偏頭痛病人血清內皮素-1、降鈣素基因相關肽、神經降壓素水平變化及其與繼發缺血性腦卒中的關系

包澤巖，胡瓊力，莊思典，楊慧，宋莉，鐘水生

偏頭痛作為一種常見的原發性頭痛，臨床表現為病人反復出現偏側搏動性頭痛，且常伴有惡心、嘔吐、畏光、畏聲等癥狀，對病人的日常生活及工作造成了嚴重影響［1-2］。缺血性腦卒中又稱腦梗死，指因各種原因造成病人腦組織局部區域出現供血障礙，致使腦組織因缺血缺氧病變壞死，進而導致病人對應神經功能缺失的一種疾病［3］。已有研究發現，偏頭痛與缺血性腦卒中之間存在關聯，特別是對于有先兆性偏頭痛的45歲以下女性，其關聯性更高，嚴重威脅其生存質量［4］。因此，需積極探尋影響偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中的相關因素以指導臨床早期制定合理的干預方案。人體中的血清內皮素-1（ET-1）、降鈣素基因相關肽（CGRP）及神經降壓素（NT）均對機體腦血管起作用，其中ET-1對腦血管有強烈地收縮作用，Sugimoto等［5］發現ET-1能引發偏頭痛先兆；CGRP可活化CGRP受體進而舒張血管，Caronna、Starling［6］發現CGRP能通過拮抗作用治療偏頭痛；NT具有舒張血管、降血壓及鎮痛作用，Samsam等［7］發現NT與偏頭痛存在相關性。以上研究表明，血清ET-1、CGRP、NT水平可能與偏頭痛存在一定的關系，但其水平變化是否與偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中有關尚須進一步研究。鑒于此，本研究特對偏頭痛病人血清ET-1、CGRP、NT的水平變化及其與繼發缺血性腦卒中的關系進行探討與分析，具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年2月至2020年1月廣東三九腦科醫院收治的138例偏頭痛病人作為研究組，另選取同期在該院體檢的123例健康體檢者作為對照組。研究組男49例，女89例；年齡（29.54±5.58）歲，范圍為18～47歲；病程（3.65±0.71）年，范圍為1～6年。對照組男43例，女80例；年齡（30.83±5.66）歲，范圍為18～51歲。兩組性別、年齡對比均差異無統計學意義（χ2=0.01，P=0.926；t=1.85，P=0.065）。

納入標準：①研究組均符合偏頭痛診斷標準［8］：即未經治療的頭痛發作持續時間為4～72 h，頭痛發作呈單側性、搏動性，日常活動會使疼痛加劇，且發作時常伴隨有惡心、嘔吐、畏光、畏聲等癥狀，另存在以上癥狀的頭痛發作5次以上；②研究組入院時經腦部核磁共振檢查未發現異常；③對照組體檢顯示無明顯異常。排除標準：①因其他疾病導致頭痛的病人；②有凝血功能障礙的病人；③合并有其他疾病的病人；④自身存在認知障礙、精神類疾病等無法配合進行研究的病人；⑤存在其他心、腦血管病的病人；⑥檢測前1周內服用過偏頭痛治療藥物的病人；⑦處于妊娠或哺乳期的女性病人。所有研究對象或其近親屬簽署知情同意書，且本研究經廣東三九腦科醫院倫理委員會審核、批準后實施（批號20190102）。

1.2 方法 檢測方法：兩組受試者于上午取空腹靜脈血6 mL，將血樣置于添加乙二胺四乙酸二鈉（EDTA-Na）和抑肽酶的抗凝試管中，用低速冷凍離心機離心，溫度4 ℃、轉速3 000 r/min，時間10 min，取上清液置于-70 ℃環境中低溫保存，檢測時將樣品置于室溫中隔水復溶。ET-1、CGRP、NT均采用放射免疫法測定，ET-1檢測用上海通蔚實業有限公司提供的“內皮素-1檢測試劑盒”；CGRP檢測用上海信裕生物科技有限公司提供的“人降鈣素基因相關肽檢測試劑盒”；NT檢測用上海舒話生物科技有限公司提供的“人神經降壓素檢測試劑盒”；檢測步驟嚴格按照試劑盒說明書上的操作步驟由專人執行。

