遠隔缺血后適應通過水通道蛋白-4對局灶性腦缺血再灌注大鼠的血腦屏障保護機制

楊 軍,安貴良,劉子琨,李浩然, 宋廣福

(佳木斯大學附屬第一醫院神經外科,黑龍江 佳木斯 154003)

缺血性腦卒中患者接受靜脈溶栓和或動脈取栓,恢復腦組織血液灌注后,腦組織常常伴有一系列并發癥,包括出血性轉化、血腦屏障的破壞和水腫加重,進一步加重腦損傷,這一現象被稱為腦缺血再灌注損傷。血腦屏障破壞,會引發細胞毒性、血管源性水腫甚至危及生命的出血轉化[1]。因此減輕腦水腫是改善缺血性腦卒中患者神經功能缺損和促進病情恢復的關鍵。水通道蛋白在腦部水的運輸中發揮著雙向作用,并參與腦水腫的形成和消除[2]。其中AQP4是近些年來備受關注的研究熱點。遠隔缺血適應(remote ischemic conditioning,RIC)是指通過對遠隔器官實施短暫、重復、非致死性的缺血再灌注刺激誘導心,腦等重要器官的缺血耐受,從而保護腦神經細胞[3],減輕腦缺血-再灌注損傷[4]。它是一種無創性物理治療技術,安全性較高,因此,在多種類型的缺血性腦血管病中被廣泛研究和應用[5, 6]。本研究主要探討遠隔缺血后適應通過調節AQP4的表達來改善大鼠局灶性腦缺血再灌注后血腦屏障的破壞,進而產生腦保護作用。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

主要試劑及儀器:AQP4多克隆抗體(武漢三鷹生物技術有限公司),鼠抗β-肌動蛋白(北京博奧森生物技術有限公司),羊抗鼠IgG抗體(北京博奧森生物技術有限公司),SDS-PAGE凝膠制備試劑盒(大連美侖生物技術有限公司)。高速冷凍離心機(美國BECKMAN公司),VE-186垂直電泳儀、Tanon5200全自動化學發光儀(上海天能科技公司),全自動多功能酶標儀(美國Bio-TEK公司),全自動切片機(德國LEICA公司)。……