微生物檢測技術在生活飲用水檢驗中的應用效果研究

高 敏，周偉偉

（陽谷縣疾病預防控制中心，山東聊城 252300）

生活飲用水是指供人生活的飲水和用水。生活飲用水在經過凈化處理后微生物含量及數量已明顯降低，但生活中潛在的水源污染、管網污染、二次供水污染等仍可能會導致生活飲用水中的出現致病微生物或有毒有害物質，從而使生活飲用水衛生質量不合格[1]。采用微生物檢測技術對生活飲用水中相關微生物指標進行檢測，能夠幫助人們判斷生活飲用水的衛生質量是否符合國家制定的相關標準。一般情況下，生活飲用水中的常見的致病微生物有腸道致病菌、病毒、水性致病原蟲和蠕蟲等，其中菌落總數和腸道菌群（如總大腸菌群、耐熱大腸桿菌）等是檢測的重點。基于此，本文分析了微生物檢測技術在生活飲用水檢驗中的應用效果，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

生活飲用水樣品來源于2020 年1 月至2022 年1 月送檢的集中供水共520 份，包含末梢水132 份（25.38%）、二次供水365 份（70.19%），直飲水23 份（4.42%）；豐水期樣品260 份（50.00%），枯水期樣品260份（50.00%）。所有水樣品儲存均符合相關要求，無污染、滲漏狀況。

1.2 檢測方法

檢測依據為《生活飲用水標準檢驗方法 水樣的采集與保存》（GB/T 5750.2—2006）、《生活飲用水標準檢驗方法 微生物指標》（GB/T 5750.12—2006）。

（1）菌落總數檢測。采用平板計數法進行菌落總數檢測。吸取待測水樣1 mL，注入滅菌平皿中，傾注培養基，混勻水樣和培養基。將培養基放在培養箱內培養48 h，之后通過生物顯微鏡（B203 生物顯微鏡，重慶市奧特光學儀器有限責任公司）對水樣中的菌落總數進行計數。

（2）總大腸菌群檢測。采用多管發酵法進行總大腸菌群檢測，使用實驗室制備的3 倍濃縮乳糖蛋白胨培養液培養24 h，培養溫度37 ℃，觀察產酸產氣情況。出現產酸產氣視為陽性管培養物，需要進行進一步操作，即接種在伊紅美藍培養基上，觀察菌落狀況，并進行革蘭氏染色和鏡檢。

（3）耐熱大腸菌群檢測。采用多管發酵法進行耐熱大腸菌群檢測，先進行初步發酵試驗，采用3 倍濃縮乳糖蛋白胨培養液于37 ℃條件下培養24 h。觀察產酸產氣情況，將出現產酸產氣的發酵管中的菌落分別接種于伊紅美藍培養基，于44 ～45 ℃條件下培養24 h。觀察再次培養后發酵管的產酸產氣情況，選出產酸產氣的發酵管的菌落，接種于乳糖蛋白胨培養液中，置于37 ℃條件中培養24 h，再進行鏡檢。

（4）大腸埃希氏菌檢測。采用多管發酵法進行檢測，對總大腸菌群初步發酵試驗中出現產酸產氣的陽性管進行檢測，接種后于45 ℃條件下培養24 h，通過紫外燈照射觀察有無藍色熒光，若有則表明存在大腸埃希氏菌，則應計算陽性管數。

1.3 觀察指標及評定標準

（1）觀察指標。觀察不同來源水樣品的微生物檢測結果以及豐水期、枯水期水樣品的微生物檢測結果，包括菌落總數、腸道菌群。

（2）評定標準。參照《生活飲用水衛生標準》（GB 5749—2022）進行評定。菌落總數≤100 CFU·mL-1判定為合格；腸道菌群（總大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希氏菌）的合格標準為每100 mL 中最大可能數（MPN）不得檢出。

1.4 統計學分析

采用SPSS 25.0 軟件對相關數據進行統計學分析，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果與分析

