血清miR-4485-3p和miR-1469在胃癌患者手術(shù)前后的表達(dá)變化及對(duì)術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)價(jià)值

王根柱 王亦茹 徐宏霞

作者單位：450000 鄭州市第三人民醫(yī)院

胃癌屬于常見的消化道惡性腫瘤,可應(yīng)用的治療方法眾多,如手術(shù)治療、化療、免疫靶向治療等,均在胃癌治療中發(fā)揮著重要的作用[1]。臨床上在對(duì)胃癌進(jìn)行治療時(shí),手術(shù)仍為最有效的治療方式,通過切除病變部位,可有效延長(zhǎng)患者的生存期。同時(shí)手術(shù)治療可有效提升患者的生存質(zhì)量,改善疾病預(yù)后。但當(dāng)病灶發(fā)生轉(zhuǎn)移或彌漫性擴(kuò)散,則可能喪失手術(shù)治療機(jī)會(huì),而需借助其它方法實(shí)施治療。因此為改善疾病預(yù)后,需對(duì)胃癌進(jìn)行盡早診治[2]。 microRNAs參與轉(zhuǎn)錄后水平基因表達(dá)的調(diào)控,和機(jī)體腫瘤病變的出現(xiàn)及發(fā)展存在密切關(guān)聯(lián),其屬于新型基因診斷標(biāo)志物。有研究報(bào)道稱,在對(duì)胃癌進(jìn)行診斷時(shí),血清miR-4485-3p和miR-1469具備較高的應(yīng)用價(jià)值[3]。但對(duì)于血清miR-4485-3p和miR-1469在胃癌手術(shù)治療效果評(píng)估及預(yù)后預(yù)測(cè)中的應(yīng)用,尚無相關(guān)研究報(bào)道,本次研究主要探討血清miR-4485-3p和miR-1469在胃癌患者手術(shù)前后的表達(dá)變化及對(duì)術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)價(jià)值。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1月至2021年12月我院收治的胃癌患者80例,其中男性45例,女性35例,年齡25～68歲,平均(48.50±4.62)歲,患者均存在不同程度惡心嘔吐、腹痛、嘔血、黑便等癥狀。納入標(biāo)準(zhǔn):符合胃癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。排除標(biāo)準(zhǔn):檢查藥物過敏患者;甲狀腺功能明顯異常患者。

1.2 研究方法

采集患者手術(shù)治療前后1 d的靜脈血5 mL,在室溫環(huán)境下放置1 h后,放入離心機(jī)內(nèi)以1000 r/min速度離心10 min,離心完成后取上層血清,將其轉(zhuǎn)移至新的收集管,再次按照1.2×104r/min的速度離心10 min,將細(xì)胞碎片去除,保存于-80 ℃環(huán)境待檢。

根據(jù)試劑盒說明書開展RNA提取和逆轉(zhuǎn)錄,應(yīng)用Trizol LS試劑對(duì)血清總RNA進(jìn)行提取,采用RNasefree ddH2O 10 μL將其溶解后,應(yīng)用PCR試劑盒實(shí)施逆轉(zhuǎn)錄,對(duì)cDNA予以生成,在進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄時(shí),反應(yīng)體系的總量為10 μL,在37 ℃溫度下反應(yīng)60 min,在85 ℃溫度下反應(yīng)5 min。將獲取的cDNA模板進(jìn)行稀釋,稀釋倍數(shù)為10倍,最后將其放置于-20 ℃環(huán)境下待檢。在對(duì)血清miR-4485-3p和miR-1469水平進(jìn)行檢測(cè)時(shí),PCR擴(kuò)增應(yīng)用的儀器為DK500實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀,反應(yīng)條件:在95 ℃溫度下進(jìn)行10 s預(yù)變性,在95 ℃溫度下進(jìn)行5 s變性,在60 ℃溫度下進(jìn)行退火,并進(jìn)行20 s時(shí)間延伸,共開展40個(gè)循環(huán)處理。各個(gè)樣品均應(yīng)用3個(gè)復(fù)孔,將U6作為內(nèi)參照基因。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)本組患者手術(shù)治療前后1 d的血清miR-4485-3p與miR-1469水平;(2)胃癌患者血清miR-4485-3p和miR-1469水平相關(guān)性;(3)開展6個(gè)月時(shí)間隨訪,記錄術(shù)后復(fù)發(fā)情況,比較復(fù)發(fā)患者與無復(fù)發(fā)患者的血清miR-4485-3p和miR-1469水平;(4)術(shù)后轉(zhuǎn)移患者與無轉(zhuǎn)移患者的血清miR-4485-3p和miR-1469水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 本組患者手術(shù)治療前后1 d的血清miR-4485-3p與miR-1469水平比較

