不同產(chǎn)地刺五加葉中14種微量元素含量測(cè)定與分析

田國(guó)賀 趙艷 孫海濤 韓曉紅 陳國(guó)寧 王保森 韓松濤

【摘要】目的：了解不同產(chǎn)地刺五加葉中鈉（Na）、鈣（Ca）、鎂（Mg）、鈷（Co）、鎳（Ni）、釩（V）、鉻（Cr）、鋰（Li）、銻（Sb）、砷（As）、鎘（Cd）、汞（Hg）、鉛（Pb）、銅（Cu）14種微量元素的含量。方法：采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICP-MS）測(cè)定，選取同位素鈹（Be）、鉍（Bi）、銦（In）、鈧（Sc）、鍺（Ge）作為內(nèi)標(biāo)溶液進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果：各元素線性關(guān)系均良好（r>0.997），各元素精密度試驗(yàn)RSD值均小于5.91%，重復(fù)性RSD值在1.91%～6.05%之間，平均回收率為73.94%～108.75%，不同產(chǎn)地刺五加葉中Ca、Mg元素含量最高，遠(yuǎn)高于其他元素，同時(shí)藥材安全性均符合要求。結(jié)論：該方法具有分析速度快和準(zhǔn)確度高的優(yōu)點(diǎn)，可用于刺五加葉中14種微量元素的含量測(cè)定。

【關(guān)鍵詞】刺五加葉；微量元素；電感耦合等離子體質(zhì)譜法；內(nèi)標(biāo)法

【DOI編碼】10.3969/j.issn.1674-4977.2023.06.029

【基金項(xiàng)目】2023年吉林省中醫(yī)藥科技項(xiàng)目：中藥材（中藥飲片）刺五加葉質(zhì)量評(píng)價(jià)的研究（2023075）。

Determination and Analysis of 14 Trace Elements in the Leaves of Acanthopanax Senticosus from Different Regions

TIAN Guohe， ZHAO Yan， SUN Haitao， HAN Xiaohong， CHEN Guoning， WANG Baosen， HAN Songtao*

（Jilin Provincial Institute for Drug Control and Research， Changchun 130033， China）

Abstract： Objective： To investigate the content of 14 trace elements， including sodium （Na）， calcium （Ca）， magnesium （Mg）， cobalt（Co）， nickel （Ni）， vanadium （V）， chromium （Cr）， lithium （Li）， antimony （Sb）， arsenic （As）， cadmium （Cd）， mercury （Hg）， lead （Pb）， and copper （Cu）， in the leaves of Acanthopanax senticosus from different regions. The method was determined using inductively coupled plasma mass spectrometry （ICP-MS）， and isotopes beryllium （Be）， bismuth （Bi）， indium （In）， scandium （Sc）， and germanium （Ge） were selected as internal standard solutions for determination. The linear relationship of each element was good （r>0.997）， and the RSD values of precision tests for each element were less than 5.91%. The repeatability RSD values ranged from 1.91% to 6.05%， and the average recovery rate was 73.94% to 108.75%. The content of Ca and Mg elements in the leaves of Acanthopanax senticosus from different regions was the highest， much higher than other elements. At the same time， the safety of the medicinal materials met the requirements. Conclusion： This method has the advantages of fast analysis speed and high accuracy， and can be used for the determination of 14 trace elements in the leaves ofAcanthopanax senticosus.

Key words： acanthopanax senticosus leaves； trace elements； inductively coupled plasma mass spectrometry； internal standard method

刺五加，又名五加參和刺拐棒。傳統(tǒng)中醫(yī)藥中的刺五加是指五加科植物刺五加（Acanthopanax senticosus Harm）的干燥根及根莖。主要產(chǎn)于黑龍江、吉林、遼寧等地[1]。中醫(yī)藥多認(rèn)為刺五加具有益氣健脾、補(bǔ)腎安神之功效。其莖、葉、花、果實(shí)也可作藥用。現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)刺五加葉具有治療心腦血管疾病、抗腫瘤、降血糖、提高免疫力、抗疲勞、抗氧化、保肝護(hù)肝等藥理作用。目前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)刺五加根及根莖的質(zhì)量控制研究相對(duì)較多[2-3]，而關(guān)于刺五加葉的質(zhì)量控制研究相對(duì)較少，尤其對(duì)刺五加葉中微量元素的研究更少未報(bào)道[4]。在食品和保健品方面，已開發(fā)出由刺五加葉制備的顆粒和袋泡茶，經(jīng)質(zhì)量評(píng)價(jià)顯示其中含有大量對(duì)人體有益的生物活性成分。為進(jìn)一步開發(fā)利用刺五加葉的藥用價(jià)值，本研究主要從刺五加葉的微量元素方面來探索，為刺五加葉的藥物制劑品種開發(fā)和研究奠定基礎(chǔ)。

