肝癌患者血清中sB7-H3、GP73、QSOX-1 的表達水平及臨床診斷價值研究

曹晨，陳曉娟，楊琳

（鄭州大學第二附屬醫院，河南 鄭州 450014）

原發性肝癌是一種臨床上常見的惡性腫瘤且發病率較高[1]，其臨床癥狀一般表現為肝區疼痛，食欲下降、乏力、腹脹等。在臨床一般采用手術治療、化學藥物治療、放射治療、生物治療及中醫藥治療，其中手術治療是最有效的治療方法，然而早期的原發性肝癌患者由于臨床癥狀并不明顯，所以大部分患者待到確診時已是中晚期[2]，導致錯過了最佳的手術治療時期。目前甲胎蛋白、甲胎蛋白異質體是原發性肝癌主要的早期診斷生物標志物，但是其均存在靈敏度和特異度不高等不足之處[3]。有研究表明血清可溶性B7-H3（Serum soluble B7-H3，sB7-H3）、血清中巰基氧化酶-1（Quiescin sulfhydl oxidase-1，QSOX-1）、高爾基體蛋白73（Golgi protein 73，GP73）在原發性肝癌中表達量顯著高于肝硬化組和正常組。因此本研究探討肝癌患者血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 的表達水平及臨床診斷價值。現報告如下。

1 一般資料與方法

1.1 一般資料 選取在2018 年2 月至2020 年2月期間來我院治療原發性肝癌患者310 例及同期健康體檢人員100 例作為研究對象。

納入標準：（1）觀察組患者符合原發性肝癌的診斷標準[6]；（2）經過受試者及其家屬同意，簽署知情同意書，并上報我院倫理委員會獲得批準同意。

排除標準：（1）患者在參加研究前接受過化療、放療、手術等治療；（2）合并其他腫瘤、心肝腎等疾病。

將原發性肝癌患者作為觀察組，同期健康體檢人員作為對照組。其中觀察組310 例，男186例，女124 例；年齡32～70 歲，平均年齡（55.68±5.67）歲；對照組男62 例，女38 例；年齡30～72 歲，平均年齡（55.64±5.65）歲。兩組受試者在性別、年齡資料上對比差異不顯著，無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 研究方法 所有受試者均在清晨空腹采集靜脈血5 mL，在室溫下靜置10 min，3 000 r/min 離心15 min，吸取上清液，放置在-80℃下保存待檢。采用雙抗體夾心法檢測血清中的sB7-H3、GP73、QSOX-1 的水平，其中sB7-H3 檢測試劑盒購自蘇州大學生物技術研究所，GD73 檢測試劑盒購自美國R＆D 公司，QSOX-1 檢測試劑盒購自上海滬震生物科技有限公司，具體操作嚴格按照試劑盒說明書進行，對溶度超出線性范圍樣本稀釋5～20 倍重新進行檢測。

1.3 統計學分析 研究所得數據均采用SPSS 22.0統計軟件分析，計數資料以例數［n（%）］的形式表示，采用獨立樣本χ2檢驗，計量資料以()的形式表示，采用配對樣本t 檢驗或獨立樣本t 檢驗，P＜0.05為差異統計學意義；根據血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 的水平繪制受試工作特征曲線（Receiver operator characteristic curve，ROC），利用ROC 曲線下面積評價血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 對肝癌臨床診斷價值，并確定最佳的臨界值。

2 結果

2.1 兩組受試者血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平的比較 由數據結果可知: 觀察組受試者的sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平顯著高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組受試者血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平的比較()

表1 兩組受試者血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平的比較()

2.2 血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平與肝癌患者臨床病理特征的關系 血清sB7-H3、GP73、QSOX-1水平在患者的性別、年齡上差異不顯著，無統計學意義（P＞0.05）；Ⅰ～Ⅱ期組患者的血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平顯著低于Ⅲ～Ⅳ期組，而GP73水平卻顯著高于Ⅲ～Ⅳ期組，差異有統計學意義（P＜0.05）；腫瘤直徑≥3 cm 組患者血清GP73、QSOX-1 水平顯著高于腫瘤直徑＜3 cm 組，差異有統計學意義（P＜0.05）；有遠處轉移組的肝癌患者血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平顯著高于無遠處轉移組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平與肝癌患者臨床病理特征的關系()