胃癌患者手術(shù)治療后血清miR-4485-3p與miR-1469水平高于治療前(P<0.05),如表1。

表1 手術(shù)治療前后1 d的血清miR-4485-3p與miR-1469水平比較

2.2 胃癌患者血清miR-4485-3p和miR-1469水平相關(guān)性分析

通過開展相關(guān)性分析顯示,胃癌患者血清miR-4485-3p和miR-1469水平的相關(guān)系數(shù)γ值為0.122,P值為0.320,95%CI為-0.122～0.338,表明胃癌患者血清miR-4485-3p和miR-1469水平無明顯相關(guān)性(P>0.05)。

2.3 術(shù)后復(fù)發(fā)與無復(fù)發(fā)患者的術(shù)前血清miR-4485-3p和miR-1469水平比較

80例患者術(shù)后復(fù)發(fā)18例,術(shù)后復(fù)發(fā)組患者的術(shù)前血清miR-4485-3p和miR-1469低于無復(fù)發(fā)組(P<0.05),如表2。

表2 術(shù)后復(fù)發(fā)與無復(fù)發(fā)患者的術(shù)前血清miR-4485-3p和miR-1469水平比較

2.4 術(shù)后轉(zhuǎn)移與無轉(zhuǎn)移患者的術(shù)前血清miR-4485-3p和miR-1469水平比較

本組患者術(shù)后轉(zhuǎn)移9例,術(shù)后轉(zhuǎn)移組患者的術(shù)前血清miR-4485-3p和miR-1469低于無轉(zhuǎn)移組(P<0.05),如表3。

表3 術(shù)后轉(zhuǎn)移與無轉(zhuǎn)移患者的術(shù)前血清miR-4485-3p和miR-1469水平比較

3 討論

原發(fā)性胃癌屬于胃癌的常見類型,在我國(guó)具有較高的發(fā)病率,尤其是隨著飲食結(jié)構(gòu)的變化,發(fā)病率逐漸升高,發(fā)病人群的年齡也呈現(xiàn)出年輕化的趨勢(shì)。在疾病發(fā)生的初期階段,病灶體積較小,且無明顯特異性癥狀,因此容易被忽視,出現(xiàn)漏診或誤診的情況[5]。疾病確診時(shí)可能已喪失最佳治療時(shí)機(jī)。因此加強(qiáng)影像學(xué)檢查,對(duì)于盡早確診原發(fā)性胃癌,對(duì)于患者疾病預(yù)后改善具有積極意義[6]。以往臨床上在對(duì)消化道腫瘤進(jìn)行檢查時(shí),所應(yīng)用的方法主要為胃鏡檢查、超聲檢查以及X線鋇影檢查,但上述方法均只能對(duì)黏膜表面所發(fā)生的病理改變進(jìn)行診斷,即便開展表面組織病理活檢,也難以對(duì)深層病變進(jìn)行確診。microRNA屬于內(nèi)源基因編碼的單鏈RNA分子,其會(huì)對(duì)靶mRNA具備的穩(wěn)定性產(chǎn)生破壞,導(dǎo)致靶mRNA的翻譯受到抑制,由此來調(diào)控靶mRNA的水平。有資料報(bào)道稱,mRNA對(duì)人類1/3的基因產(chǎn)生調(diào)控,有70%左右的哺乳動(dòng)物的mRNA所處的位置在TUs區(qū),同時(shí)大多數(shù)所處的位置在內(nèi)含子區(qū)[7-9]。

