感染性疾病早產兒血清25-(OH)D3、IL-12、HNL水平變化及其臨床意義

程巧林，王丹虹，盧田甜，劉敏

海口市人民醫院(中南大學湘雅醫學院附屬海口醫院)兒科，海南 海口 570208

早產是新生兒感染和生長障礙的主要危險因素之一[1]。出生后感染是新生兒最常見的嚴重并發癥，由于其組織器官發育尚不成熟，免疫功能不完善，防御功能差，極易受到病原體的侵襲，從而發生感染性疾病，具有較高的發病率和死亡率。臨床上通過血液樣本查找早產兒感染的原因一般需要培養24～48 h，時間較長，給臨床診斷和治療造成困難，易增加其死亡的風險[2]。因此需要尋找可以預測感染性疾病早產兒的生物標志物，以便盡早干預。25-羥基維生素D3[25-(OH)D3]是維生素D 的活性成分，參與機體的免疫調節，通過分泌抗病毒肽增加先天免疫，從而改善黏膜防御。研究發現低水平血清25-(OH)D3與急性呼吸道感染等疾病有關[3]。白介素(IL)-12 是一種固有的免疫炎癥細胞因子，在控制細胞內細菌感染中起著重要作用[4]；中性粒細胞載脂蛋白(HNL)是一種儲存在中性粒細胞次級顆粒中并由其釋放的蛋白質，當機體受到細菌感染時，水平明顯上升[5]。目前關于三者與感染性疾病早產兒的研究尚少。本研究通過探討血清25-(OH)D3、IL-12 和HNL 水平對感染性疾病早產兒的預測價值，以期為臨床診治提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015 年1 月至2020 年12月海口市人民醫院診治的226例感染性疾病早產兒作為感染組。納入標準：患兒出生胎齡＜37周，且符合中華醫學會婦產科學分會產科學組制定的《早產臨床診斷與治療指南(2014)》[6]中的診斷標準；出生3 d 內發生感染性疾病，且符合《實用新生兒學》[7]中診斷標準；單胎妊娠；CRP＞8 mg/L；白細胞異常升高；血培養陽性；患兒和產婦的臨床資料均完整無誤。排除標準：伴有嚴重先天性畸形的患兒；伴有先天性或代謝性疾病的患兒；伴有嚴重疾病，出生72 h內死亡者；產婦所患疾病或孕期服用藥物影響早產兒維生素D 水平者；產婦服用藥物影響炎性因子水平者。根據新生兒感染情況將早產兒分為重度感染組(敗血癥、感染性休克)117例和輕度感染組(其他感染)109例。選取同期80 例未發生感染的早產兒作為對照組。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 資料收集 收集所有早產兒和產婦的基本資料，包括性別、胎齡、出生體質量、身長、產婦年齡、分娩方式、妊娠次數、妊娠期糖尿病、妊娠期高血壓等情況。

1.2.2 實驗室檢測 采集早產兒出生24 h內空腹靜脈血2 mL，以3 500 r/min 速度離心10 min，吸取血清，應用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清25-(OH)D3、IL-12和HNL水平。

1.3 統計學方法 應用SPSS23.0 統計學軟件分析數據。正態分布計量資料以均數±標準差(±s)表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗；非正態分布計量資料采用四分位間距[M(P25，P75)]表示，組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗；計數資料組間比較采用χ2表示；應用受試者工作特征曲線(ROC)分析血清25-(OH)D3、IL-12 和HNL 水平對感染性疾病早產兒的預測價值。檢驗水準a=0.05，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組早產兒和產婦的基本資料比較 兩組早產兒的性別、胎齡、出生體質量、出生體長和產婦年齡、妊娠糖尿病、妊娠高血壓、妊娠次數、分娩方式等資料比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，見表1。

表1 兩組早產兒和產婦的基本資料比較(±s，例)Table 1 Comparison of basic data of preterm infants and delivery woman(±s,n)

表1 兩組早產兒和產婦的基本資料比較(±s，例)Table 1 Comparison of basic data of preterm infants and delivery woman(±s,n)

