鄧 卉, 郭升嵐, 余 淼, 黃明亞, 余 丹, 呂繼蓉 , 郭春華
(1.四川省畜牧科學研究院,四川成都 610066;2.西南民族大學畜牧獸醫學院,四川成都 610041;3.四川省動物采食調控工程技術研究中心,四川成都 611130;4.動物遺傳育種四川省重點實驗室,四川成都 610066)
自2020 年飼料生產企業停止生產含有促生長類藥物飼料添加劑(中草藥除外)的商品飼料以來,依賴抗生素日糧降低腹瀉、死亡率的養兔業面臨巨大挑戰,因此研發安全高效、綠色環保的新型飼料添加劑替代抗生素成為現下養兔業發展的必然趨勢。
我國中草藥資源豐富,因其含有蛋白質、維生素、微量元素、揮發油、多糖類、黃酮類、生物堿類、皂苷類等有益成分,具有增強免疫功能、抗炎、抗菌等功效,并且低毒無殘留、不易產生耐藥性,因此被行業廣泛關注(金爾光等,2017)。植物精油同中草藥的功效特點相似,含有多種生物活性成分,可抗炎、抗菌、提高機體免疫力,安全有效,因此也是行業研究熱點之一。 目前中草藥和植物精油在豬、雞動物日糧上的研究較多,但應用在兔上的研究報道較少,結果不盡相同,且缺乏深度。鑒于此,本研究以新西蘭肉仔兔為研究對象, 在我國飼料全面禁抗的現實背景下, 以復方中草藥和植物精油作為抗生素替代品評價其對肉仔兔生長性能、腹瀉、死亡率以及養分表觀消化率的影響,為養兔業優質替抗添加劑應用提供重要的參考依據。
1.1 試驗材料 本試驗替抗添加劑選用復方中草藥1 個,復合植物精油2 個(由成都大帝漢克生物科技有限公司提供)。 各添加劑組成:復方中草藥由蒼術20%、厚樸10%、陳皮10%、山楂10%、甘草5%等組成; 復合精油1 主要成分為肉桂醛(≥5%)、香芹酚(≥10%)、少量甜橙油等;復合精油2 主要成分為肉桂醛 (≥10%)、 香芹酚(≥5%)、少量甜橙油等。
1.2 試驗動物與設計 采用單因子試驗設計,選取體重相近、健康、32 日齡左右、體重為(693.98±119.57)g 新西蘭肉仔兔48 只,公母各半,隨機分為4 個處理組(分別記為抗生素組、精油1 組、精油2 組、中草藥組),每組6 個重復,每個重復2 只兔。 預試期7 d,正試期28 d。 試驗設計見表1。

表1 試驗設計
1.3 試驗日糧 試驗日糧參照NRC(1977)和de Blas(2008)推薦的家兔營養水平,并結合本地飼料資源配合成全價顆粒料, 基礎日糧組成及營養水平見表2。

表2 基礎日糧組成及營養水平(風干基礎)
1.4 飼養管理 試驗兔集中于同一兔舍飼養,重疊式三層籠養,每籠2 只。試驗期間人工喂料,分早中晚日喂3 次,自由采食和飲水,各處理組衛生條件和管理相同。 試驗前對兔舍進行清洗和嚴格消毒。供試肉兔均進行體內外寄生蟲的驅除和注射兔瘟、兔巴氏桿菌和魏氏梭菌疫苗,按常規程序免疫。
1.5 測定指標與方法
1.5.1 生長性能指標 對試驗兔開食前稱重,為試驗初始重。試驗期間每日準確計量并記錄飼料消耗量,試驗結束時計算平均日采食量(ADFI),在第15天和第29 天早晨空腹稱重, 計算平均日增重(ADG)。 根據ADFI 和ADG 計算料重比(F/G)。
ADFI=耗料重量/試驗天數;
ADG=(末重-初重)/試驗天數;
F/G=耗料重量/增重重量。
1.5.2 腹瀉、 死亡指標 試驗期間每日觀察并記錄試驗兔發病、腹瀉和死亡等情況。測定指標及計算公式如下:
腹瀉指數=糞便評分之和/供試兔總數 (糞便評分標準見表3);

