扶桑根基腐爛病防治藥劑篩選

霍 行,黃旭光*,楊思霞,陸炎松,趙建文,黃愛(ài)玲

(1.南寧市園林科研所,廣西 南寧 530011;2.南寧市綠化工程管理中心,廣西 南寧 530011)

朱槿(Hibiscusrosa-sinensis),又名大紅花、扶桑、佛桑等,是錦葵科木槿屬小喬木或常綠灌木,花大色艷,品種多樣,不僅是斐濟(jì)、馬來(lái)西亞、蘇丹等國(guó)的國(guó)花,同時(shí)也是我國(guó)廣西南寧市的市花[1,2]。近40年來(lái),南寧市致力于朱槿的栽培與推廣應(yīng)用,開(kāi)滿在綠城大街小巷的朱槿花以其獨(dú)特的審美特質(zhì),將日益開(kāi)放與騰飛的南寧城市內(nèi)涵和形象刻在每一位到過(guò)南寧的游客心上。朱槿株高通常為1～3 m,最高可達(dá)5 m。花期較長(zhǎng),花型百變,花色艷麗,可與國(guó)花牡丹媲美,素有木牡丹、朱槿牡丹的美譽(yù),被譽(yù)為“中國(guó)薔薇”“南國(guó)牡丹”[3]。

扶桑根基腐爛病是一種由變紅鐮刀菌(Fusariumincarnatum)引起的病害,普遍發(fā)生于朱槿上,是朱槿栽培過(guò)程中一種常見(jiàn)的真菌性病害,成株、扦插苗均可受害。該病害發(fā)生初期植株上的一個(gè)枝條或幾個(gè)枝條上先發(fā)病,枝條上出現(xiàn)水漬狀褐色病斑,隨著病情發(fā)展,病斑擴(kuò)大至整株軀干,葉片被侵染時(shí)葉尖出現(xiàn)黃褐色病斑,病情后期倒掛在莖稈上或脫落;發(fā)病嚴(yán)重時(shí)全株枯死,根部變黑腐爛[4]。該病害可全年發(fā)生,夏、秋兩季發(fā)病尤為嚴(yán)重,秋季正值朱槿盛花期,如果該病害的發(fā)展未能得到及時(shí)的控制,將會(huì)影響到朱槿花的品質(zhì),進(jìn)而影響朱槿全年的產(chǎn)量。目前該病害已經(jīng)嚴(yán)重阻礙朱槿新品種的擴(kuò)繁、栽培進(jìn)程,因此篩選出有效防治該病害的殺菌劑并應(yīng)用于生產(chǎn)中迫在眉睫。

目前,國(guó)內(nèi)外關(guān)于朱槿病害的研究主要集中在朱槿病毒(曲葉)病上[5-8],真菌性病害的研究并不多見(jiàn),國(guó)外曾報(bào)道過(guò)的朱槿真菌性病害,僅有Choanephorainfundibulifera[9]、Sclerotiumrolfsii[10]、Phyllostictadioscoreae[11]、Colletotrichumgloeosporioides[12]等病原真菌;國(guó)內(nèi)相關(guān)報(bào)道也并不多,僅有朱槿莖腐病[13]以及《中國(guó)花卉病蟲(chóng)害診治圖譜(上卷)》中記載的扶桑根基腐爛病、扶桑炭疽病、扶桑灰霉病、扶桑葉斑病、扶桑煤污病。而朱槿真菌性病害防治技術(shù)研究國(guó)內(nèi)外目前未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。本研究團(tuán)隊(duì)在與全國(guó)朱槿種植的花卉研究技術(shù)員進(jìn)行學(xué)術(shù)交流時(shí)發(fā)現(xiàn),由于一直沒(méi)有找到能夠有效防治扶桑根基腐爛病的殺菌劑,當(dāng)?shù)孛缙怨芾砣藛T們只能盲目施用農(nóng)藥,導(dǎo)致防治效果較差,病害的發(fā)展沒(méi)有得到有效的控制。為了篩選能夠有效防治扶桑根基腐爛病的殺菌劑,本研究開(kāi)展了殺菌劑的室內(nèi)毒力試驗(yàn)以及田間藥效試驗(yàn),以期為該病害的田間化學(xué)藥劑防治提出精準(zhǔn)的技術(shù)指導(dǎo),為其他朱槿真菌性病害防治技術(shù)研究提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

供試的病原菌株MPZJ-1,由南寧市園林科研所科研員霍行采集自廣西南寧市西鄉(xiāng)塘區(qū)石埠朱槿苗圃采集扶桑根基腐爛病新鮮發(fā)病的病株,采用組織分離法[14]分離純化后獲得,經(jīng)過(guò)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定,確定MPZJ-1為變紅鐮刀菌(F.incarnatum)。

