應用分子生物學技術檢測及蛋白質模型預測1例弱D型54*

芮雪,張鈺,蔡杰,許紀玲,傅強,何成濤(南京紅十字血液中心,南京 210003)

Rh血型系統是人類紅細胞血型系統中最復雜的系統,在輸血領域的重要性僅次于ABO血型。D抗原在Rh系統中免疫原性最強且與臨床密切相關,是導致新生兒溶血病、輸血性溶血反應等的主要原因[1]。由于Rh系統復雜的多態性,存在多種D變異型,如弱D、不完全弱D、部分D、Del、Rhnull 和Rhmod等[2]。大部分弱D型被認為是D抗原表位基本完整而僅D抗原數量減少,但已有一些報道指出某些弱D型(Weak D3、Weak D4、Weak D15)可以導致抗D抗體的產生[3-5]。由于不同弱D型的血清學特征差異并不顯著,無法通過血清學區分弱D分型。且目前多數學者僅對有臨床意義的弱表型進行分子生物學研究,而忽視了對弱D型基因攜帶者的分子生物學機制分析。本研究對1例血型血清學檢測為RhD弱陽性的樣本進行分子生物學檢測及家系調查分析,鑒定為弱D型54,報道如下。

1 材料與方法

1.1病歷資料 采集2022年6月由南京市兒童醫院河西分院送檢的RhD鑒定樣本。先證者(Ⅱ1),男性,5歲,江蘇南京人,因疝氣行術前檢查,RhD血清學呈弱陽性,初步鑒定為變異型。先證者父親(Ⅰ1)與母親(Ⅰ2)均為RhD陽性。先證者及其父母樣本均為EDTA-K2抗凝全血。

1.2試劑與儀器 D1試劑:單克隆 IgM+IgG抗-D試劑(加拿大宜美康生物制品公司),D2試劑:單克隆IgM/IgG抗-D試劑(英國Millipore公司),D3試劑:單克隆IgG抗-D試劑、D-SCREEN抗原表位檢測試劑盒(法國Diagast公司),O型抗篩細胞(上海血液生物醫藥公司),O型譜細胞(荷蘭Sanquin公司),低離子抗人球蛋白卡(瑞士Diamed公司),人類紅細胞RHD血型基因分型試劑……