美國(guó)安捷倫7700電感耦合等離子體質(zhì)譜儀；賽默飛BS124S型電子天平；MARS240/50 MARS微波消解儀。硝酸（質(zhì)量分?jǐn)?shù)65%，優(yōu)級(jí)純，購(gòu)自美國(guó)Merck公司），水為屈臣氏蒸餾水。砷（As）、鎘（Cd）、汞（Hg）、鉛（Pb）、銅（Cu）多元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（中國(guó)食品藥品檢定研究院）批號(hào)：60014-201701；鈹（Be）、鉍（Bi）、銦（In）、鈧（Sc）多元素混合內(nèi)標(biāo)溶液（國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心）批號(hào)：23D61446；鋁（Al）、鋇（Ba）、鈷（Co）、鉻（Cr）、鋰（Li）、鉬（Mo）、鈉（Na）、鉀（K）、鈣（Ca）、鎂（Mg）多元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心）批號(hào)：23D71005；銻（Sb）、錫（Sn）等多元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心）批號(hào)：批號(hào)：23D60698；鎳（Ni）、釩（V）單元素溶液（國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心）批號(hào)：234023-3、233061-4。刺五加葉來源于吉林省長(zhǎng)白山十五道溝、靖宇縣泉陽(yáng)鎮(zhèn)和輝南縣小城子村，以及黑龍江省松江河老松江村和尚志市亞布力鎮(zhèn)，共收集10批樣品，經(jīng)吉林省藥品檢驗(yàn)研究院中藥室專家鑒定為五加科植物刺五加的干燥葉。

2.1ICP-MS條件

用調(diào)諧液調(diào)整儀器各項(xiàng)指標(biāo)，靈敏度Li（7）≥3000，Y（89）≥12000，Tl（205）≥6000；氧化物（CeO/Ce）≤1.5%；雙電荷（Ce< sup>2+

/Ce）≤2%；射頻功率：1.30 kW；等離子體載氣流量：9.00 L/min；輔助氣流量：1.50 L/min；霧化器流量：1.04 L/ min；采樣深度：5.00 mm；霧化室溫度：3℃。

微波消解功率為1800 W，0～9分鐘溫度升至135℃，并保持10分鐘，19～26分鐘升至180℃，并保持25分鐘。

2.2內(nèi)標(biāo)溶液的配置

精密量取鈹（Be）、鉍（Bi）、銦（In）、鈧（Sc）標(biāo)準(zhǔn)液適量，用2%硝酸溶液配置成10 ng/mL的溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液，所有空白溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液都通過儀器在線加入內(nèi)標(biāo)溶液。

2.3供試品溶液的制備

取本品10批次，分別取0.5 g，精密稱定，置消解管中，加入硝酸8 mL，100℃預(yù)消解2小時(shí)，置微波消解儀內(nèi)消解，消解完畢后，置50 mL塑料瓶中，用2%硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，作為除Na、Ca、Mg外11種元素供試品溶液。精密量取1 mL，置100 mL塑料瓶中，用硝酸溶液（3→100）稀釋至刻度，搖勻，作為Na元素供試品溶液。精密量取10 mL，置100 mL塑料瓶中，用硝酸溶液（3→100）稀釋至刻度，搖勻，作為Ca、Mg元素供試品溶液。

2.4標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

精密量取As、Cd、Hg、Pb、Cu混合元素標(biāo)準(zhǔn)溶液5種元素適量，用去離子水稀釋100倍，制成含有上述元素的儲(chǔ)備液。精密量取Co、Ni、V、Cr、Li、Sb、Na、Ca、Mg的9種元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用去離子水稀釋至濃度為1000 ng·mL-1含有上述元素的儲(chǔ)備液。精密量取上述兩種儲(chǔ)備液適量，用去離子水稀釋制成如表1所示的梯度標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度的溶液。本液應(yīng)臨用配制。

2.5線性關(guān)系考察

取2.4項(xiàng)下的14種元素混合系列對(duì)照品溶液，按照2.1項(xiàng)下的儀器工作條件進(jìn)行測(cè)定，內(nèi)標(biāo)進(jìn)樣管插入質(zhì)量濃度為10 ng·mL-1的內(nèi)標(biāo)溶液中，同時(shí)將進(jìn)樣管按照質(zhì)量濃度從小到大的順序插入各個(gè)混合系列對(duì)照品溶液中，每個(gè)樣品測(cè)定3次，以3次信號(hào)值的平均值為縱坐標(biāo)（y）、相對(duì)應(yīng)的進(jìn)樣質(zhì)量濃度作為橫坐標(biāo)（x），進(jìn)行線性回歸。結(jié)果見表2。

