高效液相色譜在食品檢測(cè)中的應(yīng)用探究

馮淑敏

（連云港市贛榆區(qū)綜合檢驗(yàn)檢測(cè)中心，江蘇連云港 222100）

現(xiàn)如今，食品安全事故頻發(fā)，食品安全問(wèn)題也受到了社會(huì)的高度關(guān)注。通過(guò)高效便捷的檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)食品中有害物質(zhì)以及食品添加劑是否超標(biāo)，能夠強(qiáng)化食品衛(wèi)生監(jiān)管，保證食品安全。高效液相色譜在食品藥品檢測(cè)工作中發(fā)揮著關(guān)鍵性的作用。本文將對(duì)其在食品檢測(cè)中的應(yīng)用展開(kāi)論述，以供相關(guān)人員參考。

1 高效液相色譜的技術(shù)原理及特點(diǎn)

高效液相色譜是20 世紀(jì)60 年代末期由液相聯(lián)合氣相發(fā)展而來(lái)的一項(xiàng)檢測(cè)方法。其原理為在高壓輸送系統(tǒng)作用下將檢測(cè)樣品借助流動(dòng)相向分離器中輸送。由于待檢測(cè)樣品在流動(dòng)相和分離相中有著不同的分配系數(shù)和作用力強(qiáng)度，因此在兩相之間樣品能夠?qū)崿F(xiàn)反復(fù)吸附分離[1]。待測(cè)樣品中的各項(xiàng)成分在不同洗脫能力作用下依次洗脫出來(lái)。相比于傳統(tǒng)的液相色譜，高效液相色譜在高靈敏度、高檢測(cè)效率方面的優(yōu)勢(shì)更為明顯，能夠在5 ～45 min 內(nèi)完成待測(cè)樣品的檢測(cè)。另外，在實(shí)際應(yīng)用中，其檢測(cè)范圍更廣，當(dāng)下70%左右的有機(jī)物均可通過(guò)這一方法進(jìn)行有效檢測(cè)。熱穩(wěn)定性差、沸點(diǎn)高且分子量大的多數(shù)有機(jī)物均可通過(guò)該方法進(jìn)行檢測(cè)。但基于該檢測(cè)方法對(duì)樣本的純度和前處理方法有著相對(duì)更高的要求，存在一定假陽(yáng)性風(fēng)險(xiǎn)。因此在實(shí)際檢驗(yàn)工作中可聯(lián)合串聯(lián)質(zhì)譜法等方法，減少干擾因素，提高檢測(cè)準(zhǔn)確性，為食品安全提供技術(shù)保障。

2 高效液相色譜在食品檢測(cè)中的應(yīng)用

2.1 在食品添加劑檢測(cè)中的應(yīng)用

2.1.1 檢測(cè)食品防腐劑

天然防腐劑和人工合成防腐劑是食品中常用的添加劑。人工合成防腐劑以山梨酸、苯甲酸最為常見(jiàn)。若食品生產(chǎn)企業(yè)嚴(yán)格依照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)對(duì)防腐劑含量予以控制，不會(huì)對(duì)消費(fèi)者的身體健康造成影響。若長(zhǎng)期過(guò)量使用則會(huì)威脅到人們的身體健康。劉曉慧等[2]采用高效液相色譜法測(cè)量不同基質(zhì)中的防腐劑含量，為避免產(chǎn)生過(guò)高的柱壓或者保留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，采取甲醇三乙胺混合流動(dòng)相，獲得了較為準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果。范云場(chǎng)等[3]檢測(cè)蜜餞中有機(jī)酸類(lèi)防腐劑時(shí)使用高效液相色譜法，結(jié)果表明，該方法可有效測(cè)定不同蜜餞中有機(jī)酸類(lèi)防腐劑含量。珠娜等[4]在檢測(cè)飲料、葡萄酒等食品中防腐劑時(shí)使用高效液相色譜聯(lián)合二極管陣列檢測(cè)器，使用甲醇作為提取液，使不同防腐劑的前處理方法得到統(tǒng)一，檢測(cè)時(shí)間更短，檢測(cè)效率更高。大量研究證實(shí)了高效液相色譜法在食品防腐劑含量檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值。在相關(guān)研究中，研究人員還應(yīng)將樣品前處理方法作為研究重點(diǎn)，提高樣品的分離提取效率，最大限度降低復(fù)雜基質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生的干擾，進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度。

