基于細胞自噬JNK信號通路探討通絡糖泰方對高糖環境下大鼠雪旺細胞的影響

李周泉 李宇宸 唐瑩 李慧 楊莉君 姜迎宏 殷麗平

(成都中醫藥大學 1附屬醫院內分泌科,四川 成都 610075;2研究生院)

糖尿病周圍神經病變(DPN)是一種困擾超半數糖尿病患者造成其殘疾甚至死亡、嚴重影響生存質量的糖尿病并發癥〔1〕。雪旺細胞是一種保護神經元、促進軸突再生,起神經修復作用的膠質細胞〔2〕,它在DPN發生發展中至關重要,異常代謝因素持續損傷雪旺細胞會阻礙周圍神經修復〔3〕。自噬是一種細胞適應應激,將待降解蛋白質和細胞器進行自我更新以滿足代謝需要和支持細胞生長生存的過程〔4〕,研究顯示調控雪旺細胞自噬可能是一種靶向治療DPN的手段〔5〕,然而Gomez-Sanchez等〔6〕發現雪旺細胞自噬可能并非通過傳統常見的雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信號通路,而是通過c-JUN氨基末端蛋白激酶(JNK)信號通路實現對自噬的調節,但相關研究仍處于初級階段〔7〕。通絡糖泰方是成都中醫藥大學附屬醫院研制的一種中藥制劑,由黃芪、當歸、地骨皮、水蛭、蠶沙、川牛膝、玄參、赤芍和冰片等藥物構成〔8〕,在臨床應用上取得良好反饋,在基礎研究中發現其可一定程度下調大鼠坐骨神經磷酸化(p)-JNK、JNK mRNA、半胱天冬蛋白酶(Caspase)-3 蛋白的表達,上調促生長因子(IGF)-1 mRNA的表達,降低大鼠血清腫瘤壞死因子(TNF)-α、白細胞介素(IL)-6、C反應蛋白(CRP)、髓鞘堿性蛋白(MBP)水平,提高大鼠感覺神經傳導速度等〔9～12〕。因此本研究主要基于JNK信號通路,探討通絡糖泰方在高糖環境下對大鼠雪旺細胞自噬相關蛋白的影響。

1 材料與方法

1.1實驗動物、細胞、主要試劑及儀器 SPF級SD雄性大鼠30只,體質量200～250 g,由成都森威實驗動物有限公司提供。……