表3 糞便評分標準
腹瀉頻率=∑(腹瀉兔數×兔腹瀉天數)/(試驗兔數×試驗天數)×100%;
死亡率=試驗結束死兔數/試驗開始活兔數。
1.5.3 飼糧養分表觀消化率 飼養試驗結束前6 d,每個組隨機抽取5 只試驗兔單籠飼養,飼喂對應日糧,自由采食,自由飲水。 預試期3 d,正試期3 d。正試期間采用全收糞法收集每只兔每日的全部糞便,記錄試驗兔每日的采食量和排糞量。鮮糞稱重后,取50%作為樣品,并按重量的10%加入10%鹽酸固氮,混勻,4 ℃保存。 連續收集3 d 后,將同只兔的全部糞樣混勻, 于65 ℃烘箱中烘72 h 測定初水分, 粉碎后過1.0 mm 篩,-20 ℃保存待測營養指標。
測定指標:飼料、糞樣的總能(GE)、干物質(DM)、粗纖維(CF)、粗蛋白質(CP)、粗脂肪(EE)、粗灰分(Ash)、鈣(Ca)、磷(P)。
測定方法:總能參照IKA 量熱儀C6000 儀器方法,干物質參照GB/T 6435-2014《飼料中水分的測定》,粗纖維參照GB/T 6434-2006《飼料中粗纖維的含量測定》, 粗蛋白質參照GB/T 6432-1994《飼料中粗蛋白質測定方法》,粗脂肪參照GB/T 6433-2006《飼料中粗脂肪的測定》,粗灰分參照GB/T 6438-2007 《飼料中粗灰分的測定》, 鈣參照GB/T 6436-2002 《飼料中鈣的測定》,磷參照GB/T 6437-2002《飼料中總磷的測定分光光度法》。 飼糧營養物質表觀消化率計算公式如下:
飼糧某營養物質表觀消化率/%=(飼糧進食量×飼糧某營養物質含量-日排糞量×糞便某營養物質含量)/(飼糧進食量×飼糧某營養物質含量)×100。
1.6 統計分析 采用Excel(2010)辦公軟件對數據進行初步整理后, 運用SPSS 17.0 軟件的一般線性模型(GLM)進行單因素方差分析和LSD 法多重比較,并對腹瀉頻率和死亡率指標進行χ2檢驗,以P <0.05 作為差異顯著的判斷標準,以P <0.01 作為差異極顯著的判斷標準, 以0.05≤P <0.10 作為有差異顯著趨勢的判斷標準, 試驗數據采用“平均值±標準差”表示。
2.1 復方中草藥和植物精油替抗對肉仔兔生長性能的影響 由表4 可知,試驗前期(1 ~14 d),各組ADFI、ADG、F/G 無顯著差異 (P >0.05);試驗后期(15 ~28 d)各組ADFI 有顯著差異的趨勢(0.05≤P <0.10), 其中精油2 組ADFI 顯著低于抗生素組(P <0.05),各組ADG、F/G 無顯著差異(P >0.05), 其中中草藥組較抗生素組ADG 提高了5.30%,F/G 降低了1.90%;試驗全期(1 ~28 d)各組ADFI、ADG、F/G 無顯著差異 (P >0.05),其中中草藥組較抗生素組F/G 降低了4.44%。

表4 復方中草藥和植物精油替抗對肉仔兔生長性能的影響
2.2 復方中草藥和植物精油替抗對肉仔兔腹瀉的影響 由表5 可知,試驗前期(1 ~14 d)各組腹瀉指數無顯著差異(P >0.05),腹瀉頻率差異顯著(P <0.05);試驗后期(15 ~28 d)各組腹瀉指數無顯著差異(P >0.05),中草藥組腹瀉指數較抗生素組降低了56.39%,腹瀉頻率有顯著差異的趨勢(0.05≤P <0.10),中草藥組腹瀉頻率較抗生素組降低了55.60%;試驗全期(1 ~28 d)各組腹瀉指數、腹瀉頻率無顯著差異(P >0.05)。