指標感染組(n=226)對照組(n=80)t/χ2值P值男/女(例)胎齡(周)出生體質量(g)出生體長(cm)產婦年齡(歲)妊娠糖尿病妊娠高血壓妊娠次數分娩方式自然分娩剖宮產107/119 33.58±2.08 1 730.51±333.97 41.84±4.18 30.39±6.01 13(5.75)10(4.42)2.00±0.84 35/45 33.49±2.13 1 743.34±340.75 42.39±4.34 30.60±6.28 5(6.25)3(3.75)1.98±0.81 0.307 0.322 0.294 1.015 0.266 0.026 0.066 0.272 0.084 0.579 0.748 0.769 0.311 0.790 0.871 0.797 0.786 0.772 160(70.80)66(29.20)58(72.50)22(27.50)

2.2 感染組和對照組早產兒的血清25-(OH)D3、IL-12 和HNL 水平比較 感染組早產兒的血清25-(OH)D3水平明顯低于對照組，而血清IL-12 和HNL 水平明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

表2 感染組和對照組早產兒的血清25-(OH)-D3、IL-12和HNL水平比較[±s，M(P25，P75)]Table 2 Comparison on serum 25-(OH)-D3，IL-12,and HNLlevels between infection group and control group[±s,M(P25，P75)]

表2 感染組和對照組早產兒的血清25-(OH)-D3、IL-12和HNL水平比較[±s，M(P25，P75)]Table 2 Comparison on serum 25-(OH)-D3，IL-12,and HNLlevels between infection group and control group[±s,M(P25，P75)]

組別感染組對照組t/Z值P值例數226 80 25-(OH)D3(nmol/L)11.74±2.56 17.78±5.65 9.240 0.001 IL-12(ng/L)197.95(123.18，254.83)66.18(40.76，93.34)10.029 0.001 HNL(ng/mL)160.17(111.06，194.35)54.75(38.39，72.17)9.666 0.001

2.3 不同病情程度患者的血清25-(OH)D3、IL-12和HNL 水平比較 輕度感染組血清25-(OH)D3水平明顯高于重度感染組，而血清IL-12 和HNL水平明顯低于重度感染組，差異均有統計學意義(P＜0.01)，見表3。

表3 不同病情程度患者的血清25-(OH)D3、IL-12和HNL水平比較[±s，M(P25，P75)]Table 3 Comparison of serum 25-(OH)D3,IL-12,and HNL levels among patients with different disease degrees[±s,M(P25，P75)]

組別輕度感染組重度感染組t/Z值P值例數109 117 25-(OH)D3(nmol/L)10.53±2.38 13.04±2.08 8.387 0.001 IL-12(ng/L)230.15(167.45，283.29)172.83(104.59，230.17)5.156 0.001 HNL(ng/mL)175.85(135.83，225.73)130.43(84.37，174.66)5.969 0.001

2.4 血清25-(OH)D3、IL-12 和HNL 對感染性疾病早產兒的預測價值 經ROC 分析結果顯示，血清25-(OH)-D3、IL-12 和HNL 水平預測感染性疾病早產兒曲線下面積分別為0.839、0.877、0.864，當截斷值為14.76 nmol/L、112.81 ng/L、89.56 ng/mL 時，具有較高的靈敏度和特異度；三者聯合應用價值優于單獨應用(P＜0.01)，見表4和圖1。

圖1 血清25-(OH)D3、IL-12 和HNL 對感染性疾病早產兒的預測價值ROC曲線Figure 1 Predictive value of serum 25-(OH)D3, IL-12, and HNL for premature infants with infections diseases

表4 血清25-(OH)D3、IL-12和HNL對感染性疾病早產兒的預測價值Table 4 Predictive value of serum 25-(OH)D3,IL-12,HNL in premature infants with infectious diseases

3 討論

早產兒由于其獨特的免疫功能，易發生感染風險，是死亡的重要原因。早產兒發生感染性疾病后，通常會伴有終身神經發育功能障礙，易給患兒造成嚴重的身體傷害，同時增加醫療經濟負擔[8]。雖然醫療技術不斷發展，但感染性疾病早產兒的發病率仍呈逐年上升的趨勢，而且目前尚無有效的手段降低感染性疾病早產兒的發生率。因此需盡早發現感染性疾病早產兒，以便及時干預，改善不良后果。

