鉀電壓門控通道亞家族C成員3在胃癌組織中的表達及其與腹腔鏡胃癌根治術患者預后的關系△

王世成，余進松，李忠

1南陽市第一人民醫院西區醫院普外科，河南 南陽 473000

2南陽市第一人民醫院普外科，河南 南陽 473000

胃癌是常見的、高發病率、高病死率的消化系統惡性腫瘤，起源于胃黏膜上皮，具有早期診斷難、晚期治療難的特征[1-2]。有研究稱，胃癌患者的預后與淋巴結轉移情況、TNM 分期、病理類型、腫瘤浸潤深度等有關[3-4]，但是無法在疾病早期輕松獲取此類信息，因此需要尋找對腫瘤患者預后進行準確評估的新型生物標志物。鉀電壓門控通道亞 家 族C 成 員3（potassium voltage-gated channel subfamily C member 3，KCNC3）屬于通道蛋白的延遲整流子類別，也是介導可刺激膜的電壓依賴性鉀離子滲透性的完整膜蛋白，目前關于其在腫瘤中作用的研究報道較少[5-7]。本研究檢測KCNC3 在腹腔鏡胃癌根治術患者胃癌組織中的表達，并分析其與胃癌患者臨床特征及預后的關系，為胃癌患者預后的預測提供依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018年2月至2019年6月南陽市第一人民醫院西區醫院、南陽市第一人民醫院收治的行腹腔鏡根治術的胃癌患者的病歷資料。納入標準：①符合《胃癌規范化診療指南（試行）》[8]中關于胃癌的診斷標準，且經胃鏡以及組織病理學檢查確診為胃癌；②接受腹腔鏡胃癌根治術。排除標準：①精神疾病；②合并其他惡性腫瘤；③合并其他器官嚴重病變；④臨床及隨訪資料不完整。根據納入、排除標準，共納入60 例胃癌患者，其中，男性36 例，女性24 例；年齡21～75 歲，平均（53.38±8.23）歲。本研究經醫院倫理委員會批準通過，所有患者均知情同意。

1.2 免疫組織化學法檢測KCNC3 水平

取胃癌組織，用4%多聚甲醛固定、脫水、包埋成石蠟標本，切成約4 μm 的切片，經常規烤片、脫蠟、水化，微波爐抗原修復15 min，山羊血清白蛋白孵育30 min。分別滴加KCNC3 一抗，4 ℃孵育過夜，次日孵育二抗，二氨基聯苯胺（diaminobenzidine，DAB）顯色，蘇木精復染，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹脂封片。結果判斷標準：①以切片中細胞染色強度進行評分，細胞無著色為0 分，淺黃色為1 分，棕黃色為2 分，棕褐色為3 分；②以陽性細胞百分比進行評分，無陽性細胞為0 分，陽性細胞百分比﹤10%為1 分，10%～50%為2 分，﹥50%為3 分。兩項評分的乘積為最終得分，總分≥3 分為陽性，﹤3 分為陰性。

1.3 隨訪

收集患者年齡、性別、分化程度、腫瘤最大直徑等臨床資料。采用電話、門診及住院復查等方式隨訪2年，隨訪間隔3 個月，了解患者生存情況。隨訪時間截至2021年6月，根據隨訪結果將患者分為死亡組（n=23）和生存組（n=37）。

1.4 統計學分析

采用SPSS 21.0 統計軟件進行數據分析，符合正態分布的計量資料以均數±標準差（）表示，組間比較采用t檢驗；計數資料以例數及率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；多因素分析采用Logistic 回歸模型；以P﹤0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同臨床特征胃癌患者的胃癌組織中KCNC3表達情況的比較

不同年齡、性別、腫瘤最大直徑、分化程度胃癌患者的胃癌組織中KCNC3 表達情況比較，差異均無統計學意義（P﹥0.05）；腫瘤分期為Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結遠處轉移的胃癌患者的胃癌組織中KCNC3 陽性表達率分別明顯高于腫瘤分期為Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結遠處轉移的胃癌患者，差異均有統計學意義（P﹤0.01）。（表1）

