血液形態(tài)學分析系統(tǒng)在異型淋巴檢驗中的應用探討*

蔡科威，朱圣輝，梁敬姣，楊鵬

（寧波舜宇儀器有限公司，浙江 寧波 315400 ）

在現(xiàn)代臨床檢驗過程中，血常規(guī)檢驗是疾病篩選的重要手段之一。目前醫(yī)院中對于血常規(guī)的檢驗主要是通過血球儀結合形態(tài)學鏡檢的方式進行［1］，血球儀簡單快捷，在常規(guī)檢查中具有明顯優(yōu)勢。但由于無法直觀看到細胞，導致在一些異常細胞檢查中往往作用有限。形態(tài)學鏡檢一直是第一金標準［2］，但是其效率低下，一些落后地區(qū)甚至不鏡檢和沒能力鏡檢。現(xiàn)在越來越多血液形態(tài)學分析設備和血球儀聯(lián)合應用，兩者互補，減少人力同時，增加了診斷準確率［3-4］。

血常規(guī)白細胞檢查中對于異常細胞檢查不容忽視，異型淋巴作為外周血鏡檢時異常細胞的一種，其異常的出現(xiàn)主要由病毒感染導致，是一種形態(tài)變化的非典型性淋巴細胞。其在外周血中檢出往往提示有單核細胞增多癥［5］，淋巴細胞增值性疾病，病毒感染等，尤其在小兒多見［6］。但由于血球儀方法學的局限性［7］，血球儀并不能完全提示異型淋巴細胞的存在。加上異型淋巴的三種表現(xiàn)型形態(tài)學上與其他細胞較相近，導致實際工作中的檢驗難度相比其他常見白細胞類型較大。本文對比血液形態(tài)學分析系統(tǒng)和血球儀掃描結果，以人工鏡檢為檢驗標準，探討血液形態(tài)學分析系統(tǒng)在對異型淋巴的檢出上的應用價值。

1 資料與方法

1.1 測試對象與人員

選取2022 年6 月至9 月寧波市第一醫(yī)院收治疑似存在病毒感染的患者96 例，男54 例，女42例。年齡5 個月至75 歲。由兩名具有血液形態(tài)學檢驗經(jīng)驗的檢驗師進行檢測分析。

1.2 儀器與試劑

中國寧波舜宇儀器有限公司生產(chǎn)血液形態(tài)學分析系統(tǒng)AMS-200；中國寧波舜宇儀器有限公司生產(chǎn)RX50 光學顯微鏡；日本希森美康血球儀XN-9000。

寧波舜宇儀器有限公司生產(chǎn)顯微鏡專用鏡油，中國珠海貝索生物技術有限公司瑞氏吉姆薩染色液。

1.3 方法

1.3.1 樣本準備和人工鏡檢 對96 例測試對象抽取靜脈血，用EDTA 抗凝。對每例樣本推制成厚薄均勻的血涂片2 張，晾干后用瑞氏吉姆薩染液進行染色。待干燥后分別由兩名檢驗師計數(shù)100個白細胞中的異型淋巴所占比例，形態(tài)學判斷按照全國臨床檢驗操作規(guī)程［8］進行，結果統(tǒng)計平均數(shù)。國際陽性鏡檢標準中提出［9］，正常人可能存在少量反應性淋巴，需以數(shù)量≥5%為異型淋巴檢測陽性。

1.3.2 血球儀組 血球儀通過半導體激光流式細胞技術以及鞘液電阻抗法對血液中的血細胞進行綜合分析［10］，并輸出相關白細胞分類和白細胞散點圖等有關信息。結果以設備檢測提示異型淋巴異常為檢測陽性。

1.3.3 血液形態(tài)學分析系統(tǒng)組 血液形態(tài)學分析系統(tǒng)總體由三部分組成。第一部分為上料模塊用于標本的放置與運輸，最多同時可以放置200 例標本；第二部分為掃描拍照模塊，標本運輸至此模塊后將會在高倍鏡下完成對焦、掃描、細胞圖像分割以及數(shù)字化圖像儲存；第三部分為軟件分析及閱片模塊，基于神經(jīng)網(wǎng)絡結構重參數(shù)化技術，將訓練階段的多分支網(wǎng)絡結構轉(zhuǎn)換為單路結構，在保持多分支網(wǎng)絡高性能優(yōu)勢的同時，加快分析速度最終在電腦顯示器上顯示最終分類完畢的100個白細胞，操作者對異型淋巴細胞的分類結果進行審核和修改工作。以找到5 個及以上異型淋巴為檢測陽性。

