍空間較小，每天在羊舍內部進行至少1次的噴霧消毒，連續消毒1 周，在消毒期間輪換使用至少3 種消毒藥劑。

2、藥物治療措施

對于已患病的羊只使用土霉素注射液治療，依照患病羊只的體重每公斤用藥0.05～0.1mL，注射時采取肌肉注射的方式，每天注射治療1 次，連續治療3 天。同時，對于已患病的羊只，每天灌服0.2g 胃蛋白酶用于輔助治療。部分羊只出現嚴重脫水時，可以采取靜脈滴注的方式，使用5%葡萄糖生理鹽水50～80mL、5%碳酸氫鈉30～50mL 充分混合，每天注射1 次，連續使用3 天。

3、提升日常飼養管理條件

經過現場觀察與問詢發現，在該養殖場內飼養管理條件差，而至于不良環境中的羊群其自身抗病性較低。因此，為了提升羊群的抗病性，避免后續長期出現不良反應或致病，該養殖戶在管理期間，應當注重對羊舍內部的消毒、飼養條件、多為羊群補充礦物質、在缺乏草料期間飼喂優質飼料，從而增強羊群的抗病性，確保羊舍環境的空氣清新，增強通風效果，同時降低空氣濕度水平。該養殖戶在外出放養羊群時，應當推遲放養的時間，避免羊群在外出取食時食用過多的水分含量過多的青草，從而導致出現致病性腹瀉。

4、重視預防管理

在開展羊群養殖期間，養殖戶應當遵循“防重于治、養防并重”的相關原則，散戶養殖時，如果采取全進全出的飼養模式，應當在管理期間注重生物安全性避免致病原入侵感染。定期對羊群進行驅蟲，避免出現寄生蟲感染，同時依照當地的疫情流行規律，做好免疫接種程序，避免出現重大疫病的感染傳播。

三、討論分析

依據本次疫病的發生流行學調查情況、臨床癥狀分析、剖檢觀察、實驗室診斷及防控措施和治療的效果，綜合判斷為本次疫病的發生為羊細菌性腸炎，由感染沙氏門菌所引起的。

1、感病因素分析

依據上文中的流行病學調查數據進行分析，發現本次羊群感染細菌性腸炎的主要發病原因有以下幾點；第一，此養殖戶的羊群飼養管理模式為傳統的家庭散養模式，養殖條件相對簡陋，羊舍內部的飼養環境條件衛生性差，羊舍濕度大，污染物較多等。第二，該養殖戶家中的羊群其自身營養條件不足，羊群整體體形偏瘦，機體抗性較差，易出現感病。第三，由于當月天氣陰雨天較多，羊群外出放養時食用了較多含水量大的青草，導致羊群出現消化功能異常，增加感病性。

2、應對措施

依據本次該羊群發病的因素，建議養殖戶后期做好如下管理措施；第一，在飼喂羊群期間，對羊群飼料的蛋白質、能量、、礦物質、維生素等營養成分的含量進行均衡把握，提升飼喂條件，在清晨有露水或雨水的情況下，減少外出散養放牧。第二，確保養殖環境的衛生性，對于羊舍地面應當做好防潮準備，屋頂做好隔熱防水，及時清理地面，定期做好消毒工作，確保墊料的干凈衛生性。第三，減少對羊群的轉群、換料，做好疫病的免疫接種工作，減少應激。第四，養殖戶應當加強自身的養殖技術學習，增強管理技術水平，做好日常疫病防治，確保養殖的健康可持續性。