表2 血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平與肝癌患者臨床病理特征的關系()

2.3 血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 對原發性肝癌患者的臨床診斷價值 采用ROC 曲線分析血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 在兩組受試者的表達情況，見表3、圖1。

圖1 血清sB7-H3、GP73、QSOX-1診斷原發性肝癌患者的ROC 曲線圖

表3 血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 對原發性肝癌患者的臨床診斷的ROC 曲線參數

3 討論

原發性肝癌患者生存質量和生存率的提高取決于患者的早期診斷，而由于目前臨床肝癌患者輔助診斷的指標主要為甲胎蛋白、癌胚抗原及甲胎蛋白異質體等，但是上述輔助診斷指標的敏感性和特異性皆不理想，并且存在漏診率較高情況。朱波等[7]在研究中表明甲胎蛋白在診斷肝癌時，其靈敏度僅為34.5%～64.8%，特異度為71.5%～93.6%。因此，發現新的腫瘤標志物對肝癌的早期診斷和改善患者預后具有重要的臨床意義。近幾年，許多臨床工作對肝癌的診斷指標[8-9]進行了大量的研究。

GP73 是一種跨膜蛋白，又稱2 型高爾基體膜蛋白，在正常肝臟組織中肝細胞很少表達GP73，其主要在肝膽管上皮細胞表達[10]。當GP73 的增量表達到達飽和后，剩余的GP73 向高爾基體順面遠側移動，這可能是因為腫瘤細胞主動釋放或者在腫瘤細胞壞死后GP73 進入血液從而導入血清中[11]。鄭緒斌等[12]認為在原發性肝癌患者血清中GP73高表達，具有一定的臨床診斷價值。

B7-H3 是一種共刺激分子免疫球蛋白，其mRNA 在人體機體中廣泛表達。目前，B7-H3 分子同時存在膜型和可溶型（sB7-H3）。B7-H3 的蛋白質分子在B 細胞、活化的T 細胞、樹突狀細胞和單核細胞內表達。康富標等[13]在研究中發現B7-H3在原發性肝癌患者組織中表達水平升高，并且與腎癌、乳腺癌、胃癌等多種腫瘤組織的發生和發展有聯系。趙和平等[14]認為sB7-H3 在原發性肝癌患者血清中表達量高于對照組，且能夠作為診斷肝癌的指標。

QSOX-1 是一種參與蛋白質折疊的氧化巰基的酶，主要分布在高爾基體和內質網。Knutsvik G等[15]在研究中表明QSOX-1 的高表達是乳腺癌存活率下降的獨立影響因素，且QSOX-1 的表達水平可能作為腫瘤疾病的生物標志物。陶智、馮顯紅[16]的研究表明QSOX-1 對原發性肝癌診斷的截斷值為68.75 ng/L，靈敏度為74.3%，特異度為77.1%。

本研究顯示：觀察組受試者的sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平均顯著高于對照組。血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平在患者的性別、年齡上差異無統計學意義；Ⅰ～Ⅱ期組患者的血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平顯著低于Ⅲ～Ⅳ期組，而GP73水平卻顯著高于Ⅲ～Ⅳ期組；腫瘤直徑≥3 cm 組患者血清GP73、QSOX-1 水平顯著高于腫瘤直徑＜3 cm組；有遠處轉移組的肝癌患者血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平顯著高于無遠處轉移組。B7-H3、GP73、QSOX-1 的曲線下面積（AUC）分別為0.930、0.820 及0.817，最佳臨界值分別為2 870.58 ng/mL、115.68 ng/mL 及68.715 pg/mL，敏感度分別為74.2%、73.2%、57.1%，特異度分別為93.0%、98.0%、93.0%。若sB7-H3、GP73、QSOX-1 聯合診斷，即其中之一為陽性即診斷為肝癌，其敏感度為84.5%，特異度為98.9%。

綜上所述，血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 在原發性肝癌血清中高表達，表達水平與腫瘤直徑、臨床分期及是否發生遠處轉移有關，且sB7-H3、GP73、QSOX-1 可作為原發性肝癌早期診斷的良好指標，sB7-H3、GP73、QSOX-1 聯合檢測更能提高原發性肝癌的診斷的準確性。