治療方法：在本研究過程中，對研究組病人均給予以下治療。①藥物治療：給予發作期病人曲坦類藥物或麥角胺類制劑治療；給予發作前期病人阿片類藥物或非甾體類抗炎藥行預防治療。②非藥物治療：將病人置于安靜、避光的房間內平躺，期間禁食能夠加重偏頭痛癥狀的食物如奶酪類食品、煙熏食品、腌制食品、乙醇類飲料、咖啡、巧克力等，給予病人按摩、理療與心理疏導等。當偏頭痛病人出現臨床癥狀時給予治療，癥狀消失后停止治療。

1.3 判定標準 對研究組病人隨訪12～24個月，觀察偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中的情況，其診斷標準為：①病人偏頭痛具有先兆性，本次發作與之前的典型發作相同，且先兆癥狀持續1 h以上；②病人偏頭痛發作經常規治療后眩暈、肢體無力、惡心嘔吐、偏身麻木等臨床癥狀未消失且持續24 h以上；③影像學顯示病人相關腦域存在責任病灶：頭部CT顯示缺血處病灶，核磁共振提示動脈狹窄和閉塞；④病人除偏頭痛外無其他可能繼發缺血性腦卒中的誘因。將繼發缺血性腦卒中的偏頭痛病人設為繼發組，反之設為未繼發組。將年齡、性別、隨訪期間偏頭痛發作次數、病程、體質量、吸煙以及血清ET-1、CGRP、NT水平等設為自變量，將是否繼發缺血性腦卒中記為因變量，分析自變量和因變量的關系。變量賦值見表1。

表1 偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中變量賦值

1.4 觀察指標 （1）對比研究組與對照組的血清ET-1、CGRP、NT水平；（2）偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中情況及繼發組與未繼發組的血清ET-1、CGRP、NT水平比較；（3）分析血清ET-1、CGRP、NT水平與缺血性腦卒中發生的關系，記錄缺血性腦卒中發生的影響因素、比值比（OR）及95%置信區間（95%CI）；（4）分析血清ET-1、CGRP、NT水平單獨及聯合預測缺血性腦卒中的效能：其中任一指標預測缺血性腦卒中發生即認為聯合預測發生，記錄各指標預測缺血性腦卒中的截斷值、靈敏度、特異度、曲線下面積（AUC）及95%CI。

1.5 統計學方法 將SPSS 26.0軟件作為統計學工具。計量資料用進行統計描述，采用兩獨立樣本t檢驗進行兩組間比較；計數資料用“%”進行統計描述，采用χ2檢驗進行統計分析。采用logistic多元回歸分析探討偏頭痛繼發缺血性腦卒中的影響因素，受試者操作特征曲線（ROC曲線）分析血清ET-1、CGRP、NT水平對偏頭痛繼發缺血性腦卒中的預測價值。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 研究組與對照組的血清ET-1、CGRP、NT水平對比 研究組的血清ET-1、CGRP、NT水平均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 偏頭痛研究組與健康對照組的血清ET-1、CGRP、NT水平對比/（ng/L，）

表2 偏頭痛研究組與健康對照組的血清ET-1、CGRP、NT水平對比/（ng/L，）

注：ET-1為內皮素-1，CGRP為降鈣素基因相關肽，NT為神經降壓素。

NT 27.52±4.94 32.84±5.46組別對照組研究組例數123 138 ET-1 68.83±12.76 114.14±17.56 CGRP 45.41±8.77 83.85±7.65 8.22＜0.001 t值P值23.60＜0.001 37.82＜0.001

2.2 偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中情況及繼發組與未繼發組的血清ET-1、CGRP、NT水平對比 對138例偏頭痛病人隨訪12～24個月，共有23例繼發缺血性腦卒中，發生率為16.67%（23/138），其中大動脈粥樣硬化型16例，小動脈閉塞型7例；繼發組的血清ET-1、CGRP、NT水平均高于未繼發組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 偏頭痛未繼發組與繼發組的血清ET-1、CGRP、NT水平對比/（ng/L，）

