桿狀病毒誘導寄主行為研究進展

韋玉珊，李烈馨，李彩朝，馬會會，湯 翠

（1.六盤水市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州六盤水 553001；2.施秉縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州黔東南 556000；3.天柱縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州黔東南 556000）

寄生物通過操控寄主一系列行為變化來促進自己的傳播和擴散。能操控寄主行為的種類很多，常見的寄生物種類范圍廣，小到病毒，大到大型蠕蟲，包括病原真菌、細菌、線蟲和寄生蜂等，被感染的昆蟲會出現(xiàn)體溫上升、取食、繁殖、聚集、防御、趨光和趨地性等有益于寄生物傳播與擴散的行為[1-2]。通過改變寄主昆蟲運動速度、運動方向（包括水平或垂直，通過趨光性或趨向性）等增加其傳播范圍[3-4]。

1 寄生物誘導寄主行為研究進展

1.1 桿狀病毒誘導鱗翅目行為研究

桿狀病毒感染鱗翅目幼蟲后會出現(xiàn)活動能力增強的現(xiàn)象，感染后的幼蟲在死亡前遷移至植物的頂部并液化，以此增加病毒顆粒的釋放，增大病毒的傳播范圍[5]。1943 年舞毒蛾的上爬行為被證明是桿狀病毒所致；1981 年舞毒蛾幼蟲的上爬行為首次被發(fā)現(xiàn)，感染的舞毒蛾幼蟲在死亡前遷移至樹梢，最后倒掛死亡。感染的舞毒蛾幼蟲在死亡前遷移至樹梢，最后倒掛死亡，稱為樹頂病或樹梢病，后期比較統(tǒng)一的叫樹頂病[6-8]。在首次量化桿狀病毒在鱗翅目系統(tǒng)中幼蟲行為，發(fā)現(xiàn)感染甘藍型夜蛾核多角體病毒的甘藍夜蛾幼蟲會爬到植物的頂部和邊緣，使更多的植物表面污染，增加病毒的傳播[5]。Rebolledo 等在辣椒植株上分別放入感染桿狀病毒和未感染的甜菜夜蛾尸體，發(fā)現(xiàn)感染的尸體更容易被發(fā)現(xiàn)，得出桿狀病毒有改善病毒顆粒在植物葉片上的傳播和誘導的攀爬行為增加的結(jié)論[9]，這是該致命病原體傳播的最有效機制。在舞毒蛾核多角體病毒（LdMNPV）誘導舞毒蛾上爬行為中，在感毒后第3 d 出現(xiàn)活動能力增強，而“樹頂病”主要發(fā)生在感毒后第6 d[10]，兩種行為是否具有連續(xù)性未被證明。

1.2 其他寄生物誘導寄主行為研究

黃蜂通過影響美洲蟑螂的中樞神經(jīng)系統(tǒng)，使其出現(xiàn)運動機能衰退的狀態(tài)，以滿足寄生后代的營養(yǎng)需求[11]。研究發(fā)現(xiàn)，蟑螂體內(nèi)的多巴胺受體因為受寄生蜂毒液的影響，調(diào)控多巴胺信號的傳導，從而引起行為的不適[12]。線蟲寄生蟋蟀后，操控其尋找水并以看似自殺的方式跳入水中，為完成線蟲的生命周期需求[13-14]。鄭壽斌等研究不同濃度的東方蜜蜂微孢子蟲對中華蜜蜂行為影響時發(fā)現(xiàn)，感染微孢子蟲的中華蜜蜂對蔗糖溶液更加敏感[15]。寄生真菌感染螞蟻會出現(xiàn)稱之為“僵尸螞蟻”的現(xiàn)象，通過釋放化學物質(zhì)改變和控制寄主行為，使其成為傀儡直至死亡[16]。被蠅蟲霉感染的果蠅同樣出現(xiàn)遠離地面遷移到在植被上部，伸長喙固定位置并同時展開雙翅，以有益于真菌孢子擴散的形態(tài)死亡[17]。螢擬蟲疫霉感染的花螢中也出現(xiàn)相似現(xiàn)象[18]。

