化妝品能力驗(yàn)證中重金屬含量檢測(cè)關(guān)鍵點(diǎn)控制的研究

孫盛楠，雷運(yùn)桂，溫文錦

(清遠(yuǎn)市食品藥品檢驗(yàn)所，廣東 清遠(yuǎn) 511500)

0 引言

能力驗(yàn)證是通過(guò)實(shí)驗(yàn)室的比對(duì)來(lái)判定實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力的活動(dòng)，是確保實(shí)驗(yàn)室維持較高的檢測(cè)水平而對(duì)其能力進(jìn)行考核、監(jiān)督和確認(rèn)的一種驗(yàn)證活動(dòng)[1]。能力驗(yàn)證工作已經(jīng)越來(lái)越受到國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室和監(jiān)管部門(mén)的重視[2]。藥品、食品、化妝品在原料、輔料、制作設(shè)備及制作工藝過(guò)程中都可能會(huì)帶入重金屬，甚至一些不良廠商為了利益，在產(chǎn)品中非法添加重金屬。據(jù)文獻(xiàn)記載，重金屬可通過(guò)呼吸道、消化道以及皮膚等途徑侵入人體，其不僅對(duì)人體產(chǎn)生危害作用，也對(duì)環(huán)境造成較大破壞[3]。因此討論如何保證樣品中重金屬含量的檢測(cè)的準(zhǔn)確性，顯得尤為重要。

1 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

這需要充分考慮人、法、機(jī)、料、環(huán)5個(gè)影響因素。

1.1 檢驗(yàn)人員

檢驗(yàn)人員的技能素養(yǎng)會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，任何一流程的操作失誤都會(huì)導(dǎo)致結(jié)果的偏離。實(shí)驗(yàn)室相關(guān)人員要提升專業(yè)素養(yǎng)，明確自身職責(zé)，檢驗(yàn)人員能熟練掌握檢驗(yàn)方法和儀器使用，注意實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵點(diǎn)的操作，審核人員審核報(bào)告的結(jié)果是否準(zhǔn)確有效。

1.2 方法選擇

《能力驗(yàn)證作業(yè)指導(dǎo)書(shū)》作為能力驗(yàn)證活動(dòng)的操作指南，經(jīng)過(guò)能力驗(yàn)證組織機(jī)構(gòu)反復(fù)驗(yàn)證，具有很強(qiáng)的針對(duì)性和可操作性，統(tǒng)一各實(shí)驗(yàn)室操作方法，減少數(shù)據(jù)結(jié)果誤差。仔細(xì)閱讀作業(yè)指導(dǎo)書(shū)，按照指導(dǎo)書(shū)要求明確檢驗(yàn)方法。

1.3 儀器準(zhǔn)備

根據(jù)所選方法，選擇適用的檢測(cè)儀器。依照《藥品檢驗(yàn)所實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范(試行)》（國(guó)藥管注〔2000〕403號(hào))的要求，確保使用儀器在計(jì)量檢定周期范圍之內(nèi)。為了排除儀器誤差干擾，根據(jù)作業(yè)指導(dǎo)書(shū)要求，通常可采取兩種不同原理的檢測(cè)儀器進(jìn)行檢測(cè)或者同種原理的儀器，不同品牌或者型號(hào)進(jìn)行結(jié)果比對(duì)。由于重金屬自身的特性，所用各種量器必須提前校正。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所用到的玻璃器皿、消解罐等均需在30%的硝酸中浸泡24 h以上，用超純水清洗后，待干后備用，以防止器皿重金屬污染所帶來(lái)的誤差。

1.4 試劑準(zhǔn)備

根據(jù)所選方法，提前準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)室所需用水、試劑、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，條件允許應(yīng)盡量選擇未開(kāi)封的優(yōu)級(jí)純硝酸，未開(kāi)封的符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的重金屬儲(chǔ)備液以及符合規(guī)定的實(shí)驗(yàn)室用水。建議根據(jù)能力驗(yàn)證計(jì)劃，提前申購(gòu)質(zhì)控樣品來(lái)進(jìn)行隨行質(zhì)量控制，來(lái)確保能力驗(yàn)證開(kāi)展的準(zhǔn)確性。同時(shí)測(cè)定與樣品基質(zhì)一致或相近的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，以抵消前處理過(guò)程和基質(zhì)干擾產(chǎn)生的偏差，作為能力驗(yàn)證結(jié)果的參考數(shù)據(jù)。

1.5 環(huán)境保障

根據(jù)《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》要求，嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件。實(shí)驗(yàn)室溫濕度、通風(fēng)等環(huán)境因素必須滿足能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)檢測(cè)順利開(kāi)展的需求，盲樣樣品儲(chǔ)存環(huán)境、前處理環(huán)境、測(cè)定環(huán)境均需符合要求。