1.2 供試殺菌劑

在查閱過(guò)相關(guān)文獻(xiàn)之后,本研究團(tuán)隊(duì)決定挑選30種市面上曾用于防治鐮刀菌引起的病害的殺菌劑開(kāi)展實(shí)驗(yàn),藥劑清單如下:40%腈菌唑懸浮劑(一帆生物科技集團(tuán)有限公司),430 g/L戊唑醇懸浮劑(一帆生物科技集團(tuán)有限公司),325 g/L苯甲·嘧菌酯懸浮劑(一帆生物科技集團(tuán)有限公司),25%嘧菌酯懸浮劑(英國(guó)先正達(dá)有限公司),25%溴菌腈乳油(江蘇托球農(nóng)化股份有限公司),20%抑霉唑水乳劑(一帆生物科技集團(tuán)有限公司),70%甲基硫菌靈可濕性粉劑(江蘇龍燈化學(xué)有限公司),80%代森錳鋅可濕性粉劑(利民化工股份有限公司),68%精甲霜·錳鋅可濕性粉劑(一帆生物科技集團(tuán)有限公司),50%多菌靈可濕性粉劑(四川潤(rùn)爾科技有限公司),15%三唑酮可濕性粉劑(四川國(guó)光農(nóng)化股份有限公司),75%三環(huán)唑可濕性粉劑(一帆生物科技集團(tuán)有限公司),12.5%烯唑醇可濕性粉劑(四川國(guó)光農(nóng)化股份有限公司),80%烯酰嗎啉水分散粒劑(陜西海容德植物激素研究所有限公司),60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑(石家莊寶豐化工有限公司),75%百菌清可濕性粉劑(英國(guó)先正達(dá)有限公司),75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑(石家莊寶豐化工有限公司),30%吡唑醚菌酯懸浮劑(浙江威爾達(dá)化工有限公司),30%噁霉靈水劑(四川潤(rùn)爾科技有限公司),20%腐霉利懸浮劑(山東海訊生物科技有限公司),29%吡萘·嘧菌酯懸浮劑(英國(guó)先正達(dá)有限公司),4%春雷霉素可濕性粉劑(陜西麥克羅生物科技有限公司),25%氟烯菌酯懸浮劑(江蘇省農(nóng)藥研究所股份有限公司),450 g/L咪鮮胺乳油(富美實(shí)中國(guó)投資有限公司),667.5 g/L氟菌霜霉威懸浮劑(拜耳中國(guó)有限公司),500 g/L異菌脲懸浮劑(富美實(shí)中國(guó)投資有限公司),25%啶菌噁唑乳油(杭州中潤(rùn)生物科技有限公司),43%戊唑·百菌清懸浮劑(廣東植物龍生物技術(shù)股份有限公司),6%低聚糖素水劑(海南正業(yè)中農(nóng)高科股份有限公司),25 g/L咯菌腈懸浮劑(英國(guó)先正達(dá)有限公司)。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 30種殺菌劑對(duì)扶桑根基腐爛病病原菌的抑制作用

采用生長(zhǎng)速率法[15]測(cè)定30種殺菌劑對(duì)扶桑根基腐爛病的抑制作用。按照高倍-中倍-低倍的梯度設(shè)計(jì),對(duì)30種殺菌劑的抑菌效果進(jìn)行初步篩選。用無(wú)菌水將每種殺菌劑配成所需質(zhì)量濃度的母液,根據(jù)不同質(zhì)量濃度所需劑量,用移液槍將母液分別加入到溫度降至40℃左右的滅菌定量(50 mL)PDA培養(yǎng)基中,搖勻后倒入培養(yǎng)皿制成藥平板,使藥劑稀釋倍數(shù)分別為500倍、1 000倍、1 500倍,以添加等量無(wú)菌水的PDA平板為空白對(duì)照。將病原菌菌株MPZJ-1培養(yǎng)4 d,在菌落邊緣打取直徑6 mm的菌餅,移入加藥的PDA平板中央,置28℃的恒溫光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng),4 d后用十字交叉法測(cè)量菌落直徑,并計(jì)算抑菌率。每處理3次重復(fù)。

1.3.2 9種殺菌劑室內(nèi)毒力測(cè)試

挑選抑制作用較強(qiáng)的9種殺菌劑,采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定其對(duì)扶桑根基腐爛病病原菌的毒力大小。這9種殺菌劑在稀釋倍數(shù)為1 500倍的條件下,抑菌率均為100%,將1 500的稀釋倍數(shù)換算成每種殺菌劑對(duì)應(yīng)的質(zhì)量濃度,以該質(zhì)量濃度作為參考,每種殺菌劑各自設(shè)計(jì)5個(gè)梯度質(zhì)量濃度(表1),使用無(wú)菌水配置。試驗(yàn)操作步驟、培養(yǎng)方法、抑菌率計(jì)算方法同1.3.1,使用DPS 9.50軟件計(jì)算EC50。