1.3.4 對比指標 對比血液形態(tài)學分析系統(tǒng)和血球儀在異型淋巴細胞上的陽性檢出率。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 17.0 統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行分析。計量資料以均數(shù)±標準差（）表示，兩組配對比較采用t檢驗；計數(shù)資料以百分率（%）表示，比較用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

在96 例樣本中人工鏡檢確認異型淋巴陽性標本數(shù)量為53 例，在陽性標本檢測中血液形態(tài)學分析系統(tǒng)組診斷陽性數(shù)量50 例，血球儀組診斷陽性數(shù)量41 例，見表1。人工鏡檢與血液形態(tài)學分析系統(tǒng)比較，差異無統(tǒng)計學意義（P=0.083＞0.05），而人工鏡檢與血球儀比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表2。

表1 各組別異型淋巴的檢出情況（例）

表2 統(tǒng)計學分析差異比較結果

3 討論

從異型淋巴和其他細胞的圖像對比中不難發(fā)現(xiàn)，異型淋巴在其外觀和大小上與其他細胞差距不大，部分表現(xiàn)極其相似，這使得血球儀在分析該部分數(shù)據(jù)時可能造成錯誤判斷。而形態(tài)學的分析作為判斷的標準，該檢查方式一直是最為普遍接受的方式。形態(tài)學結合圖像分析的方式從最早的簡單圖像搜索加上少數(shù)細胞分類［11］到現(xiàn)在利用神經(jīng)網(wǎng)絡技術進行幾十種細胞識別，其在判斷的準確性上一直有較好的表現(xiàn)。但針對于異型淋巴此類在形態(tài)學分析上存在一定判斷難度的細胞類別，其準確性上需要進一步的探究。

異型淋巴細胞根據(jù)其形態(tài)學上的差異主要分三種類型，即漿細胞型，單核型以及幼稚型。異型淋巴是特殊類型白細胞，常規(guī)檢驗中操作者先通過血球儀的分類計數(shù)和散點圖的提示來懷疑是否存在異型淋巴，最終通過顯微鏡下實際觀察和計數(shù)完成確認工作。陳夢蕊［12］和王曉鷗等［13］對市面上的一些血球儀的異型淋巴檢查情況進行研究，發(fā)現(xiàn)血球儀不能完全檢查出異型淋巴數(shù)量異常的患者，在異型淋巴數(shù)目＜10%，且白細胞散點圖提示不明顯的情況下，可能存在漏檢風險。這是因為散點圖的表現(xiàn)方式并不能直觀的體現(xiàn)該類細胞是否有檢出，加上本身數(shù)量如果較少更是增加了檢出難度。此外異型淋巴無論大小還是外觀與其他類別細胞存在較多相似之處（見圖1），即使進行了鏡檢，一些缺少經(jīng)驗的醫(yī)生并不能很敏銳的進行準確判斷。

圖1 相似細胞舉例

血液形態(tài)學分析系統(tǒng)從形態(tài)學出發(fā)，通過模擬人工鏡檢的方式并對結果進行數(shù)字化集成和表現(xiàn)，很好地彌補了血球儀無法直觀觀察到細胞外觀的痛點，給了判斷者更加直觀和準確合理的判別方式。

本次研究發(fā)現(xiàn)，在異型淋巴的陽性檢出率上，血液形態(tài)學分析系統(tǒng)的檢出率為94.3%（50/53），而血球儀的陽性檢出率為77.4%（41/53），血液形態(tài)學分析要優(yōu)于血球儀。在設備原理上血液形態(tài)分析系統(tǒng)也模擬了人工鏡檢的方式，結果表現(xiàn)也更加直觀和準確，適用于外周血檢查中輔助檢查異型淋巴。