QuEChERS-GC-MS/MS 檢測(cè)蔬菜中敵敵畏、毒死蜱、二甲戊靈等7 種農(nóng)藥殘留

葛 斌

（鄭州市食品藥品檢驗(yàn)所，河南鄭州 450000）

現(xiàn)如今農(nóng)藥已經(jīng)是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中不可或缺的重要組成部分，農(nóng)藥主要用于預(yù)防、消滅、控制危害農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中的有害生物及有目的地調(diào)節(jié)、控制、影響植物[1-4]。農(nóng)藥在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中起到了保障農(nóng)作物生長(zhǎng)、調(diào)節(jié)農(nóng)作物生長(zhǎng)發(fā)育的作用。現(xiàn)階段，農(nóng)藥種類繁多，化學(xué)結(jié)構(gòu)復(fù)雜，作用機(jī)理不同，防治對(duì)象各異。我國(guó)是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)大國(guó)，農(nóng)藥是預(yù)防控制病蟲(chóng)害的有效工具，且現(xiàn)在還沒(méi)有任何防治手段可以替代農(nóng)藥的作用[5]。農(nóng)藥根據(jù)結(jié)構(gòu)可以分為無(wú)機(jī)農(nóng)藥、生物農(nóng)藥、有機(jī)農(nóng)藥。無(wú)機(jī)農(nóng)藥即從天然礦物中得到的化合物，如硫黃粉等，多用于有機(jī)蔬菜的種植。無(wú)機(jī)農(nóng)藥一般分子量比較小，所以穩(wěn)定性較差，不適合與其他農(nóng)藥混用。生物農(nóng)藥是利用生物或者生物代謝物進(jìn)行病蟲(chóng)害防治，如白僵菌、阿維菌素等，這類農(nóng)藥一般只針對(duì)某一類病蟲(chóng)有防治效果，對(duì)人體相對(duì)安全，多數(shù)用于有機(jī)食品、綠色食品種植[6]。有機(jī)農(nóng)藥即人工合成農(nóng)藥，有機(jī)農(nóng)藥種類繁多，化學(xué)機(jī)構(gòu)復(fù)雜，大多屬于高分子化合物，多數(shù)適宜現(xiàn)用現(xiàn)配，混合使用。按照作用不同主要可分為5 種：①有機(jī)殺蟲(chóng)類，主要有有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類、擬除蟲(chóng)菊酯類等；②有機(jī)殺螨劑，主要是一些含錫、不含錫的殺螨劑；③有機(jī)殺菌劑，包括二硫代氨基甲酸酯類、二甲酰亞胺類、苯并咪唑類等；④有機(jī)除草劑，主要有苯氧羧酸類、氨基甲酸酯類、二苯醚類等；⑤植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，主要是生長(zhǎng)素類、細(xì)胞分裂素類等。

為保障公眾食品安全，農(nóng)藥使用一定要注意安全間隔期，《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）中明確規(guī)定了每一種農(nóng)藥的最大殘留限量，農(nóng)藥殘留超標(biāo)則有可能對(duì)人體健康造成影響。當(dāng)前蔬菜中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法有液相色譜法、氣相色譜法、氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法[7-9]，其中氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法是目前主流的檢測(cè)方法，具有高通量、定性準(zhǔn)確、前處理便捷等優(yōu)點(diǎn)。本文通過(guò)使用氣相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜（Gas Chromatography-Triple Quadrupole Tandem Mass Spectrometry，GCMS/MS），優(yōu)化前處理方法，建立了蔬菜中敵敵畏、毒死蜱、二甲戊靈等7 種農(nóng)藥的快速檢測(cè)方法。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

乙腈（色譜純），美國(guó)fisher 公司；敵敵畏、毒死蜱、二甲戊靈、腐霉利、殺撲磷、己唑醇、狄氏劑，純度均大于97%，TRC-CANADA 公司；實(shí)驗(yàn)用水為超純水。

Trace-TQS8000 EVO型三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀，配有電子轟擊源，美國(guó)賽默飛世爾科技公司；振蕩器，美國(guó)賽默飛世爾科技公司；MG-2200 型氮?dú)獯蹈蓛x；離心機(jī)，中國(guó)湘儀集團(tuán)；電子天平，梅特勒-托利多儀器上海有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制

