復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清生化指標的影響

楊 鵬，李 銳，2*，查紅剛，葉志祥，史慶超，張志勇

（ 1. 內江師范學院，四川 內江 641100 ；2. 長江上游魚類資源保護與利用四川省重點實驗室，四川 內江 641100 ；3. 內江農業科技園區管理委員會，四川 內江 641201 ； 4. 內江市水產技術推廣站，四川 內江 641100 ）

澳洲淡水龍蝦原產自澳洲，具有營養價值高、肉質鮮美、產肉率高、易養殖等特點，目前已成為我國重要的經濟蝦養殖品種之一[1]。隨著澳洲淡水龍蝦在我國的養殖規模不斷擴大，病害發生率逐年攀升，給澳洲淡水龍蝦養殖戶帶來嚴重的經濟損失。與其他經濟蝦類相同，抗生素類藥物成為澳洲淡水龍蝦養殖過程中預防和治療疾病的首選，然而抗生素濫用會導致一系列問題，如藥物殘留、腸道菌群紊亂、二次污染等。因此，開發綠色、環保的新型飼料添加劑已成為近年來的研究重點，而植物多糖因其安全、綠色、高效、無殘留等特性備受關注。

無花果（Ficus caricaLinn.）是桑科、榕屬植物，具有健脾開胃、清熱潤腸、潤肺止咳、消腫解毒、抗腫瘤、降壓、輕瀉、助消化等多種功能[2]。五倍子也是一種傳統中藥材，五倍子多糖具有斂肺降火、澀腸止瀉、斂汗止血、收濕斂瘡以及抗腫瘤等功效[3]。有研究表明，餌料中添加無花果多糖或五倍子多糖能夠提高魚類生長性能，增強機體免疫力[4-6]。然而關于上述多糖在澳洲淡水龍蝦養殖中的報道較少，尤其兩種多糖復合應用的研究更加匱乏。基于此，本試驗旨在探討餌料中添加復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血液生化指標的影響，以期為復合植物多糖在澳洲淡水龍蝦產業健康養殖中的應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗餌料

復合植物多糖由五倍子多糖和無花果多糖兩種多糖組成，均按照水提法獲得[7]。原料五倍子和無花果均購自當地農貿市場。根據澳洲淡水龍蝦的營養需求，以魚粉、豆粕、花生麩和啤酒酵母、魚油、豆油、大豆卵磷脂等原料配制兩組澳洲淡水龍蝦餌料。對照組龍蝦投喂基礎餌料，試驗組使用復合植物多糖替代基礎餌料中1%的豆粕。基礎餌料組成及營養水平見表1。

表1 基礎餌料組成及營養水平（干物質基礎）Tab.1 Base diet composition and nutrient level(dry matter basis) 單位：%

1.2 試驗設計及飼養管理

試驗動物澳洲淡水龍蝦購自重慶市榮昌區澳洲淡水龍蝦良種繁育場。試驗開始前，將澳洲淡水龍蝦置于室外池塘網箱中暫養14 d以適應環境，暫養期間投喂常規澳洲淡水龍蝦配合餌料。正式試驗開始后，將180尾澳洲淡水龍蝦隨機分為對照組和試驗組，每組3個網箱（每個網箱即一個重復），每個網箱30尾蝦。對照組龍蝦投喂基礎餌料，試驗組使用復合植物多糖替代基礎餌料中1%的豆粕。試驗期8周。

養殖試驗期間采用少量多次飽食投喂方式，投喂量為蝦體重的5%～10%。養殖采用池塘流水養殖，水體持續曝氣，水溫為22～28 ℃，pH值7.0～8.0，溶氧量為5～8 mg/L，氨氮含量≤0.2 mg/L，亞硝酸鹽≤0.1 mg/L。試驗期間定期監測池塘水溫、溶解氧、氨氮和亞硝酸鹽等含量的變化。

1.3 測定指標及方法

1.3.1 樣品采集

養殖試驗結束后，試驗蝦禁食24 h，每個網箱中隨機抽取8尾蝦，適量丁香酚麻醉后采血，采集血液置于1.5 mL離心管中，3 500 r/min 離心10 min，取上清分裝并保存于-80 ℃冰箱中，用于血液生化指標分析。

1.3.2 血清生化指標

谷草轉氨酶（AST）與谷丙轉氨酶（ALT）采用賴式法測定；總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）采用比色法測定；總膽固醇（TC）和甘油三酯（TG）采用單試劑GPOPAP法測定；高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）采用雙試劑直接法測定；上述指標均采用試劑盒（南京建成生物工程研究所）進行測定。

1.4 數據統計與分析

試驗數據采用SPSS 19.0 軟件進行獨立樣本t檢驗。結果以“平均值±標準差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清免疫指標的影響（見表2）

表2 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清免疫指標的影響Tab.2 Effect of compound plant-derived polysaccharides on serum immune indexes of Cherax quadriarinatus 單位：g/L

由表2 可知，與對照組相比，試驗組龍蝦血清TP、ALB、GLB含量均顯著升高（P＜0.05）。

2.2 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清血脂指標的影響（見表3）

表3 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清血脂指標的影響Tab.3 Effect of compound plant-derived polysaccharides on serum lipid indexes of Cherax quadriarinatus 單位：mmol/L