2.1.2 檢測(cè)食品甜味劑

阿斯巴甜、安賽蜜、甜蜜素均是食品生產(chǎn)過(guò)程常用的甜味劑。當(dāng)前常用的甜味劑檢測(cè)方法包括液相色譜法、超高效液相色譜法等。但超高效液相色譜法不僅檢測(cè)成本高，其對(duì)色譜柱也有著較高要求。然而高效液相色譜法在實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)食品甜味劑中應(yīng)用廣泛。刁玉華等[5]以水提超聲對(duì)食品中的安賽蜜予以提取，為避免過(guò)柱等繁雜的操作，向待測(cè)樣品中加入沉淀劑清除雜質(zhì)，具有高效、便捷的優(yōu)勢(shì)。NAMBIAR 等[6]使用薄層色譜－反相高效液相色譜法檢測(cè)飲料、果凍等食品中的甜味劑，達(dá)到了95.9%～105.6%的樣品回收率，證實(shí)了食品甜味劑檢測(cè)中高效液相色譜法成本低、可重復(fù)操作的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。在食品甜味劑檢測(cè)中，高效液相色譜法的應(yīng)用相對(duì)成熟，眾多研究學(xué)者在此基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)了測(cè)定條件的優(yōu)化，簡(jiǎn)化了樣品前處理方法，可同時(shí)檢測(cè)出多種甜味劑。

2.1.3 檢測(cè)食用色素

天然色素和人工合成色素是常用食品色素類(lèi)型，若長(zhǎng)期過(guò)量攝入人工合成色素將加大肝腎負(fù)擔(dān)，因此加強(qiáng)食品中人工色素含量檢測(cè)具有重要意義。高效液相色譜法檢測(cè)食用色素的流程主要包括檢測(cè)前處理、選擇流動(dòng)相、確定波長(zhǎng)、實(shí)現(xiàn)不同基質(zhì)色素的檢測(cè)。趙珊等[7]在檢測(cè)調(diào)味油中的黃色素時(shí)使用高效液相色譜－電噴霧質(zhì)譜法，在樣品前處理時(shí)使用超聲輔助提取法，有效分離了檢測(cè)樣品中的番紅花酸、藏花素等黃色素主要成分。王麗君等[8]使用高效液相色譜法檢測(cè)食品中胭脂紅成分，將 0.05 mol·L-1氫氧化鈉溶液作為提取液，經(jīng)離心測(cè)定后，獲得91.3%～95.8%的樣品回收率。另外，在對(duì)合成色素進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)，利用高效液相色譜法還可以使得色素的檢測(cè)范圍得以擴(kuò)大，對(duì)《中華人民共和國(guó)食品安全法》中允許添加和禁止添加的色素均能夠?qū)崿F(xiàn)有效檢驗(yàn)。在實(shí)際檢驗(yàn)工作中更加適合對(duì)固態(tài)食品中的紅色素和黃色素以及液態(tài)食品中的藍(lán)色素進(jìn)行準(zhǔn)確檢驗(yàn)。在以該方法檢測(cè)天然色素的濃度時(shí)，可將離子液作為提取液開(kāi)展檢測(cè)工作，其優(yōu)勢(shì)在于可對(duì)天然色素的提取條件進(jìn)行充分優(yōu)化，使得食用色素的提取過(guò)程更加環(huán)保。

2.2 在食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用

高效液相色譜法能夠檢測(cè)出包括有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥、合成擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)等在內(nèi)的多種食品農(nóng)藥殘留，使用該方法能夠在一定程度上簡(jiǎn)化樣品前處理流程，提高檢測(cè)效率和樣品回收率。朱之烔等[9]使用離子液體配合高效液相色譜法檢測(cè)蜂蜜中的農(nóng)藥殘留情況，樣品的平均回收率達(dá)到91.3%～105.7%。現(xiàn)如今，多數(shù)研究均集中在樣品基質(zhì)的前處理工序中，避免食品中大量復(fù)合物影響檢測(cè)結(jié)果或?qū)C(jī)器產(chǎn)生損傷。另外，茶葉中的殺蟲(chóng)劑成分嚴(yán)重威脅人們身體健康，在利用高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，可利用快速樣品前處理技術(shù)，使得樣品前處理更加優(yōu)化，同時(shí)配合使用串聯(lián)質(zhì)譜法，減少基質(zhì)等干擾因素，提高樣品回收率。

在檢測(cè)食品農(nóng)藥殘留工作中，高效液相色譜法的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)明顯，但因?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品中復(fù)合物較多，易形成干擾或損傷檢測(cè)設(shè)備。因此在檢測(cè)工作中可選擇可靠的樣本前處理方法，減少檢測(cè)偏差，提高檢測(cè)準(zhǔn)確性。

