高爾基體蛋白73在非酒精性脂肪性肝病中的應用價值*

陳騰千，姜麗華，張生君，蔣義貴，羅 佳，胡永敏，尤麗財

福建醫科大學附屬三明第一醫院消化內科，福建 三明 365000

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是無明確肝損害因素，以肝脂肪變性且可纖維化進展的代謝應激性肝病。近年來，隨著現代化的飲食結構及工作生活方式的改變，NAFLD發病率在我國逐年上升，且趨于年輕化，引起嚴重的健康問題。NAFLD在過去很長的一段時間被認為是可以逆轉的，但目前研究發現，單純性脂肪肝、脂肪肝炎等NAFLD早期可逆性病變可隨診疾病逐漸纖維化進展至肝硬化直至原發性肝癌［1］。目前，國內外常用超聲、CT 及肝臟穿刺活檢等診斷NAFLD。但超聲或CT 對早期的NAFLD診斷率較低，且受檢查者的水平影響較大，而肝臟穿刺活檢存在穿刺相關并發癥，患者較難接受，這種診斷方法存在局限性，當前著重于尋找一種安全有效的診斷方法。高爾基體蛋白73（GP73）是一種跨膜蛋白。近年來有研究［2-3］發現，GP73 在多種肝臟慢性疾病中出現明顯升高，且與損傷程度存在關聯，目前在診斷慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌等慢性肝臟疾病的應用價值得到廣泛的認可，但GP73 在NAFLD 診斷中的應用研究資料較少。本研究通過檢測NAFLD 患者及正常人群中的GP73，觀察GP73是否與NAFLD存在關聯，為GP73在NAFLD中的診斷提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年1 月—8 月在福建醫科大學附屬三明第一醫院消化內科住院患者進行NAFLD 診斷標準及排除條件評估后入選的430 例患者作為研究對象，其中對照組280例（無脂肪肝患者），研究組150 例（NAFLD 患者）。研究組依據彩超脂肪程度分為中重度組（28例）和輕度組（122例）。對照組：男137例，女143例；年齡19～70歲，平均年齡（50.2±11.8）歲。研究組：男76 例，女74 例；年齡20～69 歲，平均年齡（50.4±11.2）歲。納入標準：根據《非酒精例性脂肪性肝病診療指南》［6］的NAFLD 診斷標準。（1）無明確脂肪肝病因。（2）無過量飲酒史（折合酒精量男性少于30 g/d，女性少于20 g/d）。（3）存在易患因素如女性及代謝相關性疾病（2 型糖尿病、體重超標等）。（4）可有轉氨酶升高，且升高以谷丙轉氨酶為主，可伴尿酸、r-谷氨酰轉移酶和鐵蛋白等升高。（5）影像學檢查符合NAFLD 表現。排除標準：（1）存在重要臟器功能不全者。（2）年齡＞70周歲或＜18周歲。（3）有肝惡性腫瘤及全身其他惡性腫瘤、巨大肝囊腫或肝血管瘤等良性病變、肝葉手術切除。（4）有膽道梗阻或感染、全身其他嚴重感染。（5）哺乳或妊娠期。患者對本研究知情同意并簽署同意書，經過醫院倫理委員會審批通過。兩組患者一般資料具有可比性（P＞0.05）。

1.2 方法

觀察項目：比較對照組和研究組及輕度組和中重度組的BMI 和血清GP73、甘油三酯、膽固醇、空腹血糖水平及各組合并2 型糖尿病例數的差異。標本采集：采用真空白管收集研究對象靜脈血，1 h 內運用離心機離心出血清，當天完成檢測。檢測方法：采用ROCHE P800 全自動生化分析儀及試劑測定血清甘油三酯、膽固醇、空腹血糖水平；采用酶聯免疫吸附實驗（ELISA）法測定血清GP73水平。上海佰曄生物科技中心提供GP73 試劑盒，根據步驟檢測GP73。

1.3 統計學方法

采用SPSS 19.0 統計軟件進行數據處理及統計分析。計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗。計數資料以例數和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 研究組和對照組患者BMI、血清GP73、甘油三酯、膽固醇、空腹血糖水平情況

研究組患者BMI、血清GP73、甘油三酯、膽固醇、空腹血糖水平高于對照組患者，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 研究組和對照組患者BMI、血清GP73、甘油三酯、膽固醇、空腹血糖水平情況（±s）

表1 研究組和對照組患者BMI、血清GP73、甘油三酯、膽固醇、空腹血糖水平情況（±s）

組別對照組（n=280）研究組（n=150）t值P值BMI（kg/m2）21.94±2.56 25.58±2.83 13.506＜0.05血清GP73（ng/mL）35.91±23.22 69.17±41.66 9.053＜0.05甘油三酯（mmol/L）1.30±0.76 2.03±1.42 5.860＜0.05膽固醇（mmol/L）4.48±0.95 4.76±1.00 2.872＜0.05空腹血糖（mmol/L）5.12±1.44 5.78±1.83 3.839＜0.05

2.2 輕度組和中重度組患者的BMI、血清GP73、甘油三酯、膽固醇、空腹血糖水平情況

輕度組和中重度組患者比較，中重度組的患者血清GP73 水平明顯高于輕度組患者，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 輕度組和中重度組患者的BMI、血清GP73、甘油三酯、膽固醇、空腹血糖水平情況（±s）