2 桿狀病毒誘導鱗翅目幼蟲上爬行為致病機制

桿狀病毒誘導鱗翅目幼蟲的行為變化報道比較常見，但是其中致病機制研究相對較少，主要集中在桿狀病毒egt、ptp基因和外界光照對幼蟲行為的影響上[19-21]。

2.1 egt在桿狀病毒誘導鱗翅目上爬行為中的作用

egt是桿狀病毒體內(nèi)的一種酶，通過轉(zhuǎn)移蛻皮激素化學結(jié)構(gòu)中糖分子而使激素失活，從而影響染毒昆蟲的正常發(fā)育[22]。蛻皮激素失活后，染毒幼蟲不能進入下一個齡期，延長昆蟲感染病毒后的取食時間，增加寄主體重，產(chǎn)生更高產(chǎn)量的病毒粒子[23]。Hoover 研究發(fā)現(xiàn)，感染的野生型（WT）LdMNPV 的幼蟲在較高的位置倒掛死亡，而幼蟲感染被敲除（Δegt）基因的LdMNPV 后死亡位置降低[19]。Alho 等人通過對完整基因組序列的分析表明，除了一些顆粒狀病毒外，幾乎在所有鱗翅目桿狀病毒中都發(fā)現(xiàn)了egt基因[24]。

egt基因是桿狀病毒的拓展表型基因仍存在爭議，Ros 等研究發(fā)現(xiàn)egt在誘導鱗翅目幼蟲的樹梢病中沒有高度保守作用，通過用苜蓿銀紋夜蛾多核型多角體病毒感染寄主，發(fā)現(xiàn)感染該病毒的寄主出現(xiàn)上爬現(xiàn)象，但其在感染敲除egt基因的病毒感染中未出現(xiàn)死亡位置降低的現(xiàn)象[25]。因此，egt是“擴展表型的基因”的結(jié)論不適用于所有桿狀病毒與宿主的相互作用。并推測在某些桿狀病毒宿主系統(tǒng)中，egt對蛻皮相關(guān)上爬行為的間接影響可觀察到egt對樹頂病的影響[1]。在研究家蠶核型多角體病毒的egt基因?qū)倚Q行為調(diào)控影響中，構(gòu)建誘變體并通過精子介導將基因轉(zhuǎn)移到蠶卵中，發(fā)現(xiàn)egt通過影響家蠶的蛻皮來影響蠶的發(fā)育[26]。感染甜菜夜蛾核多角體病毒的幼蟲同樣出現(xiàn)上爬現(xiàn)象，并得出egt通過延長寄主的死亡時間間接促進了上爬行為[3,27]。Zhang 等研 究發(fā)現(xiàn)miR-8 和miR-429 通過下調(diào)BrZ2 的表達參與20E 和JH 調(diào)控棉鈴蟲核多角體病毒誘導的棉鈴蟲的上爬行為[28]。

2.2 ptp在桿狀病毒誘導鱗翅目上爬行為中的作用

蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP）是細胞信號轉(zhuǎn)導的重要酶，如在MAP 激酶通路中[29]，是細胞周期調(diào)控的關(guān)鍵元件，在控制細胞生長、繁殖、分化、轉(zhuǎn)化及免疫等多個方面有著重要作用，被認為是信號轉(zhuǎn)導通路中的重要組成部分[20,24]。2005 年Kamita 等研究證明家蠶核多角體病毒（BmNPV）的蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP）的編碼基因ptp，是引起感染幼蟲過度活躍的基因[30]。Van Houte等通過基因敲除構(gòu)建誘變體，在感染苜蓿銀紋夜蛾多核型多角體病毒的三齡夜蛾幼蟲中也觀察到過度活躍現(xiàn)象，且需要PTP 磷酸酶活性，說明AcMNPV 的ptp基因在該系統(tǒng)的過度活躍誘導中起關(guān)鍵作用[3]。Katsuma 等通過顯示ptp基因的PTP 產(chǎn)物與桿狀病毒ORF1629 作為病毒體結(jié)構(gòu)蛋白締合，意外發(fā)現(xiàn)過度活躍不需要PTP 相關(guān)的磷酸酶活性，并取得桿狀病毒使用宿主來源的磷酸酶為活躍運動建立足夠的感染，作為病毒體相關(guān)的結(jié)構(gòu)蛋白而不是酶的結(jié)論[31]。為證明PTP 蛋白如何誘導過度活躍，通過表征了兩個新的BmNPV 突變體，表達無酶活性的PTP 蛋白，證實在感染BmNPV 的家蠶幼蟲中活躍運動誘導不需要PTP 的磷酸酶活性，而主要與PTP 蛋白結(jié)構(gòu)的完整性有關(guān)。進一步研究發(fā)現(xiàn)，PTP是一種與BV囊膜相關(guān)的蛋白，主要位于BV 囊膜上，ptp的缺失導致BV的結(jié)構(gòu)出現(xiàn)異常，而這種異常的BV 能夠減弱病毒的感染和復制能力[32-33]。在前人的研究中，得出桿狀病毒是第一種被鑒定為具有“拓展表型基因”的說法[3]。荷蘭瓦赫寧根大學學者通過田間試驗首次報道棉鈴蟲感染HaSNPV 后上爬行為，并發(fā)現(xiàn)插入蝎毒基因重組HaSNPV 感染棉鈴蟲幼蟲與感染野生型病毒幼蟲相比，其死亡高度明顯降低[1,34]。

