LPS通過促進FGFR1磷酸化誘導肺上皮細胞炎癥反應及凋亡*

吳躍明,樓天正,徐俊龍(麗水市人民醫院重癥醫學科,浙江麗水 323000)

急性肺損傷(acute lung injury,ALI)/急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)是重癥醫學領域的常見疾病,革蘭陰性桿菌感染是引起ALI/ARDS的主要原因之一。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是革蘭陰性桿菌細胞壁的重要成分,研究證實,LPS作用于肺泡上皮細胞并引起炎癥反應及凋亡的過度激活,是導致ALI/ARDS的重要生物學環節[1-2]。LPS刺激肺泡上皮細胞是目前臨床上研究ALI及ARDS的常用細胞模型[3-4],研究LPS誘導肺上皮細胞炎癥反應及凋亡激活的分子機制有助于深入認識ALI/ARDS的病理生理機制。成纖維細胞生長因子受體1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)是一種受體酪氨酸激酶,參與細胞凋亡與增殖、炎癥反應、血管生成等生物學環節的調控。有學者通過對腎損害及肝損害的細胞實驗證實,磷酸化FGFR1(p-FGFR1)的表達水平在LPS誘導的腎小管上皮細胞損傷模型及肝細胞損傷模型中均明顯增加,并進一步證實了FGFR1磷酸化的選擇性抑制劑AZD4547可顯著減輕LPS誘導的腎小管上皮細胞損傷和肝細胞損傷[5-6]。為深入認識FGFR1在ALI/ARDS中的生物學作用,本研究擬通過在LPS誘導肺上皮細胞炎癥反應及凋亡激活的模型中觀察FGFR1的表達水平變化,以及FGFR1抑制劑AZD4547對炎癥反應及凋亡的調控作用。

1 材料與方法

1.1細胞系、儀器與試劑 人肺泡上皮細胞系Beas-2B購自中國科學院上海生命科學研究院細胞資源中心。LPS、FGFR家族抑制劑AZD4547(美國Sigma公司),細胞裂解液、核蛋白提取試劑盒、CCK8法細胞增殖檢測試劑盒、Tunel法細胞凋亡檢測試劑盒(上海碧云天生物科技公司),小鼠抗人FGFR1、p-FGFR1、B淋巴……