口服補液鹽散（III）中元素雜質的研究

史大勇，郭 偉，顏世強，李亮亮，解春文

（山東達因海洋生物制藥股份有限公司，山東 威海 264300）

國際人用藥注冊技術協調會議（International Conference on Harmonization，ICH）批準的Q3D元素雜質指南中，將藥品中的“重金屬”一詞變為“元素雜質”。元素雜質不僅對藥物藥效產生影響，也會導致人體中毒，因此，元素雜質檢測在藥物研發過程中至關重要。我國于2017年加入ICH，在ICH Q3D的基礎上，《中華人民共和國藥典》2020年版[1-2]收錄適合我國國情的元素雜質控制要求。一般原料藥的元素雜質來源有：有意加入的合成原料殘留物；無意加入的原料負載雜質和生產設備等雜質，且最終能被檢測到的元素雜質[3-4]。

口服補液鹽散（III）是世界衛生組織推薦的治療急性腹瀉脫水的藥物，其糾正脫水的速度優于靜脈滴注，主要由氯化鈉、氯化鉀、枸櫞酸鈉和葡萄糖組成。除具有補充水、鈉和鉀的作用外，對急性腹瀉有治療作用，臨床主要用于補充水、鈉和鉀，治療急性腹瀉[5-8]。

本文參照《中華人民共和國藥典》2020年版和ICH Q3D元素雜質指南要求，創建電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）法測定口服補液鹽散（III）中多元素雜質的方法，靈敏度高，干擾少，簡便準確，可用于對口服補液鹽散（III）中各元素雜質的質量控制[9-10]。

1 儀器與試藥

7700X型電感耦合等離子體質譜儀（美國安捷倫公司）；MS105DU電子分析天平（梅特勒-托利多）；MARS 20微波消解儀（美國CEM公司）。

口服補液鹽散（III）（批號：150802，150803，150804，山東達因海洋生物制藥股份有限公司）；多元素標準溶液（鉛、鎘、砷、汞、鈷、釩、鎳、鎂、鋁、錳，唯一標識：175056，國家有色金屬及電子材料分析測試中心）；汞單元素標準溶液（唯一標識：158022-1，國家有色金屬及電子材料分析測試中心）；硝酸（優級純，含量≥70 %，天津科密歐）；水為超純水。

2 方法與結果

2.1 儀器參數與樣品測定

儀器參數見表1。

表1 金屬離子含量測定ICP-MS實驗參數

2.2 溶液制備

2.2.1 對照品儲備溶液（各元素含量：10 ng/ml）精密量取多元素標準溶液0.5 ml與汞元素標準溶液0.05 ml，置于50 ml量瓶，加5 %硝酸水溶液稀釋至刻度，搖勻，再精密量取混合液0.5 ml，置于50 ml量瓶，加5 %硝酸水溶液稀釋至刻度，搖勻即得。

2.2.2 對照品溶液 精密量取對照品儲備溶液0.1，0.4，2，8，12，24 ml，分別置于50 ml量瓶，再以5 %硝酸水溶液稀釋至刻度，搖勻即得。

2.2.3 供試品溶液（10 mg/ml溶液） 精密稱取樣品0.5 g，置消解罐中，加入濃硝酸5 ml，消解 30 min，以5 %硝酸水溶液稀釋至50 ml即得。

2.3 方法學驗證

參考美國藥典＜233＞[11]，驗證口服補液鹽散（III）元素雜質的測定方法，其驗證結果如下。

2.3.1 線性與定量限 精密量取各元素雜質標準溶液適量，在0～5 ng/ml濃度范圍內，配制各元素雜質的混合線性試液，以元素濃度（X）及校正數值（Y）進行線性回歸，計算回歸方程。結果，鉛、鎘、砷、汞、鈷、錳、釩和鎳在0.01～4.99 ng/ml內，鎂元素的濃度在0～4.89 ng/ml內，鋁元素的濃度在0.16～5.02 ng/ml內，線性關系良好，其R2均大于0.9940。取空白溶劑平行測定11次，計算定量限，均低于各元素相應限度。結果見表2。

表2 線性實驗與定量限結果

2.3.2 回收率 按2.2.1項對照品儲備溶液配制對照品儲備溶液，按2.2.2項對照品溶液配制對照品溶液。

供試品溶液1：精密稱取樣品0.5 g，共6份，分別加入對照品儲備液1 ml，置入消解罐，加入濃硝酸5 ml，開始消解，再加5 %硝酸水溶液稀釋至50 ml，即得。

供試品溶液2：精密稱取樣品0.5 g，共6份，分別加入對照品儲備液10 ml，置入消解罐，加入濃硝酸5 ml，進行消解，再加5 %硝酸水溶液稀釋至50 ml，即得。

供試品溶液3：精密稱取樣品0.5 g，共6份，分別加入對照品儲備液20 ml，置消解罐中，加入濃硝酸5 ml，進行消解，再加5 %硝酸水溶液稀釋至50 ml，即得。

每個濃度各制備6份，分別進樣測定，計算各元素回收率。結果見表3。

表3 回收率試驗結果

2.3.3 精密度 取待測樣品按2.2.3項下方法處理，連續進樣6次，計算各元素的濃度。結果，各元素含量RSD為0～12.9 %。

2.3.4 重復性 取待測樣品6份，按2.2.3項下方法處理，計算各元素的濃度。結果，各元素含量RSD為0～12.6 %。

2.3.5 中間精密度 不同日期，不同操作人員分別取待測樣品6份，按2.2.3項下方法處理，計算各元素的濃度。結果，各元素含量RSD為0～12.1 %。

2.4 測定結果

取不同批次待測樣，按2.2.3項下方法處理后，分別進樣分析，計算樣品中各元素的含量。結果見表4。

表4 待測品測定結果

3 分析與討論

3.1 樣品處理方法的選擇

ICP-MS的進樣方式有消解進樣、直接或稀釋進樣及有機加氧進樣等方式[12-13]。消解進樣具有分解快速、完全，揮發性元素損失小等優點；而直接或稀釋進樣適合固態樣品和有機成分少的樣品。本品處方中葡萄糖含量大于60 %，選擇直接或稀釋進樣會有干擾元素被檢出，對待測元素產生干擾，所以進行消解，可保證測定結果可靠[14-15]，因此選擇微波消解法。

3.2 供試品消解量的確定

分別稱取口服補液鹽散（III）0.5，1.0，1.5 g，按2.1項方法對供試品進行消解，發現稱取供試品1.0 g與1.5 g無法消解完全，因此確定取供試品0.5 g進行消解。

3.3 元素雜質的確定 和限度制定依據

按照ICH Q3D中對口服固體制劑的檢測規定，需對1類、2A類元素雜質進行風險評估。口服補液鹽散（III）由原料氯化鈉與氯化鉀引入鋁、鎂和錳，這3種雜質元素屬于ICH Q3D中的其他元素分類，毒性較低；但上述元素雜質在含量較高條件下會引起腎毒性及肝毒性，因此同樣需檢測其含量。本文根據ICH Q3D關于金屬催化劑或金屬試劑殘留限度指南規定，制定了口服補液鹽散（III）中各個元素雜質的限度，并創建合理的控制上述元素雜質的方法[16]。