2.3 光照在桿狀病毒誘導鱗翅目幼蟲上爬行為中的作用

光照在桿狀病毒誘導的鱗翅目幼蟲的上爬行為中起著重要的作用[21]。Yue 等人研究發(fā)現(xiàn)，SeMNPV 感染三齡甜菜夜蛾幼蟲后43～50 h，需要從上方發(fā)出光來誘發(fā)樹頂病，在此期間上方未暴露光線的受感染幼蟲最終在低位死亡，說明樹頂病需要在特點時間內(nèi)給予光照進行誘發(fā)[27]。舞毒蛾3 齡幼蟲感染LdMNPV 后3 d，會出現(xiàn)活動增強，并持續(xù)到第6 d[21]。同時發(fā)現(xiàn)不同波長的光照處理感染LdMNPV 的舞毒蛾幼蟲后，感染病毒的幼蟲只對從頂部照射的光有反應，其中對藍光的反應最為強烈，波長縮短至短波紫外光（UVB）時，沒有任何誘導行為，說明藍光可能是誘導樹頂病的主要光源[10]。

2.4 桿狀病毒誘導舞毒蛾上爬行為機制

舞毒蛾隸屬于鱗翅目毒蛾科毒蛾屬，其具有分布廣、食性雜等特點，可取食500 多種寄主植物，特別是楊樹、橡樹和樺樹等。舞毒蛾幼蟲以取食葉片為主[35]，幼蟲數(shù)量大時，樹葉很快會被吃光，2～3 年內(nèi)樹木就會死亡，是一種世界性森林食葉害蟲[36-37]。舞毒蛾感染舞毒蛾核多角體病毒后會出現(xiàn)上爬現(xiàn)象，其具體的侵染過程在Wang 和Hu 綜述中有講述，但其具體的上爬機制還在進一步研究中[38]。在實驗室團隊的研究中發(fā)現(xiàn)，酪氨酸代謝通路、多巴胺通路和PI3K/AKT 信號通路在病毒操控宿主行為變化方面可能發(fā)揮作用，這些研究發(fā)現(xiàn)為最終完全闡明“樹頂病”的形成提供了重要的科學依據(jù)[39-41]。

3 展望

神經(jīng)系統(tǒng)是重要的調(diào)節(jié)系統(tǒng)，調(diào)節(jié)神經(jīng)回路，賦予動物在復雜多變的世界中生存所需的行為靈動性，為寄生物提供操控宿主行為的潛在機制[11,16,42]。Bhattarai 等人通過轉(zhuǎn)錄組分析，發(fā)現(xiàn)所有在神經(jīng)活性配體-受體相互作用中的差異表達基因主要有絲氨酸蛋白酶，這一發(fā)現(xiàn)為研究桿狀病毒誘導鱗翅目幼蟲行為調(diào)控提供新線索[21]。研究表明，寄生蜂通過誘導寄主增加其血淋巴中章魚胺濃度來抑制宿主取食，也有通過影響宿主的5-羥色胺來改變宿主行為[11,42]；Fredericksen等在研究真菌調(diào)控螞蟻行為時發(fā)現(xiàn)，真菌細胞侵入宿主的肌肉纖維，并以之結(jié)合形成環(huán)繞肌肉的網(wǎng)絡(luò)，促進宿主的操縱[43]；線蟲寄生蟋蟀后，在其體內(nèi)產(chǎn)生相似的寄主蛋白，使得體內(nèi)相關(guān)蛋白的過量表達，直接影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育，蟋蟀對環(huán)境的分析受到干擾，出現(xiàn)以自殺的方式跳入水中[14]。以上結(jié)果均表明，神經(jīng)調(diào)節(jié)在昆蟲行為中有著重要的作用。桿狀病毒與非病毒性寄生蟲相比，具有基因組較小的特點，可借助現(xiàn)有的產(chǎn)生突變體的技術(shù)，作為揭示寄生改變宿主行為分子機制的極好工具，為更好的行為調(diào)控研究提供理論依據(jù)。