2.6精密度實(shí)驗(yàn)

取2.4項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)溶液5重復(fù)進(jìn)樣6次，按照2.1項(xiàng)下的儀器工作條件進(jìn)行測(cè)定6次，測(cè)量記錄信號(hào)強(qiáng)度值。計(jì)算RSD，結(jié)果計(jì)算得As、Cd、Hg、Pb、Co、Ni、V、Cu、Cr、Li、Sb、Na、Ca、Mg的RSD值分別為4.55%、3.09%、5.56%、5.46%、4.53%、4.71%、5.49%、4.56%、4.02%、4.42%、3.05%、4.91%、5.65%、5.91%，表明儀器精密度良好。

2.7重復(fù)性試驗(yàn)

取樣品長(zhǎng)白山十五道溝粉末，按照2.3項(xiàng)下方法制備供試品溶液6份，按照2.1項(xiàng)下儀器條件進(jìn)行測(cè)定，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3次，分別計(jì)算14種微量元素的含量，結(jié)果見表3，各元素重復(fù)性RSD值在1.91%～6.05%之間，表明該方法重復(fù)性良好。

2.8準(zhǔn)確度試驗(yàn)

精密稱取樣品長(zhǎng)白山十五道溝粉末0.25 g，平行6份樣品，置于消解罐內(nèi)，每份按照樣品含量加入相應(yīng)的對(duì)照品溶液，按照2.3項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按照2.1項(xiàng)下的儀器工作條件測(cè)定，分別計(jì)算14種微量元素的加樣回收率和RSD值，結(jié)果見表3，本法為痕量分析法，各元素回收率值在73.94%～108.75%之間，表明該方法的準(zhǔn)確性良好。

2.9實(shí)際樣品測(cè)定

取刺五加葉10批，按照2.3項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按照2.1項(xiàng)下儀器工作條件進(jìn)行測(cè)定，分別計(jì)算10批樣品中14種元素的含量。結(jié)果見表4，其中Cd、Hg、Sb三種元素未檢出。10批次藥材中的微量元素Pb、Cd、As、Hg、Cu含量均符合《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版四部[5]中規(guī)定的藥材及飲片（植物類）限量值。通過考察發(fā)現(xiàn)刺五加葉中Ca、Mg元素含量最高，遠(yuǎn)高于其他元素，Ca的最高含量為3.2 mg·g-1，Mg的最高含量為2.4 mg·g-1。

從考察結(jié)果可以看出不同產(chǎn)地的刺五加葉中鎂含量最高，其次為鈣、鈉、鎳、銅，刺五加葉中微量元素含量存在一定區(qū)域性差異，這可能與藥材的環(huán)境、氣候和采集地點(diǎn)等因素有關(guān)。

研究表明，刺五加葉藥材所含微量元素含量符合《中國(guó)藥典》規(guī)定，安全性良好。各種微量的種類和含量與中藥的生長(zhǎng)以及臨床藥效發(fā)揮相關(guān)，因此對(duì)中藥所含的微量元素進(jìn)行考察是評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)的指標(biāo)之一。本文采用ICP-MS法檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，精密度與準(zhǔn)確度均高于原子吸收法。

【參考文獻(xiàn)】

[1]潘景芝，金莎，崔文玉，等.刺五加的化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J].食品工業(yè)科技，2019，40（23）：353-360.

[2]葉強(qiáng)，張陽(yáng)，張玉姣，等.國(guó)內(nèi)五加屬植物資源人工栽培的研究現(xiàn)狀及展望[J].黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2018（11）：163-166

[3]粟杰，馮艷，林炳鋒，等.刺五加化學(xué)成分的分離與鑒定[J].中草藥，2021，52（16：）4783-4788.

[4]劉偉玲，刺五加葉中的主要活性成分分析[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2009（7）：87-88.

[5]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（四部）[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2020：522.

【作者簡(jiǎn)介】

田國(guó)賀，女，1982年出生，副主任藥師，研究方向?yàn)樗幤窓z驗(yàn)與研究。

通訊作者：韓松濤，男，1982年出生，副主任藥師，研究方向?yàn)樗幤窓z驗(yàn)與研究。郵箱：hansongtao04@163.com。

（編輯：侯睿琪）