2 實(shí)驗(yàn)

2.1 收樣確認(rèn)

按照《能力驗(yàn)證作業(yè)指導(dǎo)書(shū)》要求，實(shí)驗(yàn)室在收到樣品后，應(yīng)首先對(duì)樣品是否完好進(jìn)行確認(rèn)，同時(shí)在系統(tǒng)上如“實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證服務(wù)平臺(tái)”中進(jìn)行樣品信息確認(rèn)。如收到的樣品存在破損、污染等問(wèn)題，應(yīng)及時(shí)與實(shí)施機(jī)構(gòu)聯(lián)系更換事宜，以便組織方實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)，并補(bǔ)發(fā)樣品。樣品應(yīng)按照要求妥善保存，開(kāi)蓋后應(yīng)盡快開(kāi)展實(shí)驗(yàn)工作。

2.2 初步篩查

利用手持式X射線熒光光譜儀進(jìn)行初步篩查，確定含量大致范圍，根據(jù)測(cè)得結(jié)果選擇適當(dāng)?shù)姆椒ê蛢x器。通常采用石墨爐原子吸收光譜法、原子吸收光譜法、高效液相色譜法、電感耦合等離子體發(fā)射光譜法、電感耦合等離子體質(zhì)譜法、紫外可見(jiàn)分光光度法等[4]。

2.3 實(shí)驗(yàn)前處理

樣品前處理過(guò)程在化學(xué)分析流程中有著極為重要的作用，對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確與否起著決定性作用[5]。樣品可使用干法消解、濕法消解、微波消解等常用的3種前處理方式[6]。在使用方面，近幾年國(guó)內(nèi)有關(guān)微波制樣技術(shù)的研究發(fā)展很快，它將逐步成為各元素分析樣品處理最有力的工具之一[7]。如以CEM MARS5微波消解儀前處理為例，充分混合樣品，稱取樣品0.500 0 g(精確到0.000 1 g)，置于清洗好的聚四氟乙烯微波內(nèi)罐中，稱樣過(guò)程中注意消解罐罐壁不可粘有樣品，后加入8 mL硝酸，完全浸沒(méi)樣品，第二天，在最優(yōu)的儀器條件下微波消解。消解完成后，靜置至室溫，開(kāi)罐，消解罐放入趕酸儀中將溶液趕至1～2 mL，觀察溶液澄清透明后，轉(zhuǎn)移至標(biāo)定好的量器中，用水定容至刻度。若樣品趕酸過(guò)后仍有殘?jiān)炔蝗芪镔|(zhì)，則可能存在化妝品樣品消解不完全的情況(常見(jiàn)于固態(tài)化妝品)，易導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。參考作出以下改進(jìn)，取樣后改為加入6 mL硝酸+30%過(guò)氧化氫2 mL，靜置過(guò)夜，在趕酸儀上80 ℃加熱20 min，使樣品被充分氧化，后可通過(guò)調(diào)節(jié)微波消解儀消解溫度、消解功率、延長(zhǎng)消解時(shí)間等方法，將樣品消解完全，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.4 曲線的配制

結(jié)合所選方法和儀器適用范圍，配制不同濃度范圍的曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線合理使用關(guān)系到檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。如果樣品的檢測(cè)濃度位于標(biāo)準(zhǔn)曲線兩端，則會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。為了得到盲樣的可靠數(shù)值，樣品的檢測(cè)濃度設(shè)置在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍的1/3～2/3處。可以通過(guò)改變樣品的取樣量、增大或減小定容體積、或者重新設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度點(diǎn)的方式，使檢測(cè)濃度落在此區(qū)間，以獲得較高的準(zhǔn)確度和精密度。由于能力驗(yàn)證盲樣的有限性，可以先開(kāi)始預(yù)實(shí)驗(yàn)，確定樣品濃度范圍后，再對(duì)實(shí)驗(yàn)操作進(jìn)行調(diào)整。

3 儀器檢測(cè)

3.1 儀器參數(shù)適宜

儀器設(shè)備設(shè)定的參數(shù)、運(yùn)行的狀態(tài)會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性、準(zhǔn)確度或者精密度都會(huì)因此產(chǎn)生偏差，所以實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，要根據(jù)儀器操作規(guī)程調(diào)整儀器測(cè)定參數(shù)，各項(xiàng)參數(shù)穩(wěn)定后再開(kāi)始檢測(cè)。儀器運(yùn)行狀態(tài)穩(wěn)定，才能保證曲線線性符合規(guī)定，是檢測(cè)結(jié)果真實(shí)有效的前提。比如電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)使用前，需要預(yù)熱儀器，用調(diào)協(xié)液調(diào)諧儀器各項(xiàng)參數(shù)，使其達(dá)到測(cè)定要求。