microRNA中RNA含量高,其具備的序列大小通常情況下為17～25個(gè)核苷酸,在細(xì)胞增殖、凋亡、遷移以及分化過程中,發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用,同時(shí)在腫瘤信號(hào)通路的過度激活或抑制中也發(fā)揮作用[10]。在對(duì)腫瘤開展診斷和治療時(shí),可通過microRNA來對(duì)疾病進(jìn)行分型和預(yù)后預(yù)測(cè)。血清miR-4485-3p屬于重要的microRNA類型,有研究報(bào)道稱,胃癌患者的血清miR-4485-3p表達(dá)和患者自身的性別、年齡、腫瘤大小、TNM分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移不存在明顯的相關(guān)性[11]。但也有學(xué)者通過研究發(fā)現(xiàn),血清miR-4485-3p可作為對(duì)胃癌治療效果進(jìn)行診斷和評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)[12]。miR-1469所處的位置在15號(hào)染色體,其可發(fā)揮致癌基因或抑癌基因的活性,在腫瘤發(fā)展中充當(dāng)重要角色。在腫瘤組織中,miR-1469呈現(xiàn)異常表達(dá),主要是在發(fā)生凋亡的腫瘤細(xì)胞內(nèi),miR-1469的水平會(huì)明顯提高。有研究報(bào)道稱,肺癌患者群體中,miR-1469可將VP16誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡增強(qiáng),通過實(shí)施更深層的分析后顯示,miR-1469產(chǎn)生的作用靶點(diǎn)為stat5a,miR-1469可依靠stat5a對(duì)腫瘤細(xì)胞的增生以及凋亡產(chǎn)生作用[13]。本次研究中,胃癌患者手術(shù)治療后血清miR-4485-3p與miR-1469水平高于治療前,表明隨著手術(shù)治療的開展,胃癌患者的疾病發(fā)展得到控制,使患者的血清miR-4485-3p與miR-1469水平得以有效提升。與相關(guān)研究報(bào)道稱,胃癌患者術(shù)后血清miR-4485-3p與miR-1469水平高于治療前相符[14]。同時(shí)本次研究中,胃癌患者血清miR-4485-3p和miR-1469水平無明顯相關(guān)性,表明血清miR-4485-3p與miR-1469水平之間并不存在明顯的關(guān)聯(lián),其均可獨(dú)立作為對(duì)胃癌手術(shù)療效進(jìn)行評(píng)估的指標(biāo)。本次研究中,術(shù)后復(fù)發(fā)組患者的術(shù)前血清miR-4485-3p和miR-1469低于無復(fù)發(fā)組;術(shù)后轉(zhuǎn)移組患者的術(shù)前血清miR-4485-3p和miR-1469低于無轉(zhuǎn)移組,表明血清miR-4485-3p與miR-1469水平在胃癌手術(shù)治療后預(yù)后預(yù)測(cè)中具備較好的應(yīng)用效果[15]。在手術(shù)治療前,患者自身的血清miR-4485-3p與miR-1469水平越低,則表明患者在接受手術(shù)治療后,其出現(xiàn)復(fù)發(fā)以及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)越高。有研究報(bào)道稱,miR-1469的表達(dá)水平和腫瘤患者的5年生存率以及總生存周期存在密切關(guān)聯(lián),當(dāng)miR-1469的表達(dá)水平較低時(shí),腫瘤患者的5生生存率更高,總生存期更長(zhǎng)。通過在手術(shù)治療前,為患者進(jìn)行血清miR-4485-3p與miR-1469水平檢測(cè),可為患者的預(yù)后提供參考。對(duì)于手術(shù)治療前血清miR-4485-3p與miR-1469水平較低的胃癌患者,術(shù)后需更加注意監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的發(fā)生[16]。

綜上所述,血清miR-4485-3p和miR-1469在胃癌患者手術(shù)后水平得以明顯提升,且可對(duì)術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移提供良好的預(yù)測(cè)價(jià)值。