2.1 不同來源水樣品的微生物檢測結果比較

末梢水、二次供水、直飲水的菌落總數結果差異有統計學意義（P＜0.05），其中直飲水的菌落總數檢測合格率最低，為60.87%。末梢水、二次供水、直飲水的腸道菌群（總大腸菌群、耐熱大腸桿菌、大腸埃希氏菌）合格率差異不顯著（P＞0.05），見表1。

表1 不同來源水樣品的微生物檢測結果比較表[n（%）]

2.2 豐水期、枯水期水樣品的微生物檢測結果比較

豐水期水樣品的菌落總數合格率低于枯水期（P＜0.05），豐水期的腸道菌群檢測合格率與枯水期差異不明顯（P＞0.05），見表2。

表2 豐水期、枯水期水樣品的微生物檢測結果比較[n（%）]

3 討論

水中常見的微生物有細菌、病毒、真菌、噬菌體、原生動物等，大多數需要處理后才能作為生活飲用水[2]。根據現行的《生活飲用水衛生標準》（GB 5749—2022），生活飲用水應不含有病原微生物和寄生蟲卵。然而受環境污染、水體滯留變質、回流污染等各種因素的影響，近年來水污染問題突出，若生活飲用水中的微生物超標，則可能會造成水源性傳染性疾病的暴發流行，對人們的健康及生命安全構成威脅[3]。因此，需要對生活飲用水進行檢驗，并將檢測結果作為判斷水質衛生狀況的依據。

微生物檢測技術是檢驗生活飲用水的常用方法，檢測項目主要包括菌落總數、總大腸菌群、耐熱大腸菌群等。微生物檢測技術檢測生活飲用水的步驟包括采集水樣、實驗室檢驗、結果分析，其中采集水樣主要是對生活飲用水進行采集，如末梢水、二次供水、直飲水等，在采集水樣后需要在4 h 內完成檢驗[4]。實驗室檢驗應根據待測項目選擇適宜的檢驗方法，如采用多管發酵法檢測總大腸菌群、耐熱大腸菌群，采用平皿技術法檢驗菌落總數等。在實際應用中，需要檢驗人員根據檢測需求靈活選擇微生物檢測技術，確保檢驗結果的準確性。

本研究主要對520 份水樣進行微生物檢驗，末梢水、二次供水、直飲水的菌落總數檢測結果差異有統計學意義（P＜0.05），其中直飲水的菌落總數檢測合格率最低，為60.87%。可能是因為末梢水、二次供水是城市集中供水，消毒設施、制度管理、供水管道設施相對完善，衛生狀況較好，而直飲水主要來源于農村中小學，受設備簡陋、工程建設標準較低、消毒設施較為落后、消毒工藝不完善、缺乏完善的管理制度等因素影響，導致水質衛生狀況較差，菌落總數合格率偏低。總大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希氏菌等腸道菌群可以反映糞便污染情況，水質中存在大量大腸桿菌容易導致腸道傳染性疾病暴發流行[5]。本次檢測結果表明，末梢水、二次供水、直飲水的腸道菌群合格率差異不明顯（P＞0.05），表明末梢水、二次供水、直飲水均未出現糞便污染的情況。豐水期水樣品的菌落總數合格率低于枯水期（P＜0.05），豐水期的腸道菌群合格率與枯水期差異不明顯（P＞0.05），提示豐水期的水質稍差，而枯水期的水質較好。分析原因可能是豐水期一般在5—10 月，這一時段氣溫高、水量大且不穩定、水中雜質多、水流速較快使水中的雜質難以沉淀，而且微生物在此階段也大量繁殖，導致豐水期的微生物檢出率較高，水質較差；而枯水期主要出現在少雨或無雨的季節，水流少、流速緩慢、水中雜質容易沉淀，水質相對較好[6]。

4 結論

綜上所述，使用微生物檢測技術檢驗生活飲用水中菌落總數、腸道菌群，能夠幫助相關部門了解不同來源（末梢水、二次供水、直飲水）及豐水期、枯水期的水樣品中微生物分布狀況，對于判定生活飲用水質是否合格極為關鍵，具有較高的應用價值。