丹紅注射液聯(lián)合活血化瘀解毒法對(duì)口腔黏膜下纖維化的臨床效果及對(duì)MCP-1、VEGF的影響

魏佳涵 譚 勁 胡 淳

湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院口腔科，湖南長(zhǎng)沙 410000

口腔黏膜下纖維化在臨床上又被稱(chēng)為口腔黏膜下纖維性變，屬于一種慢性進(jìn)行性口腔黏膜疾病，具有癌變傾向，臨床表現(xiàn)為進(jìn)食疼痛、口干、灼痛、吞咽困難以及進(jìn)行性張口受限癥，臨床特征為口腔黏膜顏色蒼白、僵硬，存在纖維條索狀改變[1]。目前臨床上對(duì)于口腔黏膜下纖維化的治療多采用微量營(yíng)養(yǎng)素、糖皮質(zhì)激素、維生素類(lèi)藥物治療，以達(dá)到改變患者口腔黏膜色澤，提高彈性，減輕患者疼痛的目的。但部分患者復(fù)發(fā)率較高，預(yù)后常不良，因此需進(jìn)一步尋找合理有效的治療口腔黏膜下纖維化的方案，以促進(jìn)患者疾病快速恢復(fù)，改善預(yù)后，本研究選取2019 年10 月至2022 年6 月湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院（我院）收治的100 例口腔黏膜下纖維化患者，觀察丹紅注射液聯(lián)合活血化瘀解毒法對(duì)口腔黏膜下纖維化患者的治療效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年10 月至2022 年6 月我院收治的100 例口腔黏膜下纖維化患者，按照隨機(jī)數(shù)表法分為對(duì)照組和研究組，每組各50 例。對(duì)照組男26 例，女24 例；年齡28 ～62 歲，平均（45.0±13.6）歲；病程1 ～3.5 年，平均（2.3±0.9）年。研究組男25 例，女25 例；年齡29 ～60 歲，平均（44.5±12.4）歲；病程1 ～4 年，平均（2.0±0.8）年。兩組患者一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05），具有可比性。本研究已通過(guò)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①臨床檢查結(jié)締組織出現(xiàn)纖維變性診斷為口腔黏膜下纖維化；②簽署知情同意書(shū)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①對(duì)本研究藥物過(guò)敏者；②已接受其他藥物治療；③免疫障礙或合并腫瘤者；④溝通障礙或精神障礙者；⑤合并心腦血管疾病、糖尿病或高血壓者；⑥合并其他口腔病變者；⑦妊娠或哺乳期者。

1.2 方法

兩組患者均行臨床常規(guī)治療：醋酸潑尼松龍注射液（浙江仙琚制藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字 H33021520，規(guī)格：1 ml ∶25 mg）15 ml+利多卡因注射液（哈藥集團(tuán)三精制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H23021157，規(guī)格：5 ml ∶0.1 g）0.5 ml 混合，肌內(nèi)注射。

對(duì)照組在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上采用丹紅注射液進(jìn)行治療，丹紅注射液[山東丹紅制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字 Z20026866，規(guī)格：每支裝10 ml]肌內(nèi)注射，一次2 ～4 ml，1 ～2 次/d，連續(xù)治療2 個(gè)月。

研究組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上聯(lián)合活血化瘀解毒法治療，活血化瘀解毒方：金銀花、白花蛇舌草、赤芍、紅花各10 g，當(dāng)歸、玄參、丹參、生地黃各15 g。對(duì)于疼痛較為顯著的患者加用乳香、沒(méi)藥各10 g；對(duì)于張口困難、口腔黏膜發(fā)白發(fā)硬者加地龍、僵蠶各10 g。水煎服，1 劑/d，早晚分服，連續(xù)治療2 個(gè)月。

1.3 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 兩組張口度、黏膜病損面積比較 采用游標(biāo)卡尺測(cè)量患者治療前后黏膜病損面積以及上、中、下切片牙緣間最大張口度，測(cè)量3 次取平均值。

1.3.2 兩組疼痛、口腔健康影響程度比較 疼痛情況采用視覺(jué)模擬評(píng)分（visual analogue score，VAS）[2]評(píng)價(jià)，分值為0 ～10 分，評(píng)分越高，疼痛越嚴(yán)重。健康影響程度采用口腔健康影響程度量表（oral health impact profile-14，OHIP-14）[3]評(píng)價(jià)，包括口腔功能限制、生理型疼痛、心理障礙、生理障礙、心理不適、社交障礙以及殘障等，共14 個(gè)條目，每個(gè)條目分別記為0 ～4 分，總分為56 分，分?jǐn)?shù)越高說(shuō)明患者口腔健康狀況越差。