表1 9種殺菌劑室內(nèi)毒力測(cè)定的濃度設(shè)置

1.3.3 田間藥效試驗(yàn)

選擇在毒力測(cè)定試驗(yàn)中表現(xiàn)最好的2種殺菌劑及表現(xiàn)中等的2種殺菌劑開(kāi)展田間藥效試驗(yàn)。田間藥效試驗(yàn)分兩個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)實(shí)施:試驗(yàn)點(diǎn)1為南寧市花卉公園苗圃,苗圃中朱槿樹(shù)齡2年;試驗(yàn)點(diǎn)2為南寧市石埠朱槿種質(zhì)資源苗圃,朱槿樹(shù)齡3年。每個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)均設(shè)5個(gè)處理,每個(gè)處理3次重復(fù),每次重復(fù)3株樹(shù)。藥劑使用的稀釋倍數(shù)參照廠家推薦的大田施用劑量。具體分別為:60%唑醚代森聯(lián)水分散粒劑1 500倍液、75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑1 500倍液、20%抑霉唑水乳劑1 000倍液、325 g/L苯甲·嘧菌酯懸浮劑1 000倍液、清水對(duì)照。

扶桑根基腐爛病初始發(fā)病時(shí)(2022年7月20日)開(kāi)始施藥,每個(gè)處理共噴施3次同種藥劑,施藥間隔7～10 d。第3次施藥后10 d(2022年8月24日)進(jìn)行病情調(diào)查,對(duì)處理區(qū)每株朱槿樹(shù)按東、南、西、北、中5點(diǎn)取樣,每點(diǎn)調(diào)查一個(gè)枝條,每個(gè)枝條調(diào)查5片葉,記錄調(diào)查的總?cè)~數(shù)和各級(jí)病葉數(shù)。

扶桑根基腐爛病病情分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為[16]:

0級(jí):無(wú)病;

1級(jí):病斑面積占整片葉面積的5%以下;

3級(jí):病斑面積占整片葉面積的6%～15%;

5級(jí):病斑面積占整片葉面積的16%～25%;

7級(jí):病斑面積占整片葉面積的26%～50%;

9級(jí):病斑面積占整片葉面積的51%以上。

計(jì)算公式為:

病情指數(shù)=[∑(各級(jí)發(fā)病葉片數(shù)×該病級(jí)數(shù))/(調(diào)查總?cè)~片數(shù)×最高級(jí)數(shù))×100

防治效果(%)=[(對(duì)照病情指數(shù)-處理病情指數(shù))/對(duì)照病情指數(shù)]×100

1.4 數(shù)據(jù)處理

毒力回歸方程與有效抑制中濃度(EC50)及其相關(guān)系數(shù)使用DPS 9.50計(jì)算所得,同時(shí)采用DPS 9.50田間試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行鄧肯氏新復(fù)極差法(DMRT)生物統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 30種殺菌劑對(duì)扶桑根基腐爛病病原菌的抑制作用

試驗(yàn)結(jié)果表明,30種供試殺菌劑中,大部分殺菌劑對(duì)扶桑根基腐爛病病菌F.solani菌絲生長(zhǎng)都有較好的抑制作用,其中唑醚·代森聯(lián)、肟菌·戊唑醇、嘧菌酯、戊唑醇、腈菌唑、溴菌腈、苯甲·嘧菌酯、抑霉唑、啶菌噁唑等9種殺菌劑對(duì)F.solani菌絲生長(zhǎng)抑制效果最好,在1 500倍稀釋濃度下抑菌率達(dá)到100%;吡唑醚菌酯、咪鮮胺等兩種殺菌劑對(duì)F.solani菌絲生長(zhǎng)也有較好的抑制效果,抑菌率在80%以上;多菌靈、三唑酮、烯酰嗎啉、百菌清等4種殺菌劑的抑菌效果最差,菌絲生長(zhǎng)抑制率均低于30%,其中多菌靈最低,僅為6.34%(表2)。

表2 30種殺菌劑對(duì)F. solani菌絲生長(zhǎng)的抑制作用

2.2 9種殺菌劑的室內(nèi)毒力測(cè)試

室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明,9種殺菌劑中75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑對(duì)F.incarnatum的毒力最強(qiáng),EC50為0.0030 μg/mL,25%嘧菌酯懸浮劑對(duì)F.incarnatum的毒力最弱,EC50為0.0667 μg/mL(表3)。