表5 復方中草藥和植物精油替抗對肉仔兔腹瀉指數和腹瀉頻率的影響
2.3 復方中草藥和植物精油替抗對肉仔兔死亡率的影響 由表6 可知,試驗前期(1 ~14 d)各組死亡率無顯著差異(P >0.05),其中精油2 組與抗生素的死亡率相同,均為8.33%;試驗后期(15 ~28 d)各組死亡率無顯著差異(P >0.05),其中抗生素組死亡率為16.67%, 而精油1 組和中草藥組死亡率為0.00%;試驗全期(1 ~28 d)各組死亡率無顯著差異(P >0.05),其中精油1 組與抗生素組的死亡率相同,中草藥組較抗生素組降低了33.32%。

表6 復方中草藥和植物精油替抗對肉仔兔死亡率的影響 %
2.4 復方中草藥和植物精油替抗對肉仔兔養分表觀消化率的影響 由表7 可知, 與抗生素組相比,中草藥組的EE 表觀消化率顯著提高(P <0.05);各組CF 表觀消化率有顯著差異的趨勢(0.05≤P <0.10),其中精油2 組的CF 表觀消化率較抗生素組顯著降低(P <0.05);各組GE、DM、CP、Ash、Ca、P表觀消化率均無顯著差異(P >0.05),其中中草藥組GE 表觀消化率較抗生素組提高了8.78%。