1.3.3 兩組炎癥反應(yīng)指標(biāo)比較 抽取患者治療前后清晨空腹靜脈血3 ml，以離心半徑5 cm、轉(zhuǎn)速3000 r/min 離心處理10 min，分離上層血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)白介素（IL）-1、IL-10 水平。

1.3.4 兩組口腔頰黏膜組織中單核細(xì)胞趨化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF） mRNA 表達(dá)量比較 取患者肌層口腔頰黏膜組織，加入1 ml Trizol 研磨為粉末狀，提取口腔頰黏膜組織中總RNA，檢測(cè)RNA純度、含量，使用Takara 逆轉(zhuǎn)錄試劑盒行逆轉(zhuǎn)錄處理后獲得cDNA，采用Primer 5.0 軟件設(shè)計(jì)引物序列，使用RT-PCR 方法檢測(cè)口腔頰黏膜組織中MCP-1、VEGF mRNA 表達(dá)量，采用2-△△Ct方法計(jì)算出需要檢測(cè)的口腔頰黏膜組織中MCP-1、VEGF mRNA 表達(dá)量。MCP-1 引物序列：上游：5’-ATAGCAGCCACCTTCATTCC-3’， 下 游：5’-GCTTCTTTGGGACACTTGCT-3’；VEGF 引物序列：上游：5’-TCGGGCCTCCGAAACCATGA-3’，下游：5’-CCTGGTGAGAGATCTGGTTC-3’；內(nèi) 參β-actin 引 物 序 列： 上 游：5’-CTGG CACCACACCTTCTACAATGAGC-3’， 下 游：5’-GAGGATCTTCATGAGGTAGTCAGT-3’。

1.3.5 兩組治療效果比較[4]根據(jù)患者張口度、病損面積、疼痛程度評(píng)價(jià)治療效果。①顯效：治療后臨床癥狀顯著改善，與治療前比較，張口度改善值＞10 mm，病損面積＜5 cm2，疼痛癥狀消失；②有效：臨床癥狀改善，與治療前比較，張口度改善值在5 ～10 mm，疼痛癥狀顯著改善；③無(wú)效：未達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)，且有加重的趨勢(shì)。治療總有效率=（顯效+有效）例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜ 0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后張口度、黏膜病損面積、疼痛、口腔健康影響程度比較

治療前兩組患者張口度、黏膜病損面積、疼痛、口腔健康影響程度比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05）；治療后，研究組患者張口度高于對(duì)照組，黏膜病損面積、疼痛、口腔健康影響程度低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組患者張口度、黏膜病損面積、疼痛、口腔健康影響程度比較（x ± s）

2.2 兩組患者炎癥反應(yīng)指標(biāo)比較

治療前，兩組患者炎癥反應(yīng)指標(biāo)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05）；治療后，研究組患者IL-1水平低于對(duì)照組，IL-10 水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）。見(jiàn)表2。

表2 兩組患者炎癥反應(yīng)指標(biāo)比較（x ± s）

2.3 兩組患者口腔頰黏膜組織中MCP-1、VEGF mRNA表達(dá)量比較

治療前，兩組患者口腔頰黏膜組織中MCP-1、VEGF mRNA 表達(dá)量比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05）；治療后，研究組患者口腔頰黏膜組織中MCP-1、VEGF mRNA 表達(dá)量低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）。見(jiàn)表3。

表3 兩組患者口腔頰黏膜組織中MCP-1、VEGF mRNA表達(dá)量比較（x ± s）

2.4 兩組患者治療效果比較

研究組患者治療總有效率為96.00%，高于對(duì)照組的82.00%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05），見(jiàn)表4。

表4 兩組患者治療效果比較[n（%）]