表3 偏頭痛未繼發組與繼發組的血清ET-1、CGRP、NT水平對比/（ng/L，）

注：ET-1為內皮素-1，CGRP為降鈣素基因相關肽，NT為神經降壓素。

NT 31.97±4.75 37.16±6.73 4.44＜0.001組別未繼發組繼發組t值P值例數115 23 ET-1 110.66±15.17 131.49±18.71 5.77＜0.001 CGRP 82.55±7.09 90.32±7.15 4.79＜0.001

2.3 偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中的影響因素繼發組女性、超重人數、吸煙人數占比均高于未繼發組，差異有統計學意義（P＜0.05），年齡大于未繼發組，差異有統計學意義（P＜0.05），隨訪期間偏頭痛發作次數多于未繼發組，差異有統計學意義（P＜0.05），病程長于未繼發組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表4；行logistic回歸分析發現，性別、年齡、隨訪期間偏頭痛發作次數、病程、體質量、吸煙、ET-1水平、CGRP水平、NT水平均是偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中的影響因素，差異有統計學意義（P＜0.05），見表5。

表4 未繼發組與繼發組的偏頭痛病人一般資料對比

表5 偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中影響因素的logistic回歸分析

2.4 血清ET-1、CGRP、NT水平對偏頭痛繼發缺血性腦卒中的預測價值 血清ET-1、CGRP、NT水平聯合預測偏頭痛繼發缺血性腦卒中的靈敏度、AUC均高于單獨預測，均差異有統計學意義（靈敏度：χ2=4.21，P=0.040；χ2=5.45，P=0.020；χ2=6.77，P=0.009；AUC：Z=2.23，P=0.026；Z=2.74，P=0.006；Z=3.00，P=0.002），特異度均與單獨預測差異無統計學意義（χ2=0.11，P=0.74；χ2=0.45，P=0.50；χ2=1.05，P=0.306）。見表6。

表6 血清ET-1、CGRP、NT水平對偏頭痛繼發缺血性腦卒中的預測分析

3 討論

偏頭痛作為一種神經血管紊亂性疾病，其全球患病率約為10%，且其中有約14%的病人終身患病［9］。偏頭痛的發病機制目前尚未清晰，有研究認為其發病與血管擴張及神經管結構有關［10］，也有研究認為除血管擴張和神經管結構外，偏頭痛的發生還與神經遞質有關［11］。缺血性腦卒中是偏頭痛的嚴重并發癥之一，多由動脈狹窄造成的腦血流低灌注、動脈栓塞、小微動脈壁的玻璃樣變、動脈粥樣硬化性血栓、靜脈血栓等原因導致［12］。本研究中，對138例偏頭痛病人隨訪12～24個月，有16例繼發為大動脈粥樣硬化型缺血性腦卒中，7例繼發為小動脈閉塞型缺血性腦卒中，可能是由于偏頭痛在發作時會釋放炎性因子，致使血管內皮功能受損，促進了血栓的形成，且偏頭痛發作時血小板、紅細胞、纖維蛋白原、內皮顆粒等物質的增多會導致病人血液處于高凝狀態，進一步增加了缺血性腦卒中的發病風險。繼發缺血性腦卒中發生率為16.67%，稍低于雷明［13］報道的20.91%，可能與受試病人的病情、個體差異性等有關，但均表明偏頭痛病人存在繼發缺血性腦卒中的風險。因此，臨床應積極探討偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中的危險因素，以為臨床防治提供依據。