25-(OH)D3是人體必須的維生素，參與機體免疫應答和炎癥反應，能夠與單核-巨噬細胞中的維生素D受體結合，具有破壞病原體、預防感染的作用；另外25-(OH)D3還能通過下調單核細胞表面TOLL 樣受體(TLR)的表達，抑制細胞因子的產生，減緩感染后的炎癥反應[9-10]。研究表明，血清25-(OHD3水平與感染性疾病發生風險密切相關，25-(OH)D3水平越低，感染的風險越高[11]。Hong 等[12]研究發現，新生兒通過補充維生素D，呼吸道感染的發生率呈下降趨勢，提示25-(OH)D3具有預防呼吸道感染的作用。李淑妮等[13]選取120例新生兒醫院感染研究，結果發現新生兒醫院感染血清25-(OH)D3水平低于健康新生兒，而且其水平與病情嚴重程度呈負相關，表明25-(OH)D3水平越低，病情越嚴重。本研究發現感染組早產兒的血清25-(OH)D3水平較對照組明顯降低，輕度感染早產兒的血清25-(OH)D3水平明顯高于重度感染者，差異均有統計學意義(P＜0.05)，表明早產兒維生素D 水平與感染性疾病發生和病情密切相關。究其原因，可能是由于機體25-(OH)D3水平降低，T 淋巴細胞水平和巨噬細胞吞噬能力降低，致使機體防御病原體感染的能力減弱，增加感染風險，而且隨著水平降低炎性因子合成釋放增加，從而加重病情[14]。

IL-12 作為促炎細胞因子，可促進T 輔助細胞1(Th1)和T濾泡輔助細胞分化，在機體抗感染和免疫細胞增殖分化中發揮重要作用[15]。IL-12 能夠產生干擾素γ，刺激Th1 反應并激活巨噬細胞，活化的巨噬細胞能夠殺死細胞內的細菌從而消除感染[16]。徐露璐[17]等回顧性分析82 例新生兒感染性疾病，發現患兒血清IL-12 水平較健康新生兒明顯上升，提示機體感染后IL-12 水平可能升高。本研究發現，感染組早產兒的血清IL-12 水平較對照組明顯上升，輕度感染早產兒血清IL-12 水平明顯低于重度感染者，差異均有統計學意義(P＜0.05)，提示血清IL-12 水平與早產兒感染性疾病發生及病情密切相關。究其原因，可能是由于機體受到感染后，通過激活絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)和核因子(NF)-κB 信號通路刺激樹突狀細胞發揮免疫反應，促使IL-12 水平高表達；同時IL-12 誘導巨噬細胞，激活氧化應激反應，加重炎癥反應，加重病情進展[18]。

HNL屬于載脂蛋白超家族成員，主要由上皮細胞和中性粒細胞分泌[19]。研究發現，健康新生兒出生時HNL水平與其出生后3～5 d和健康成年人水平基本一致，且不易受其他因素影響波動，可作為新生兒細菌感染的標志物[20]。本研究發現，感染組早產兒血清HNL水平較對照組明顯上升，輕度感染早產兒的血清HNL水平明顯低于重度感染者，差異均具有統計學意義(P＜0.05)，提示血清HNL 水平與早產兒感染性疾病發生和病情密切相關。究其原因，可能是由于當機體受到感染后，機體免疫反應被激活，釋放大量中性粒細胞包裹、吞噬病原體，進而釋放HNL，使其水平顯著升高，增加病情[21]。經ROC 曲線分析結果顯示，血清25-(OH)D3、IL-12 和HNL 水平分別為14.76 nmol/L、112.81 ng/L、89.56 ng/mL 時，其預測感染性疾病早產兒具有較高的靈敏度和特異度，但三者聯合應用的價值高于單獨應用。

綜上所述，感染性疾病早產兒血清25-(OH)D3水平下降、IL-12 和HNL水平升高，與病情密切相關，可作為預測感染性疾病早產兒的生物標志物。但是本研究由于樣本量小，尚未對感染性疾病早產兒感染類型進一步分析，存在一定的不足，需要日后加大樣本量，深入分析血清25-(OH)D3、IL-12 和HNL水平對感染性疾病早產兒的應用價值。