3 討論

口腔黏膜下纖維化是一種可侵犯口腔、咽部的慢性炎癥性疾病，臨床癥狀為口腔黏膜起皰、蒼白、口腔黏膜質(zhì)地變硬、刺激痛及漸進(jìn)性張口困難等，嚴(yán)重影響患者身心健康[5]。目前臨床上多采用激素類(lèi)藥物治療，雖可在一定程度上減輕口腔黏膜纖維化患者臨床癥狀，但此類(lèi)藥物易給患者帶來(lái)較大的毒副作用，且治療效果也并不理想[6]。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，口腔黏膜下纖維化的發(fā)生與濕熱毒邪入侵機(jī)體，導(dǎo)致局部經(jīng)絡(luò)運(yùn)行不暢有關(guān)，因此治療應(yīng)以清熱解毒、活血化瘀為原則[7]。活血化瘀解毒方中丹參具有活血化瘀的作用，赤芍、當(dāng)歸具有輔助上述藥物強(qiáng)化活血化瘀的功效，生地黃、玄參具有清熱解毒的作用，金銀花具有清熱解毒的作用，而白花蛇舌草具有散瘀解毒的作用，上述藥物共同組成活血化瘀解毒方，共奏清熱解毒、活血化瘀之功[8-9]。丹紅注射液是由紅花、丹參以及注射用水所組成的一種中成藥，臨床研究顯示，丹紅注射液中含有丹參酮、丹參酚酸、丹參酸、紅花酚苷、紅花黃色素、兒茶酚等多種化學(xué)成分，具有通脈疏絡(luò)、活血化瘀等功效[10-11]。本研究結(jié)果顯示，治療后，研究組患者張口度高于對(duì)照組，黏膜病損面積、疼痛、口腔健康影響程度低于對(duì)照組（P＜ 0.05），研究組患者治療總有效率為96.00%，高于對(duì)照組的82.00%（P＜ 0.05）。可能與兩者具有通脈疏絡(luò)、活血化瘀、清熱解毒的功效相關(guān)。

研究顯示，口腔黏膜下纖維化患者機(jī)體出現(xiàn)炎癥反應(yīng)，且炎性細(xì)胞過(guò)度增殖，而當(dāng)機(jī)體長(zhǎng)期處于炎癥反應(yīng)中時(shí)，可導(dǎo)致黏膜過(guò)度纖維化、張口受限[12]。其中IL-1 屬于一種由內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等所分泌的細(xì)胞因子，具有較多的生物學(xué)功能，為促炎癥因子，可促進(jìn)機(jī)體炎癥反應(yīng)[13]。IL-10 屬于一種抑炎癥因子，屬于IL-10 細(xì)胞因子家族成員，在炎癥反應(yīng)發(fā)生后其水平可顯著升高，可抑制炎癥進(jìn)展[14]。本研究顯示，治療后研究組患者IL-1 水平低于對(duì)照組，IL-10 水平高于對(duì)照組（P＜ 0.05）。可能與丹紅注射液中丹參抗炎作用、活血化瘀解毒方清熱解毒作用相結(jié)合，抑制機(jī)體炎癥反應(yīng)，最終促進(jìn)炎癥細(xì)胞凋亡，而抑制黏膜過(guò)度纖維化有關(guān)。

研究發(fā)現(xiàn)，血液中單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞在特異性趨化因子的作用下會(huì)出現(xiàn)遷移、聚集現(xiàn)象，從而發(fā)揮其生物學(xué)功能，MCP-1 屬于一種具有活化、趨化單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化因子[15]。臨床研究顯示[16]，口腔黏膜下纖維化屬于局灶性硬皮病，疾病發(fā)生早期VEGF 顯著升高，其升高屬于一種代償性反應(yīng)，促進(jìn)微血管再生，擴(kuò)張血管，對(duì)局部血液灌注起到改善作用，同時(shí)VEGF 可促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶分泌，下調(diào)其抑制物，進(jìn)而降低細(xì)胞外基質(zhì)，抑制膠原堆積的作用。但隨著疾病的發(fā)生，VEGF 升高逐漸呈現(xiàn)為失控狀態(tài)，無(wú)法形成正常血管，進(jìn)而促進(jìn)疾病進(jìn)展。本研究顯示，治療后研究組患者口腔頰黏膜組織中MCP-1、VEGF mRNA 表達(dá)量低于對(duì)照組（P＜ 0.05）。可能與丹紅注射液聯(lián)合活血化瘀解毒法可能共同作用，改變機(jī)體代償性反應(yīng)，抑制MCP-1、VEGF 表達(dá)，進(jìn)而抑制膠原堆積，最終起到抑制黏膜過(guò)度纖維化的作用相關(guān)。

綜上所述，丹紅注射液聯(lián)合活血化瘀解毒法可緩解口腔黏膜下纖維化患者疼痛，改善臨床癥狀，減輕炎癥反應(yīng)，抑制MCP-1、VEGF 表達(dá)。