此次研究發現，研究組的血清ET-1、CGRP、NT水平均高于對照組，提示偏頭痛病人的血清ET-1、CGRP、NT水平異常升高。此外，本研究發現缺血性腦卒中繼發組的血清ET-1、CGRP、NT水平均高于未繼發組，且經進一步logistic回歸分析發現，血清ET-1、CGRP、NT水平均為偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中的獨立影響因素。ET-1作為一種能收縮血管的活性多肽，對相關細胞信號通路具有激活作用，其大量釋放可造成腦血管的收縮-舒張功能失調，引起腦血管痙攣，導致頭痛發作，而偏頭痛病人體內ET-1水平的升高，會導致其腦部動脈劇烈收縮，且能促進腦部血管平滑肌的肥大，并和血管緊張素協同，造成病人腦部缺血、缺氧、血管內皮細胞損傷，進而誘發缺血性腦卒中的發生。既往研究發現，ET-1會誘導健康大鼠發生腦動脈閉塞［14］。CGRP作為一種降鈣素基因相關表達的活性多肽，對腦血管有舒張作用，且對ET-1存在拮抗作用，ET-1的升高刺激CGRP也隨之升高，而高濃度的CGRP會作用于血管壁引發神經性炎癥，造成腦膜血管擴張、血小板活化、血漿蛋白外滲，進而刺激下丘腦產生疼痛，而偏頭痛病人體內CGRP水平的升高，會導致部分神經纖維的功能喪失，組織的抗損傷能力減弱，進而降低病人機體對缺血性腦卒中的抵抗。Gill等［15］研究發現，服用CGRP類藥物會增加偏頭痛病人血管類疾病的發生率。NT作為由13個氨基酸組成的活性多肽，對機體有舒張血管、降壓及緩解疼痛的作用，推測當病人偏頭痛發作時，因產生的劇烈頭痛及腦血管痙攣刺激了下丘腦釋放NT來緩解癥狀，所以其水平在偏頭痛病人體內增加。周濤、余恒［16］對偏頭痛病人進行藥物治療后，病人體內的NT水平降低，進一步表明改善血清NT水平有利于緩解病人癥狀。而病人體內NT越高，表示偏頭痛越嚴重，當偏頭痛病人頭痛發作時可引發劇烈的腦血管痙攣，導致局部血液循環障礙，促使缺血性腦卒中的發生概率增加。Nicoli等［17］通過統計學模型分析發現，體內NT的增加與缺血性腦卒中的發生相關。另行ROC分析發現三者聯合預測偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中的靈敏度和AUC均高于單獨預測，特異度與單獨預測相當，提示血清ET-1、CGRP、NT聯合有助于預測缺血性腦卒中的發生風險。因此，臨床可采用血清因子聯合預測的方式對偏頭痛病人的病程進行監測，以便及時發現和治療其繼發的缺血性腦卒中，降低臨床危害。

此次研究還發現，性別、年齡、隨訪期間偏頭痛發作次數、病程、體質量、吸煙也是偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中的影響因素。偏頭痛多發于青年女性，部分由經期誘發，且女性先兆性偏頭痛的可能性更高，而具有先兆性的偏頭痛更易繼發缺血性腦卒中；作為缺血性腦卒中的不可干預因素，年齡越大的病人其腦血管的密度、張力和直徑均會降低，致使腦部血流量減少，更易繼發缺血性腦卒中；研究資料顯示，雖然偏頭痛的疼痛程度與缺血性腦卒中關系不大，但發作次數與之呈正相關［18］；病程越長的偏頭痛病人其腦部血管因長期反復收縮可能會造成血管反應性受損，進而導致內皮細胞功能的紊亂、血小板凝集、炎性因子激活，從而致使繼發缺血性腦卒中［19］；長期處于超重狀態的病人其血液黏滯度較體質量正常病人更高，出現血栓的可能性更大，從而繼發缺血性腦卒中；長期吸煙會造成內皮細胞損害和血液中的NO濃度升高，從而降低血管內皮的抗氧化能力，促使動脈粥樣硬化的發生，進而導致病人繼發缺血性腦卒中［20］。因此，建議臨床加強上述影響因素中可調控因素的監控，以降低偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中的風險。

綜上，本研究的創新在于將偏頭痛病人體內部分血清因子水平變化與缺血性腦卒中的繼發聯系起來，并采用統計學方法分析偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中的影響因素及血清ET-1、CGRP、NT水平對缺血性腦卒中發生的預測效能，有利于對偏頭痛病人缺血性腦卒中的繼發進行預防。本研究中，偏頭痛病人的血清ET-1、CGRP、NT水平偏高，且為偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中的危險因素，血清ET-1、CGRP、NT水平聯合檢測對偏頭痛病人繼發缺血性腦卒中的預測效能理想，可作為臨床監控指標，指導缺血性腦卒中的診斷和治療。