由表3可知，與對照組相比，試驗組龍蝦血清TC、TG、LDL-C 含量均顯著降低（P＜0.05），HDL-C 含量顯著升高（P＜0.05）。

2.3 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清肝臟功能指標的影響（見表4）

表4 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清肝臟功能指標的影響Tab.4 Effect of compound plant-derived polysaccharides on serum liver function indexes of Cherax quadriarinatus 單位：U/mL

由表4 可知，與對照組相比，試驗組龍蝦血清AST 活性顯著降低（P＜0.05），而ALT活性差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清免疫指標的影響

血液生化指標檢測具有重要的應用價值，可在一定程度上反映水生動物的生理健康情況[8]。ALB是機體一種重要的免疫蛋白，主要由肝臟實質性細胞合成，可用于機體的組織修補和能量供給，也是血液膠體滲透壓的主要組成部分[9]。GLB 是由機體免疫器官制造的一種免疫蛋白，主要在肝臟以外生成，與ALB 共同反映機體對環境的抵抗力[10]。ALB和GLB共同組成TP，當血清中ALB和GLB含量在正常范圍內升高時，可在一定程度上表明機體的免疫力提高[11]。方珍珍等[12]研究發現，投喂含1 200 mg/kg枸杞多糖的餌料后，黃顙魚免疫力顯著增加。吳旋[13]研究表明，在黃顙魚餌料中添加1 200 mg/kg 的黃芪多糖可提高其血清TP和ALB含量。

本試驗結果顯示，使用復合植物多糖替代基礎餌料中1%的豆粕能夠顯著提高澳洲淡水龍蝦血清TP、ALB、GLB的含量，表明復合植物多糖可提高澳洲淡水龍蝦免疫力，結果與前人研究結論相似。

3.2 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清血脂指標的影響

血清中TC 和TG 是機體脂類代謝水平的重要指標之一，TG 是脂類代謝的主要產物，其合成場所主要是肝臟[14]。TC在血液中通常存在于脂蛋白，HDL-C和LDL-C是其主要存在形式。血清中HDL-C 和LDL-C 含量主要反映脂類在機體內的分解與轉運的情況[15]。高密度脂蛋白可將血液中多余的膽固醇運送到肝臟，處理分解為膽酸鹽后排出，防止膽固醇在機體中沉積，進而導致機體膽固醇含量過高。而低密度脂蛋白的作用與高密度脂蛋白的作用相反，主要是將肝臟內的膽固醇轉運到周圍組織加以利用[16]。本試驗中，試驗組龍蝦血清TC和TG含量顯著低于對照組，表明蝦體的脂肪分解代謝能力增強[17]；而HDLC含量提高和LDL-C含量降低，則表明使用復合植物多糖替代基礎餌料中1%的豆粕能夠提高澳洲淡水龍蝦對脂類物質的轉運利用，降低血脂水平，有利于機體健康。

有研究發現，草魚攝食金針菇菇頭后，血清中TG 和TC 含量均顯著下降[18]。此外，譚連杰等[4]研究也表明，餌料中添加0.2%黃芪多糖的降血脂作用很明顯，主要表現為卵形鯧鲹血清TC、TG和LDL-C含量顯著降低，HDL-C含量顯著升高。前人研究表明，植物多糖具有很好的降低血糖血脂的效用，其作用機制主要是通過促進機體胰島素分泌，調節己糖激酶活性，抑制糖異生，抑制脂肪酶的活性、改善脂肪代謝等發揮其降血糖血脂的作用[19]。由此推測，本研究中的復合植物多糖可能也通過上述機制發揮降血脂作用，但有待進一步研究驗證。

3.3 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清肝臟功能指標的影響

血清生化指標中，ALT 和AST 是兩個重要的指標，其活性高低主要反映機體肝臟的健康狀況[11]。ALT 和AST主要存在于肝細胞中，其中ALT 主要存在于肝細胞胞質，而AST則主要存在于肝細胞的線粒體，檢測兩種酶活性是檢驗肝細胞受損情況的靈敏指標之一[9]。正常情況下，血清中ALT 和AST 的活性并不高，但當魚體肝臟功能異常時，肝細胞破裂，肝細胞中的ALT 和AST 釋放到血液中，導致血清中ALT 和AST 活性升高。因此，當魚類血清中ALT和AST的活性升高時，可在一定程度上表明魚體的肝臟功能出現異常[20]。

本試驗結果顯示，與對照組相比，使用復合植物多糖替代基礎餌料中1%豆粕的試驗組龍蝦血清AST活性顯著降低，表明在澳洲淡水龍蝦餌料中使用復合植物多糖替代基礎餌料中1%的豆粕對肝臟健康有利。白東清等[21]研究發現，在金絲魚餌料中添加600～800 mg/L靈芝多糖可顯著降低金絲魚血清AST 活性，結果與本研究結論一致。此外，盧文麒等[22]研究也發現，在歐洲鰻鱺餌料中添加480 mg/kg的香菇多糖可顯著降低其血液AST活性。而楊琳霖等[18]對草魚的研究中發現，與對照組相比，金針菇菇頭組草魚血清AST 活性顯著升高，與本研究結果相反，原因可能由于魚種類、餌料加工工藝、養殖環境、管理條件等差異導致，具體原因有待進一步分析。

4 結論

本研究結果表明，使用復合植物多糖替代基礎餌料中1%的豆粕可顯著提高澳洲淡水龍蝦的血清免疫功能，降低血脂指標，且對龍蝦的肝臟功能具有一定的保護作用。