使用移液槍分別吸取7 種農(nóng)藥各0.1 mL，使用乙腈定容至10 mL 容量瓶中，配制成10 mg·L-1的中間液，使用時(shí)根據(jù)需要配制成5 ng·mL-1、10 ng·mL-1、50 ng·mL-1、100 ng·mL-1、200 ng·mL-1和500 ng·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液。所有中間液避光存放在-18 ℃冰箱中。

1.2.2 樣品前處理稱取10 g 樣品于50 mL 離心管中，加入10 mL 1.0%乙酸-乙腈振蕩提取20 min，之后加入4 g硫酸鎂、1 g 氯化鈉、1 g 檸檬酸鈉后渦旋5 min，3 000 r·min-1離心2 min，取上清液6 mL 轉(zhuǎn)移至裝有150 mg AMS、50 mg C18和10 mg GCB 凈化劑的離心管中，渦旋5 min，3 000 r·min-1離心2 min，取上清液2 mL，40 ℃氮?dú)獯蹈桑瑥?fù)溶，過(guò)濾膜進(jìn)樣。

考慮到不同復(fù)溶液試劑對(duì)提取率的影響，分別使用乙腈、乙酸乙酯、正己烷進(jìn)行最終定容，結(jié)果發(fā)現(xiàn)正己烷效果最佳，因此最終復(fù)溶液選用正己烷。

1.3 儀器條件

1.3.1 色譜條件

色 譜 柱：安 捷 倫HP-5MS 毛 細(xì) 管 柱（30 m×300 μm，0.25 μm）；柱箱升溫程序：初始柱溫50 ℃，保持1.5 min 后以25 ℃·min-1上升至180 ℃，后以10 ℃·min-1上升至300 ℃，保持6 min；進(jìn)樣口溫度：300 ℃；載氣：N2；恒流模式；進(jìn)樣量：1.0 μL。

考慮到進(jìn)樣方式對(duì)出峰時(shí)間的影響，本研究對(duì)比分析了不分流進(jìn)樣、不分流脈沖進(jìn)樣兩種進(jìn)樣模式。結(jié)果顯示，不分流脈沖進(jìn)樣峰形更加尖銳，效果更好，相較于不分流進(jìn)樣出峰時(shí)間提前，可以更加快速地完成檢測(cè)，所以本研究最終選擇不分流脈沖進(jìn)樣模式。

1.3.2 質(zhì)譜條件

電離子源（EI 源），采用選擇反應(yīng)檢測(cè)模式（SRM模式），傳輸線溫度300 ℃。保留時(shí)間、定量離子對(duì)、定性離子對(duì)參數(shù)見(jiàn)表1。

表1 7 種農(nóng)藥的質(zhì)譜優(yōu)化參數(shù)

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

使用陰性基質(zhì)的正己烷溶液將中間液配制成5 ～500 ng·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)曲線，以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，以濃度（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果顯示，7 種農(nóng)藥在5 ～500 ng·mL-1濃度內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)（R2）均大于0.990，檢出限為1.0 ng·mL-1，定量限為3.0 ng·mL-1，詳見(jiàn)表2。

表2 7 種農(nóng)藥的線性方程、線性范圍、相關(guān)系數(shù)、檢出限及定量限

2.2 回收率與精密度

為評(píng)價(jià)該方法的有效性，測(cè)定了回收率和日內(nèi)精密度參數(shù)。將高（200 ng·mL-1）、中（100 ng·mL-1）、低（50 ng·mL-1）3 個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液加入空白陰性樣品，回收率為83.20%～105.92%，日間穩(wěn)定性（n=3）為3.9%～11.5%，詳見(jiàn)表3。結(jié)果表明，該方法準(zhǔn)確、穩(wěn)定，適用于常規(guī)分析。

表3 7 種農(nóng)藥的加標(biāo)回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=3）

3 結(jié)論

本文采用QuEChERS-氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀法建立了一種同時(shí)測(cè)定蔬菜中7 種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，選擇1.0%乙酸-乙腈為提取溶劑，經(jīng)QuEChERS 前處理凈化，取2 mL 上清液氮?dú)獯蹈桑和閺?fù)溶，不分流脈沖模式進(jìn)樣。方法驗(yàn)證結(jié)果顯示，方法線性關(guān)系良好，快速、便捷，具有較高的靈敏度、選擇性和準(zhǔn)確性，易于實(shí)現(xiàn)高通量處理，適用于蔬菜中農(nóng)藥殘留含量的分析。此外，該方法還有較強(qiáng)的擴(kuò)展性，對(duì)于多種基質(zhì)中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)都具有可借鑒性，可進(jìn)一步開(kāi)展新的研究。