質控圖聯合Westgard 多規則法評價兩套生化檢測系統測定尿酸的室內質控方案

嚴詩云（通信作者），吳靜標，韓芝斌，姚燕麗，曹春玲，黃燕虹

廣東省醫療器械質量監督檢驗所 （廣東廣州 510663）

尿酸是嘌呤堿基的代謝產物，大部分從腎臟排泄。尿酸升高的主要危害是引起痛風，同時是心血管疾病的危險因素。血清中尿酸的檢測，是腎功能及心血管疾病檢查的重要項目。尿酸的測定方法主要包括磷鎢酸法、尿酸酶法、高效液相色譜-質譜法。目前，臨床實驗室主要采用靈敏度、特異度和準確性均較高，且操作較為簡單的尿酸酶法[1]。但需注意的是，在實際檢測過程中由于受到多種因素的影響，可能會導致出現誤差。為減少檢測誤差，獲得更精準且客觀的數據，應嚴格控制全自動生化分析儀的檢測過程，加強質量管理，以有效提高儀器的精密度及檢測質量[2]。Westgard 多規則法結合Levey-Jennings 質控圖的質控方法，可以確定誤差類型、誤差率且假失控率更低，在臨床實驗室被廣泛應用[3-9]。

為確保檢測結果的準確性和可重復性，本研究根據《檢測和校準實驗室能力認可準則》[10]，對日立7180、貝克曼AU680 兩套生化檢測系統[11]測定尿酸含量的精密度和準確度結果進行分析，通過質控圖聯合Westgard 多規則法分析評價2 套檢測系統的內部質控結果，旨在將該方法應用于日常質量控制，以降低生化檢測項目的檢測誤差，提高檢測質量，現報道如下。

1 材料

1.1 儀器

日立7180 型全自動生化分析儀、貝克曼AU680 型全自動生化分析儀、MixMax 漩渦混勻器、可調移液器（100～1000 μl）、反滲透+EDI 純水系統。

1.2 試劑和樣本

試劑A：廣州科方生物技術股份有限公司生產的尿酸測定試劑盒（尿酸酶法）（批號：210108）及配套校準品和質控品。

試劑B：貝克曼庫爾特實驗系統（蘇州）有限公司生產的尿酸測定試劑盒（尿酸酶-過氧化物酶法）（批號：AUZ8902）及配套校準品和質控品。

質控樣本：英國朗道實驗診斷有限公司生產的人基質定值生化質控血清水平2（批號：1326UN，標示濃度為：340 μmol/L）、水平3（批號：1005UE，標示濃度為：560 μmol/L）。

A 檢測系統：試劑A、日立7180 型全自動生化分析儀。

B 檢測系統：試劑B、貝克曼AU680 型全自動生化分析儀。

2 方法及結果

2.1 精密度和準確度試驗

將人基質定值生化質控血清水平2、水平3 按說明書要求充分溶解后，使用A 和B 檢測系統分別重復檢測10 次，計算日內精密度，連續檢測20 d，計算日間精密度。并計算測定濃度與標示濃度相對偏差，得到準確度結果。見表1。

表1 A 與B 檢測系統尿酸的準確度偏差及精密度比較

結果顯示，A 與B 檢測系統測定2 個水平質控血清的精密度和準確度偏差均達到行業標準YY/T 1207-2013[12]批內精密度和準確度的相關要求，且質控血清的日內和日間精密度結果均＜1%，A 檢測系統的水平3 質控血清準確度相對偏差較B 檢測系統小，結果更接近靶值。

2.2 繪制Levey-Jennings 質控圖

計算A 與B 檢測系統測定水平2、水平3 的日內10 次重復測試結果均數（M），用于統計20 d 日間試驗結果的均數（M）和標準差（SD），進而以“d”（組號）為橫坐標，測定濃度為縱坐標，M 為靶值，M±2SD 為警戒限，M±3SD 為失控限，運用Excel 軟件繪制Levey-Jennings 質控圖，見圖1～4。

圖1 A 檢測系統水平2 質控血清Levey-Jennings 質控圖

圖2 A 檢測系統水平3 質控血清Levey-Jennings 質控圖

圖3 B 檢測系統水平2 質控血清Levey-Jennings 質控圖

圖4 B 檢測系統水平3 質控血清Levey-Jennings 質控圖

2.3 繪制Z-分數質控圖

將不同水平的質控測定值轉換為Z 分數形式（公式1），繪制在單個質控圖上進行比較，可以直觀地反映實驗的系統誤差與隨機誤差[13]，見圖5 ～6。

圖6 B 檢測系統水平2 和水平3 質控血清Z-分數質控圖

式中xi為第i 次測定值，M 為所有測定值的均數，SD 為所有測定值的標準差。

2.4 確定質量控制規則

Levey-Jennings 質控圖、Z-分數質控圖均結合Westgard 多規則理論的質控規則，確定6 條規則，即12S、13S、22S、R4S、41S、10X。（1）合格：所有質控樣品的濃度測定值均在M±2SD 范圍內，或|Z|＜2；（2）警告：12S表示有1 個質控樣品測定值超過M±2SD，或出現1 次2 ＜|Z|＜3；（3）失控：13S表示有1 個質控樣品測定值超過M±3SD 或出現1 次|Z|＞3；22S表示有2 個連續質控樣品測定值超過M±2SD 或連續2 次出現2 ＜|Z|＜3；R4S表示相鄰2 個質控樣品測定值超過4SD，即一個質控超過M+2SD，另一個質控超過M-2SD，或連續2 次Z 之間差值＞4；41S表示4 個連續質控樣品測定值同時超過M±SD，或連續4次|Z|＞1；10x表示連續10個質控樣品測定值在M 同側，或連續10 次Z＞0[6]。

