一例牛布魯氏菌病的實驗室診斷與防治建議

李維蓬，王正榮，張艷艷，孫艷，薄新文*

（1.石河子大學動物科技學院，新疆 石河子 832000；2.省部共建綿羊遺傳改良與健康養殖國家重點實驗室/新疆農墾科學院畜牧獸醫研究所）

布魯氏菌病是由布魯氏桿菌引起的一種可以感染牛、羊和人類的一種傳染病。從畜間的疾病傳播來講，屬于二類動物疫病。近年來，新疆部分地區實行新政策，通過建設規模化集中養殖小區將牛羊養殖由散養轉為集中養殖，從而改善了當地混亂養殖帶來的部分環境問題以及管理問題，但由于牲畜流通交易頻繁，加之養殖戶對于布魯氏菌病的認識不到位，導致一些地區人畜布魯氏菌病感染數量急劇上升，對畜牧業的安全生產產生了一定的影響，對公共衛生安全造成了一定的挑戰[1]。在牛羊養殖生產中，各養殖戶之間布魯氏菌病疫情多由生產環節當中的不正當操作，接觸帶病畜引發；畜間布魯氏菌病疫情的發生，多數是由于未能嚴格按照防疫規定，在交易環節未對牲畜進行有效的布魯氏菌病檢測，購入后不分圈觀察，直接混養導致[2]。本文通過一起由養殖戶報告的疑似牛布魯氏菌病案例及檢測過程，淺析布魯氏菌病防控措施和建議，為基層工作人員能夠更好的確立布魯氏菌病處理辦法，以及相關人員開展布魯氏菌病防控提供參考[3]。

1 病例情況介紹

2022年6月9日，伊犁某養殖小區內一新建牛養殖場的母牛出現流產現象，駐場獸醫檢查后未找出具體原因，隨后場主向其管轄區獸醫站進行了反映，管轄區獸醫站根據伊犁地區牛布魯氏菌病流行情況及相關防治辦法，指派駐場獸醫對該可疑流產牛進行了隔離。6月20日場主聯系新疆農墾科學院畜牧獸醫研究所對該場進行技術援助和指導。6月21日，新疆農墾科學院技術援助人員對該場共22只成年母牛編號后進行了采血與保存，計劃回實驗室后采用虎紅平板凝集試驗進行布魯氏菌病的初步篩查。

2 病因調查

2.1 牛場情況

該牛場現有存欄牛62頭，品種為安格斯牛、荷斯坦牛和黃牛，飼養方式為圈養加放牧，場主過去未飼養過牛，于2021年9月開始養牛。牛的來源多為從本地其他養殖戶手中購入，由于場主缺乏相關防疫知識，購入牛時未能索要布魯氏菌病檢測證明或疫苗接種證明。

2.2 疫苗使用情況

據場主陳述，2021年9月從當地停業牛場一次性收購了30多只牛，購入時不清楚疫苗使用情況。而后又在當地多次購買繁育牛，至今場內包括自繁育的小牛共62只，其中自繁育牛未接種過布魯氏菌病相關疫苗。

2.3 臨床癥狀

經現場查看，所有牛外觀正常，膘情良好，體格健壯，圈內公母牛混養，自行趴跨。據場主反映，個別牛有屢配不孕的情況。

由于布魯氏菌病對人有一定感染力，且流產牛沒有其他臨床癥狀，不建議進行解剖檢查。

3 實驗室診斷

6月24日，實驗室對采集的22份成年母牛血清樣本進行虎紅平板凝集試驗，將30 μL血清與30 μL虎紅平板凝集試驗抗原均勻混合靜置觀察，其中0862#樣本為陽性（+++）。6月28日，對陽性血清樣本進行試管凝集試驗，1∶100倍稀釋呈陽性，與比濁管4號（125 μL生理鹽水+375 μL等倍稀釋抗原混勻）清亮程度相同，根據2018版布魯氏菌病實驗室診斷規定，競爭ELISA試驗（cELISA）或試管凝集試驗可作為最終定性。