表7 復方中草藥和植物精油替抗對肉仔兔養分表觀消化率的影響 %
3.1 復方中草藥和植物精油替抗對肉仔兔生長性能的影響 中草藥和植物精油通過自身含有的多種生物活性成分, 可增強動物機體免疫功能和抗應激、調節營養物質消化吸收的能力,從而改善飼料利用率,提高生長性能。
前人研究中草藥添加劑對家兔生長性能影響的結果多數顯示存在正面作用,在替代抗生素上有一定可行性,但也有少量研究結果存在差異。 許騰(2013)選用體重相近的30 日齡斷奶獺兔80 只,隨機分為4 組, 日糧分別添加0.1%喹乙醇預混劑和1.0%、1.5%、2.0%中草藥,研究結果表明,添加中草藥添加劑與添加西藥喹乙醇預混劑相比,能提高斷奶獺兔的日增重、降低飼料報酬,以1.5%添加量效果最好。 王多伽(2013)對吉戎獺兔的研究表明,日糧中添加中草藥提取物綠原酸對吉戎兔生長性能的促進作用與抗生素相當,并且隨著飼喂時間的延長,促生長作用更加明顯。 與上述研究結果不盡一致的是,趙泮峰(2011)發現,中草藥添加劑對35 日齡斷奶幼兔試驗前30 d 的平均日增重及料重比影響不顯著,并降低了斷奶幼兔平均日采食量。 王彩先等(2019)選用3 種不同中草藥組方日糧飼喂幼仔兔, 結果發現中草藥I 組和III 組試驗兔平均日增重與對照組差異不顯著, 中草藥II 組試驗兔的平均日增重極顯著低于對照組、 中草藥I 組和III組,說明中草藥組方不同,效果也不盡相同。
目前關于植物精油單獨用于兔上探討生長性能的研究很少,孫海濤等(2019)選用30 日齡新西蘭肉兔120 只, 隨機分為3 組, 分別為空白對照組、100 mg/kg 和200 mg/kg “有機酸+精油組”,結果發現“有機酸+精油”能顯著提高肉兔平均日增重,一定程度降低料重比。 該試驗顯示“有機酸+精油”組合能改善肉兔的生長性能,但未研究精油單獨的應用效果。
本試驗結果顯示, 肉仔兔飼糧中添加復方中草藥和不同植物精油組平均日采食量、 平均日增重、料重比與抗生素組無顯著差異,中草藥組優于2 個精油組,這與前人多數研究結果基本一致,中草藥和植物精油作為抗生素替代品的應用價值得到進一步證實。此外,本試驗條件下中草藥和植物精油在影響動物生長性能上存在的差異, 提示了中草藥和精油中的活性成分組成及含量的不同會密切影響其在動物機體的作用效果。
3.2 復方中草藥和植物精油替抗對肉仔兔腹瀉、死亡率的影響 規模化養兔業的發展導致斷奶仔兔的腹瀉呈上升趨勢,而據報道,在平均20%死亡兔群中,有70%以上系腹瀉病所致(董亞芳,1997),斷奶仔兔腹瀉死亡給生產者帶來嚴重的經濟損失。導致幼兔腹瀉的病原微生物有細菌、病毒、寄生蟲、真菌及其毒素等,它們會影響胃腸結構和功能。 禁抗前生產中多采用抗生素日糧預防腹瀉。
中草藥可激發調動動物機體內在的抗菌因子,增強機體組織器官的抗菌能力來達到抑菌效果(Orban 等,1997), 還可通過活性成分阻斷病毒復制中的核酸合成,起到抑制病毒復制的作用(傅文棟,2006),另外,中草藥中含有的驅蟲活性成分和酶還能驅除畜禽體內的寄生蟲。植物精油含有的酚類、萜類物質具有抗菌作用,可改變細菌細胞膜通透性而使細菌死亡,Gislene 等(2000)發現植物精油比抗生素有更好的抑制抗藥性細菌的效果。另據報道,植物精油還具有抗真菌作用,其機理主要是破壞真菌生命活動中必不可少的巰基 (張高明,2015)。Giannenas 等(2012)發現日糧中添加植物精油后飼喂被球蟲感染的肉雞顯著優于飼喂未添加植物精油的感染組。 因此,中草藥和植物精油在降低仔兔腹瀉死亡上存在重要的研究價值。
已有研究結果表明, 中草藥在一定程度上可改善仔兔的腹瀉死亡狀況, 可達到與抗生素使用效果相當的水平。王慧等(2017)的研究結果顯示,中草藥組和抗生素組斷奶幼兔的腹瀉率分別為6.7%和13.3%, 可見中草藥組斷奶幼兔腹瀉率顯著低于抗生素組, 在死亡率上中草藥組與抗生素組無顯著差異。 王彩仙等(2017)設計3 個不同中草藥組方用于獺仔兔日糧,結果發現中草藥II 組軟糞率顯著高于抗生素組, 中草藥I 組、III 組與抗生素組之間軟糞率差異不顯著; 抗生素組死亡率與各中草藥組之間差異不顯著, 但以中草藥II組最低。孫海濤等(2019)的研究表明,日糧中添加“有機酸+精油” 能降低肉兔的腹瀉率和死淘率;馮志華等(2007)在獺兔日糧中添加牛至油的結果顯示, 牛至油組和抗生素組腹瀉頻率較空白對照組分別降低33.33%和40.67%。 上述結果提示植物精油對家兔的腹瀉死亡有一定正面影響。 本試驗結果顯示, 肉仔兔飼糧中添加復方中草藥和不同植物精油腹瀉指數、 腹瀉頻率和死亡率與抗生素組無顯著差異,中草藥組優于2 個精油組。這與上述研究結果相似, 說明中草藥和植物精油在替代抗生素控制仔兔腹瀉死亡上存在正面作用。
3.3 復方中草藥和植物精油替抗對肉仔兔養分表觀消化率的影響 本試驗條件下, 中草藥組和2 個精油組總能、干物質、粗蛋白質、粗灰分、鈣、磷表觀消化率與抗生素組均無顯著差異, 中草藥組的粗脂肪表觀消化率顯著高于抗生素組, 說明復方中草藥和植物精油替代抗生素在影響肉仔兔對養分的消化吸收上程度不同, 這與前人多數研究報道相似。左曉磊等(2015)發現,中草藥制劑組可提高生長獺兔的粗蛋白質、 粗脂肪等營養物質消化率,與化藥組效果相當。王靜等(2015)分別在斷奶獺兔基礎日糧中添加1%、2%、3%、4%、5%復方中草藥, 結果發現對獺兔粗灰分表觀消化率無顯著影響,而對干物質、粗蛋白質的表觀消化率有顯著影響, 其中2%組干物質和粗蛋白質表觀消化率均顯著高于抗生素組。 馮志華等(2007)在斷奶獺兔日糧中添加牛至油發現, 除粗蛋白質表觀消化率外,干物質、粗纖維表觀消化率均較抗生素組有不同程度的提高。
本試驗條件下, 復方中草藥和植物精油在影響肉仔兔生長性能、腹瀉、死亡率和養分表觀消化率方面均與抗生素效果相當,提示在飼料禁抗后,這兩種添加劑在維持和提高肉兔產業養殖效益上具有重要的應用價值。