2.5 結果分析

日立7180 檢測水平2 的20 組結果濃度范圍為332.8～341.7 μmol/L，水平3 的20 組結果濃度范圍為558.9～573.1 μmol/L；貝克曼AU680 檢測水平2 的20 組結果濃度范圍為346.5～357.9 μmol/L，水平3 的20 組結果濃度范圍為586.2～599.2 μmol/L。

由Levey-Jennings 質控圖可知，2 套系統水平2、水平3 的測定值均未超過失控限3SD。結合Westgard 多規則法分析，日立7180 檢測的20 組結果，水平2 和水平3 分別有9 個和11 個結果低于靶值，11 個和9 個結果高于靶值，水平2 第20 組結果為332.80 μmol/L，超 出M-2SD（332.81 μmol/L），提示警告1 次。貝克曼AU680 檢測的20 組結果中，水平2 和水平3 分別有11 個和8 個低于靶值，9 個和12 個高于靶值，水平2 和水平3 第17 組的結果分別為357.89 μmol/L 和599.20 μmol/L，超出M+2SD（357.84 μmol/L 和598.96 μmol/L），分別提示警告1 次；水平3 第10 組至第20 組連續11 組結果在M同側，均高于M，違反10X規則，提示失控1 次。

分析Z-分數質控圖，日立7180 檢測水平2 質控血清的第20 組結果|Z|=2.003，違反12s 規則，提出警告1 次，檢測水平3 質控血清，所有組的|Z|值均＜2。貝克曼AU680 檢測水平2、水平3 質控血清的第17 組結果均出現2＜|Z|＜3，分別為2.01 和2.07，均違反12s 規則，提出警告1 次，水平3 第10 組至第20 組，連續11 次Z＞0，違反10x規則，提示失控1 次，此結果與Levey-Jennings 質控圖結果一致。

3 討論

本研究通過2 套系統分別檢測同一組質控品，計算精密度和準確度，結果顯示，精密度結果較為一致，均在1%以內，準確度偏差亦滿足行業標準YY/T 1207-2013《尿酸測定試劑盒（尿酸酶過氧化物酶偶聯法）》[12]的規定，兩套系統均能滿足日常進行試劑盒性能檢測的要求。

同時本研究進行2 套系統的尿酸含量檢測，并繪制Levey-Jennings 質控圖及Z-分數質控圖，結合Westgard 多規則理論分析2 套系統內部質控結果，觀察是否出現失控情況，并分析造成失控原因，提出解決方案。日立7180 檢測水平3 的結果均為合格，水平2 的結果提出1 次警告，貝克曼AU680水平2結果提出1次警告，水平3結果提出1次警告及1 次失控，失控類型為違反10x 規則，即從第10～20 天的結果連續11 組均高于平均值。當出現結果失控時，及時查找失控原因并排除誤差，分析可能存在的影響因素并及時糾正，以保證檢測結果的準確性[3]。根據本實驗室的具體情況分析出現失控結果的原因，主要是因為2 套系統檢測的是同一份樣本，且先進行的是日立7180 的檢測，等待檢測及轉移樣本的過程，導致AU680 樣本檢測時已放置的時間較長。另外，由于貝克曼AU680 不能設置檢測重復次數，且為保證樣本的可重復性，未將樣本分裝至多個樣本杯，實驗過程為反復進行10 次單次檢測，吸樣等待過程也會導致液體蒸發造成濃度偏高，即樣本放置溫度導致的系統誤差。針對該原因，實驗室完善了實驗過程操作規程，規定樣本復溫后的檢測時間，并對操作人員進行相關培訓，以減少該類失控情況的發生。

Levey-Jennings 質控圖和Z- 分數質控圖與Westgard 多規則法的聯合，可以降低假失控率和假報警率，其13s 和R4s 規則能夠敏銳發現隨機誤差，22s、41s 和10x 規則能夠準確判斷系統誤差，從而提高誤差檢出能力[5]，呈現內部質控的準確性。由于本次實驗使用的是不同廠家的試劑盒，試劑盒的溯源過程及參考區間存在差異，未能對實驗結果的一致性進行評價，在未來的研究中將考慮使用同一廠家的試劑盒在不同儀器上進行檢測，結合一致性結果和質控方法，來評價儀器的性能差別，為實驗室間比對及監督抽驗結果的判定提供參考。

綜上所述，Levey-Jennings 質控圖和Z-分數質控圖聯合Westgard 多規則法是使用較多的室內質控方法，能及時發現失控結果，并及時提出解決措施，對于提高檢測結果的精密度和準確性具有重要意義。日常進行尿酸檢測時，可以聯合使用質控圖與Westgard 多規則法，以提高檢驗結果質量[14]。