3.2 空白值

空白值是質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)，直接關(guān)系到測(cè)定方法的測(cè)定下限和檢出限，也影響測(cè)定結(jié)果的重現(xiàn)性，尤其對(duì)低濃度樣品的測(cè)定結(jié)果影響很大。影響空白的因素有很多，比如水、試劑的純度、載氣的純度、儀器的燈電流、載氣流速、待測(cè)樣中酸的濃度等。所以在測(cè)定時(shí)，將儀器調(diào)至最佳狀態(tài)，應(yīng)選擇優(yōu)級(jí)純的硝酸和超純水，趕酸時(shí)在保證金屬不流失的情況下，盡量將酸趕盡，樣品空白和樣品同步處理。在使用原子吸收石墨爐法測(cè)定重金屬時(shí)，控制酸的濃度在2%以下，減少誤差。

3.3 隨行質(zhì)量控制

為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，減少不同方法、不同儀器、不同人員操作產(chǎn)生的誤差。可采用樣品加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)、質(zhì)控樣品同步檢測(cè)、標(biāo)準(zhǔn)曲線點(diǎn)回測(cè)、單點(diǎn)校正法、儀器比對(duì)、方法比對(duì)、人員比對(duì)等多種方式進(jìn)行質(zhì)量控制。

3.4 樣品加標(biāo)回收

加標(biāo)回收率作為隨行質(zhì)量控制的重要參考數(shù)據(jù)，不僅反映人員操作是否規(guī)范，還可以反映檢驗(yàn)方法是否適合待測(cè)樣品，在分析結(jié)果過(guò)程中有助于發(fā)現(xiàn)操作過(guò)程中存在的問(wèn)題并及時(shí)糾正。在能力驗(yàn)證中，通常采取樣品加標(biāo)的方式，加標(biāo)量不能過(guò)大，一般為待測(cè)物含量的0.5～2.0倍，加標(biāo)量應(yīng)盡量與樣品中待測(cè)物質(zhì)含量相等或相近。注意加標(biāo)體積對(duì)樣品體積的影響，加標(biāo)物的濃度應(yīng)較高，體積應(yīng)較小，一般以不超過(guò)原始試樣體積的1%為宜。

4 數(shù)據(jù)結(jié)果分析

4.1 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

按能力驗(yàn)證作業(yè)指導(dǎo)書(shū)的要求，在盲樣有限的情況下，盡量保證稱取3個(gè)平行樣品、1個(gè)同種基質(zhì)的質(zhì)控樣品、1個(gè)樣品加標(biāo)回收、1個(gè)樣品空白進(jìn)行測(cè)定。平行樣品之間的偏差是否符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定要求。測(cè)定質(zhì)控樣品的值，與真實(shí)值進(jìn)行比較，已知的質(zhì)控樣在其允許范圍內(nèi)，特別是接近靶值時(shí)，盲樣檢測(cè)結(jié)果一般都會(huì)在其允許范圍內(nèi)。計(jì)算加標(biāo)回收率在95%～105%之間，以確保方法的有效性。實(shí)驗(yàn)人員綜合上述結(jié)果，對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，決定數(shù)據(jù)取舍，撰寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告。以一次化妝品中鎘的測(cè)定為例，加標(biāo)量為2 μg的鎘。表1為原子吸收法火焰法、表2為ICP-MS法測(cè)得的數(shù)據(jù)結(jié)果，舉例分析。

表1 原子吸收法火焰法

表2 ICP-MS法

結(jié)果如表1和表2中所示，通過(guò)儀器比對(duì)，測(cè)得化妝品中鎘的含量都在指定范圍內(nèi)，測(cè)得結(jié)果滿意。

4.2 報(bào)告審核

負(fù)責(zé)本次能力驗(yàn)證職責(zé)范圍內(nèi)的審核人員，對(duì)報(bào)告進(jìn)行審核。審核的內(nèi)容主要有：測(cè)定方法是否可行、儀器設(shè)備是否在檢定周期內(nèi)、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是否有效、報(bào)告結(jié)果是否準(zhǔn)確等信息。根據(jù)作業(yè)指導(dǎo)書(shū)要求，填寫(xiě)能力驗(yàn)證報(bào)告單。

5 結(jié)語(yǔ)

能力驗(yàn)證本質(zhì)上是一種自我評(píng)價(jià)手段，通過(guò)參加能力驗(yàn)證活動(dòng)，實(shí)驗(yàn)室可以自查自省。如果實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證重金屬檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)可疑或者不滿意時(shí)，實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員可參考文中提到的操作關(guān)鍵點(diǎn)，對(duì)整個(gè)操作流程進(jìn)行自查及時(shí)整改。只有不斷提高自身技能，全面掌握實(shí)驗(yàn)技術(shù)關(guān)鍵點(diǎn)，才能確保檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)、有效。