表3 9種殺菌劑對(duì)菌株F. solani的毒力測(cè)定

2.3 田間防治效果

選取毒力測(cè)定試驗(yàn)中表現(xiàn)最好的2種殺菌劑(75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑、20%抑霉唑水乳劑)和表現(xiàn)中等的2種殺菌劑(325 g/L苯甲·嘧菌酯、60%唑醚代森聯(lián))進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)。田間防效結(jié)果表明,同一種藥劑在南寧市花卉公園苗圃和南寧市石埠朱槿種質(zhì)資源苗圃的防效表現(xiàn)基本一致,差異不顯著(表4)。75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑和20%抑霉唑水乳劑對(duì)扶桑根基腐爛病的防效最好,均達(dá)70%以上;兩者對(duì)扶桑根基腐爛病防效也不存在顯著差異。60%唑醚代森聯(lián)對(duì)扶桑根基腐爛病的防效次之,防效在53.84～56.76%之間;在兩個(gè)試驗(yàn)地點(diǎn)其防效均顯著低于75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑和20%抑霉唑水乳劑的防效。325 g/L苯甲·嘧菌酯的防效最差,在兩個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)的防效均低于50%,顯著低于前三種藥劑的防效。

表4 4種殺菌劑對(duì)扶桑根基腐爛病的田間防效

3 結(jié)論與討論

鐮刀菌Fusariumsp.、平臍蠕孢菌BipolarissorokinianaShoemaker、疫霉Phytophthora等都可以造成植物根部的腐爛進(jìn)而引起根腐病[17-19]。鐮刀菌是一類(lèi)能夠引起植物病害的真菌,普遍存在于動(dòng)植物體內(nèi)及土壤中,廣泛分布于世界各地,危害植物地上部分癥狀表現(xiàn)為葉片萎蔫、莖部腐爛,危害地下部分癥狀表現(xiàn)為根部腐爛。變紅鐮刀菌可侵染魔芋[20]、核桃[21]、棗[22]、玉米[23]、甜瓜[24]、棉花[25]、獼猴桃[26]、二月蘭[27]等,造成嚴(yán)重危害。扶桑根基腐爛病是朱槿常見(jiàn)真菌病害之一,但是關(guān)于它的化學(xué)防治殺菌劑卻未見(jiàn)有研究報(bào)道。

本研究結(jié)果表明,在選取的30種殺菌劑中,60%唑醚代森聯(lián)水分散粒劑、75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑、25%嘧菌酯懸浮劑、430 g/L戊唑醇懸浮劑、40%腈菌唑懸浮劑、25%溴菌腈微乳劑、325 g/L苯甲·嘧菌酯懸浮劑、20%抑霉唑水乳劑、25%啶菌噁唑乳油等9種殺菌劑對(duì)扶桑根部腐爛病病菌F.solani菌絲生長(zhǎng)抑制效果最好,在稀釋倍數(shù)為1 500倍的濃度下抑菌率可達(dá)100%;選取這9種殺菌劑進(jìn)行毒力測(cè)定,對(duì)扶桑根部腐爛病病菌的毒力測(cè)定表明,在選取的9種殺菌劑中,75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑對(duì)扶桑根部腐爛病菌的毒力作用最強(qiáng),EC50值為0.0030 μg/mL,20%抑霉唑水乳劑次之,EC50值為0.0191 μg/mL,25%啶菌噁唑乳油、25%溴菌腈微乳劑、325 g/L苯甲·嘧菌酯懸浮劑、430 g/L戊唑醇懸浮劑、60%唑醚代森聯(lián)水分散粒劑毒力作用一般,EC50值分別為0.0256 μg/mL、0.0320 μg/mL、0.0322 μg/mL、0.0458 μg/mL、0.0559 μg/mL,40%腈菌唑懸浮劑和75%醚菌酯懸浮劑的毒力作用最差,EC50值分別為0.0654 μg/mL、0.0667 μg/mL。

田間防治試驗(yàn)結(jié)果表明,75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑和20%抑霉唑水乳劑對(duì)扶桑根基腐爛病的防效最好,防效均達(dá)65%以上。75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑是一種新型低毒內(nèi)吸性殺菌劑,其兼具肟菌酯與戊唑醇的作用特性,具有殺菌譜廣、減少作物抗藥性等優(yōu)點(diǎn)[28],對(duì)玉米大斑病、灰斑病、香蕉葉斑病均表現(xiàn)出較好的防效[29]。抑霉唑是一種內(nèi)吸性殺菌劑,屬于14-α-脫甲基酶抑制劑類(lèi)殺菌劑(14-α-demethylation inhibitors,DMIs)中的咪唑類(lèi),該藥劑用于防治馬鈴薯干腐病有卓越功效,同時(shí)也可以應(yīng)用于水果、蔬菜和觀賞植物的真菌病害的防治[30]。75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑和20%抑霉唑水乳劑都具有高效、低毒、對(duì)環(huán)境友好的優(yōu)點(diǎn),可作為扶桑根基腐爛病防治的藥劑在大田進(jìn)行推廣應(yīng)用。