分光光度法測定竹葉提取物中總黃酮含量的改進*

吳 陽,范秀章,李榮華

(貴州省分析測試研究院,貴州 貴陽 550014)

竹葉為中醫一味傳統的清熱解毒藥材,在中國民間廣為使用。近年來人們圍繞竹葉開展了大量工作,研究表明竹葉提取物中黃酮類化合物藥理活性明顯[1-3]。但針對竹葉提取物總黃酮含量的實際檢測工作中發現采用的方法存在一些疑問:

第一,竹葉提取物為混合物,其中含有很多雜質,檢測過程中試劑溶液本身呈黃色(顏色深淺由樣品含量決定),檢測波長下有吸收,導致選用硝酸鋁-醋酸鉀顯色體系,測定結果偏高;第二,現有黃酮含量測定方法均以蘆丁為標準品,但竹葉黃酮中不含蘆丁,其主要成分為碳苷黃酮[4-5],分子量均比蘆丁小,分子結構差異也較大,采用蘆丁作為比較標準,結果不準確;第三,在選用現有黃酮測定標準[6]如DB 34/T 2743—2016進行竹葉黃酮含量測定過程中,測定值比實際偏低,由于標準曲線線性關系良好,考慮可能是顯色劑用量不夠,樣品顯色不夠徹底,導致結果不準確。

本文針對以上特點,選用氫氧化鈉環境下,氯化鋁-亞硝酸鈉顯色體系,以竹葉黃酮中典型碳苷異葒草苷作為標準品,同時增加顯色劑用量,對竹葉提取物中總黃酮含量的測定作了粗淺的分析與探討。改進后的方法提高了結果的穩定性、準確性。從實驗結果可看到:在濃度0～40 mg/L范圍內,蘆丁、異葒草苷標準曲線的相關系數(r2)分別為0.9999,0.9998,平均加標回收率為97.93%、99.65%,RSD為1.35%、0.7%(n=6)。說明該改進方法滿足檢測要求。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑……

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