表1 不同臨床特征胃癌患者的胃癌組織中KCNC3 表達情況的比較

2.2 腹腔鏡胃癌根治術患者預后影響因素的單因素分析

單因素分析結果顯示，分化程度、淋巴結遠處轉移情況、KCNC3 表達均可能是腹腔鏡胃癌根治術患者預后的影響因素（P﹤0.01）。（表2）

表2 腹腔鏡胃癌根治術患者預后影響因素的單因素分析

2.3 腹腔鏡胃癌根治術患者預后影響因素的多因素分析

將腹腔鏡胃癌根治術患者是否死亡作為因變量，分化程度、淋巴結遠處轉移情況和KCNC3 表達情況作為自變量進行多因素分析，結果顯示，分化程度為低分化、有淋巴結遠處轉移、KCNC3 表達陽性均是腹腔鏡胃癌根治術患者預后的獨立危險因素（P﹤0.01）。（表3）

表3 腹腔鏡胃癌根治術患者預后影響因素的多因素分析

3 討論

胃癌是常見的消化系統惡性腫瘤，發病率與病死率分別居全球第5 位與第3 位[9]。中國胃癌發病率與病死率僅次于肺癌，居第2位，是造成嚴重社會負擔的重要因素，多數患者因中晚期胃癌就診[10-11]。胃癌主要類型為胃腺癌，是指源于胃黏膜上皮細胞的惡性腫瘤[12]。早期胃癌無明顯癥狀，患者會隨著病情進展逐漸出現消化不良等胃部不適癥狀[13]。晚期胃癌主要表現為疼痛、嘔吐，甚至嘔血、黑便，也可能會出現腹部腫塊、上腹壓痛、脾腫大和黃疸，以及遠處淋巴結轉移、盆腔轉移等體征，患者具有臨床治療效果差、生存期短、易復發、易轉移的特點[14-16]。腹腔鏡胃癌根治術相比傳統開腹手術，具有創傷小、術后恢復快等優勢[17]。盡管近年來晚期胃癌手術及放化療方案不斷發展，但是患者5年生存率仍然較低[18]。因此針對胃癌尋找新的預后預測指標是目前臨床研究亟待解決的問題。

KCNC3 最直接的下游信號通路可能是電壓門控鉀離子通道，該通道的開合受控于細胞膜內外的電位改變，在多種惡性腫瘤細胞中有不同程度的失調，例如在頭頸部癌、乳腺癌、腸癌中表達異常，且與患者臨床特征和腫瘤細胞生物學行為有關[19-20]。基因集富集分析（gene set enrichment analysis，GSEA）顯示，KCNC3 可能通過多個信號通路促進腫瘤發生發展，包括Notch 信號通路、氧化磷酸化通路、γ氨基丁酸轉運或電子運輸鏈通路，不同程度地促進淋巴結轉移[21-22]。同時，KCNC3 參與細胞增殖，影響細胞周期變化、細胞凋亡和腫瘤進展，可作為腫瘤診療的標志物以及腫瘤增殖和轉移的潛在靶標[23-24]。本研究中，胃癌組織中KCNC3的表達與腫瘤分期、淋巴結遠處轉移情況有關，提示KCNC3 與胃癌臨床特征有關，參與胃癌的發生發展進程。本研究結果顯示，分化程度為低分化、有淋巴結遠處轉移、KCNC3 陽性表達均是腹腔鏡胃癌根治術患者預后的獨立危險因素，提示KCNC3 可作為預測腹腔鏡胃癌根治術患者預后的生物標志物。

綜上所述，胃癌組織中KCNC3 表達與臨床特征有關，KCNC3 表達可作為預測腹腔鏡胃癌根治術患者預后的生物標志物。但本研究納入的樣本量較小，未進行深入研究，KCNC3 是否能成為胃癌預后的生物標志物，還需要在今后的研究中擴大樣本量以及研究范圍，完善研究結果，確保其準確性，為新的腫瘤標志物應用于臨床提供參考依據。