表2 輕度組和中重度組患者的BMI、血清GP73、甘油三酯、膽固醇、空腹血糖水平情況（±s）

組別輕度組（n=122）中重度組（n=28）t值P值BMI（kg/m2）25.59±2.79 25.53±3.05 0.106＞0.05血清GP73（ng/mL）57.30±30.15 120.89±45.76 9.046＜0.05甘油三酯（mmol/L）1.93±1.34 2.46±1.65 1.789＞0.05膽固醇（mmol/L）4.73±1.01 4.92±0.94 0.919＞0.05空腹血糖（mmol/L）5.65±1.49 6.32±2.85 1.196＞0.05

2.3 研究組和對照組患者2型糖尿病病例數情況

研究組合并2 型糖尿病病例數較對照組明顯增加，差異有統計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 研究組和對照組患者2型糖尿病病例數情況 例（%）

2.4 輕度組和中重度組患者2型糖尿病病例數情況

輕度組和中重度組患者合并2 型糖尿病病例數比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表4。

表4 輕度組和中重度組患者2型糖尿病病例數情況 例（%）

3 討論

NAFLD是無明顯肝損害病因（包括酒精、病毒、藥物等），肝細胞脂肪變性超過5%的一類疾病。近年來，NAFLD的發病率在全球逐年上升且趨于年輕化，尤其在我國，已經取代病毒性肝炎成為危害人民健康的第一大慢性肝?。?］。近期研究發現，NAFLD 常合并心腦血管疾病、代謝性腎病、甲狀腺功能障礙、2 型糖尿病、肥胖、骨質疏松癥、脂肪代謝紊亂等代謝相關性疾?。?-9］，故2020 年國際專家組建議改名為代謝相關脂肪性肝病。隨著研究的深入，當前有許多證據發現NAFLD 的肝外并發癥的危害遠超肝臟本身疾病，其中NAFLD 患者死亡的第一病因是心腦血管疾病，其包括動脈粥樣硬化性血脂異常、肥胖、高血壓、胰島素抵抗、高尿酸血癥、促凝血因素、炎性細胞因子等危險因素［10-12］；另一個重要病因是2 型糖尿?。?3］，因胰島素抵抗可以加劇肝細胞脂肪變性［14］，促進肝纖維化及肝硬化的持續進展，并可增加胰島素樣生長因子表達而抑制細胞凋亡、刺激細胞增殖使肝細胞癌變風險增加。

NAFLD可隨著肝纖維化進展由早期可逆性病變（脂肪肝、脂肪性肝炎）逐漸進展至晚期不可逆的狀態（肝硬化、肝癌）。因此，對于NAFLD 早期診斷評估對于疾病的預后進展，避免肝硬化及肝癌的發生具有重要的臨床價值。目前NAFLD 診斷主要依靠超聲或CT、肝臟穿刺活檢等檢查，但各自都存在局限性。超聲和CT 是臨床最常應用的無創性檢查技術，可以明確脂肪浸潤的程度，但無法準確判斷肝纖維化的程度，尤其是早期纖維化容易漏診，且診為肝惡性腫瘤的誤診率升高［15］。肝臟穿刺活檢雖然目前在肝臟疾病診斷中普及，為NAFLD 診斷提供最有利的病理診斷依據，但屬于有創的檢查，存在檢查相關并發癥，且可能因標本量少需多次穿刺活檢，較多患者不愿接受，依從性差［16］。因此，當前許多脂肪肝領域專家均致力尋找一種血清標志物作為肝纖維化的有效診斷方法。

GP73 是在2000 年由美國學者Kladney 等［17］在對急性成人巨細胞肝炎患者研究中在第9 號人染色體發現的一個具有401個氨基酸的跨膜糖蛋白。早期研究發現，GP73在人體的多種組織細胞中存在表達，但高表達主要存在于上皮細胞，且各組織差異巨大。有研究［18-20］發現，GP73 在正常肝組織肝細胞內不表達，當肝組織發生自身免疫性肝炎、酒精性肝病、慢性乙型病毒性肝炎、肝癌等肝臟疾病時，GP73 水平出現明顯升高。有研究［21-23］發現，隨著肝纖維化的進展，GP73 在肝組織中表達增強，血清GP73 水平亦升高，故GP73 可以用于評估肝纖維化、肝硬化的程度及進展。同時，豐江岳等［22］最新研究發現，GP73 高表現可引起細胞代謝活動有關的信號通路紊亂，可能誘發NAFLD、糖尿病等疾病。本研究結果發現，與正常人群比較，GP73 水平在NAFLD 患者明顯升高，且中重度NAFLD患者較輕度NAFLD 患者升高明顯。同時研究還發現，NAFLD患者BMI和血清甘油三酯、膽固醇、空腹血糖水平及合并2 型糖尿病例數較正常人群明顯升高，進一步證實了2型糖尿病、體重超標、高血脂是NAFLD發病的高危因素。

綜上所述，2 型糖尿病、體重超標、高血脂是NAFLD發病的高危因素。GP73 在NAFLD 患者中明顯高于無脂肪肝正常人群，且與脂肪肝嚴重程度有關，對NAFLD 的診斷及評估病情進展具有臨床應用價值。