2.3 在食品真菌毒素檢測(cè)中的應(yīng)用

黃曲霉毒素、嘔吐毒素以及赭曲霉毒素等是食物中常用的真菌毒素類(lèi)型。為了能夠?yàn)槭称分姓婢舅貦z測(cè)提供可靠依據(jù)，當(dāng)前研究集中在優(yōu)化前處理?xiàng)l件，同時(shí)測(cè)定多種真菌毒素等方面。劉丹等[10]在測(cè)定食用油產(chǎn)品真菌毒素組分時(shí)，將乙腈-水作為提取液，經(jīng)過(guò)分離凈化后，進(jìn)行正離子和負(fù)離子電噴霧檢測(cè)。有效檢測(cè)了食用油中10 余種真菌毒素，樣品平均回收率達(dá)到73.1%～115.2%，具有較好的檢測(cè)準(zhǔn)確度和可重復(fù)性。

近些年來(lái)在檢測(cè)食品中真菌毒素時(shí)多利用QuEChERS 法，對(duì)樣本的前處理工序予以簡(jiǎn)化，使檢測(cè)效率得以提高。但由于基質(zhì)間存在不同的結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)，將對(duì)部分檢驗(yàn)結(jié)果形成干擾，因此樣品前處理過(guò)程不可過(guò)于省略。采用高效液相色譜法應(yīng)根據(jù)樣本合理選擇前處理方法，從而對(duì)食品中的生物毒素予以準(zhǔn)確測(cè)定。

2.4 在食品營(yíng)養(yǎng)素檢測(cè)中的應(yīng)用

營(yíng)養(yǎng)素的概念較為寬泛，主要分為微量營(yíng)養(yǎng)素、常量營(yíng)養(yǎng)素，常見(jiàn)的如維生素、礦物質(zhì)、碳水化合物等。利用高效液相色譜法可以檢測(cè)出食品中多種營(yíng)養(yǎng)素，近些年來(lái)，相關(guān)研究多集中在建立普通食物和保健食品中維生素的檢測(cè)方法等方面。SILVA等[11]對(duì)嬰幼兒食品中的維生素C 含量使用高效液相色譜法予以測(cè)定，發(fā)揮了高靈敏度和準(zhǔn)確度的優(yōu)勢(shì)，經(jīng)檢測(cè)RSD 在4.6%以下，為風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定及明確最大使用量的限定值提供了可靠數(shù)據(jù)支撐。王帥帥[12]在檢測(cè)嬰幼兒配方奶粉中維生素B1含量時(shí)使用高效液相色譜法實(shí)現(xiàn)快速測(cè)定。余文琴等[13]在檢測(cè)飲料中維生素C 含量時(shí)，使用不同方法（高效液相色譜、超高效液相色譜法）進(jìn)行測(cè)定研究。發(fā)現(xiàn)不同檢測(cè)方法的適用性均良好，但后者的靈敏度和檢測(cè)效率更高，所使用的試劑量更小。聶昌宏等[14]在檢測(cè)馬乳中維生素C 的質(zhì)量濃度時(shí)發(fā)現(xiàn)，高效液相色譜一離子阱質(zhì)譜法具有良好的可重復(fù)性，可使用其檢測(cè)馬乳中的營(yíng)養(yǎng)成分。

在食品營(yíng)養(yǎng)素測(cè)定中，高效液相色譜法的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在分析檢驗(yàn)用時(shí)短，靈敏度和分離效率高，在檢測(cè)時(shí)所使用的試劑量更少。另外，在食品營(yíng)養(yǎng)素的測(cè)定中，對(duì)不同方法的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)進(jìn)行分析可確定最適合的檢測(cè)方法，或通過(guò)兩種方法聯(lián)合檢測(cè)以提高定量定性分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。不同于其他檢驗(yàn)元素，營(yíng)養(yǎng)素是一種多種物質(zhì)復(fù)合物，例如維生素C中同時(shí)含有脫氫抗壞血酸與抗壞血酸，并且在前處理環(huán)節(jié)，pH 值、溫度等提取條件均會(huì)影響到含量的測(cè)定結(jié)果。因此，在采用高效液相色譜法維生素C等營(yíng)養(yǎng)素時(shí)需對(duì)前處理環(huán)節(jié)，pH 等參數(shù)做科學(xué)把控，以提高檢測(cè)準(zhǔn)確性。另外，基于高效液相色譜法所搭配的檢驗(yàn)器不同，還能夠?qū)崿F(xiàn)食品中多項(xiàng)營(yíng)養(yǎng)素的檢 測(cè)。

3 結(jié)語(yǔ)

高效液相色譜法在食品檢測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用價(jià)值得到了多方證實(shí)，可實(shí)現(xiàn)多樣性檢測(cè)、單一性檢測(cè)，具有較好的檢測(cè)經(jīng)濟(jì)性，能夠有效檢出食品中添加劑、農(nóng)藥殘留、真菌毒素等含量，檢測(cè)效率高，操作便捷，有助于強(qiáng)化相關(guān)部門(mén)食品安全監(jiān)督效能，為人們的生命安全和社會(huì)的穩(wěn)定發(fā)展提供保障。