4 結果分析

0862#母牛為2021年9月在當地購入，購入時不清楚是否接種疫苗，賣方也未出示布魯氏菌病檢測證明，購入后至今未接種布魯氏菌病相關疫苗，截至2022年6月已飼養9個月，布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗以及后續的試管凝集定性均為陽性。根據《布魯氏菌病防治技術規范》相關規定，對成年動物監測時，豬、羊在5月齡以上，牛在8月齡以上，懷孕動物則在第1胎產后半個月至1個月間進行；對布魯氏菌疫苗S2株、M5株、S19株免疫接種過的動物，在接種后18個月（豬接種后6個月）進行[4]。依據“虎紅平板凝集試驗陽性與試管凝集試驗陽性”，判定0862#牛為布魯氏菌病陽性確診。

5 處理與消毒

目前尚無針對牛布魯氏菌病的特效藥物，無法有效救治病牛，建議將布魯氏菌病陽性牛撲殺并進行無害化處理。隨后要求該養殖場將場內健康牛和疑似牛分圈管理，并禁止場內牛流出[5]。

提醒養殖戶按照布魯氏菌病消毒規范將所有圈舍做到全面消毒。首先是徹底將圈內地板、墻面和水槽料槽等清理干凈。其次要在圈舍地面鋪設好一定厚度的干燥秸稈或稻草，進行焚燒，用高溫滅菌，焚燒時務必有人在旁照看，防止失火，待火燃盡后清理殘余灰燼。同時用消毒液對墻體、飼槽、水槽、地面等徹底噴灑，使消毒液自行下流，連續3日，每天1次。而且要用潔凈的水清洗飼喂槽，隨后牛分圈舍飼養。清掃消毒人員務必要做好個人防護，佩戴醫用防護口罩、乳膠手套、鞋套等防護用具，保證接觸牛時無外傷。如果條件允許，亦可將原牛舍進行銷毀和滅菌處理，在養殖場地重新修建圈舍，且在今后每年都需開展有關疫病的檢測[6]。如果在飼料、牛糞、飼料槽等處檢測出布魯氏菌，則應將上述物品集中運至養殖基地外進行焚燒處理，避免病菌蔓延（切記不可深埋，因為布魯氏菌有一定幾率會隨地下水滲透至水源地，造成更大范圍的傳播）。

6 體會和建議

布魯氏菌病是當前牧區常見又難以處理的一種人畜共患疾病。目前，基層地區在牛布魯氏菌病防控工作中雖然可以檢測出病畜，但要做好正確的處理是十分困難的，雖然無害化處理后養殖戶會得到一定的補貼，但終因不及一頭牛的價值，有的養殖場戶為了減少損失，會偷偷將一些檢測出布魯氏菌病的牛低價售出，這些病牛進入市場后，將嚴重威脅到其他牛群以及消費者的健康。消滅布魯氏菌病是一件利在千秋的大工程，需要職能部門和養殖戶共同的努力與犧牲，由于一些養殖場對于牛布魯氏菌病的關注不到位，輕視牛布魯氏菌病防治工作。因此，加強布魯氏菌病牛無害化處理，普及牛布魯氏菌病相關防治知識是十分重要的。在當下，還應該充分運用新媒體，做好疫病防疫宣傳，幫助更多的養殖人員掌握相關防治方法。在基層需要做好宣傳資料的分發，利用村鎮廣播、電視、講座等方式進行防疫知識科普，制作防疫手冊，使用戶在生產過程中更好地運用[7]。

在牛的養殖中，若想避免布魯氏菌病在牛群中傳播，應依照自繁自養的原則，避免疫病從外界種群傳入場內種群，培育健康無病的牛群。若場內必須引種，則要提前做好調查工作，不可以從疫區引種，嚴禁在疫病高發期進行跨區引種。而且要向引種的養殖場索要疫苗接種證明，以為今后的疫苗接種計劃保留資料，保證引進后的疫苗接種工作[8]。引種后的牛應隔離飼養30～60 d，在這期間觀察其身體狀況，確保沒有任何異常的情況下方可入群。