羊口瘡病流行病學(xué)、診斷及防控的研究現(xiàn)狀

黃 可，屠坷峰，李 閩*，雷 永，陳思怡

（1.上海市松江區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心，上海 201600；2.上海市松江區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村發(fā)展中心，上海 201600）

羊口瘡病，又稱羊傳染性膿皰皮炎，是由傳染性膿皰病毒引起的一種急性、接觸性傳染病，傳染范圍廣。該疾病主要影響綿羊和山羊（通常山羊更為嚴(yán)重[1]），感染羊口唇黏膜出現(xiàn)丘疹、膿皰、潰瘍、血痂。由疾病或皮膚損傷引起的壓力會導(dǎo)致產(chǎn)奶量降低、體重增加緩慢、動物皮用質(zhì)量、羊毛品質(zhì)降低[2]，給畜牧業(yè)生產(chǎn)造成重大經(jīng)濟損失。同時羊口瘡病也是一種人畜共患病，可通過破損的皮膚或黏膜感染病毒，尤其是對患有免疫缺陷疾病的人，會引發(fā)嚴(yán)重感染[3]。掌握羊口瘡病的流行特點，及時診斷并采取適當(dāng)?shù)念A(yù)防和控制措施，對減少疾病帶來的損害和經(jīng)濟損失以及公共衛(wèi)生防控具有重要意義。

1 病原

引起羊口瘡病的傳染性膿皰病毒（Orf virus，ORFV）屬于痘病毒科，副痘病毒屬，為雙鏈DNA 病毒（138kb），能編碼多種蛋白實現(xiàn)免疫逃逸[4]，為自身復(fù)制和擴散創(chuàng)造有利條件，一旦感染會引起較快傳播，造成羊的群發(fā)性流行傳染。羊口瘡病原的耐受力很強，相關(guān)報道表明，該病毒在干燥的環(huán)境中能夠存活長達17 年[1]，結(jié)痂在低溫冰凍的條件下的感染力仍能持續(xù)數(shù)年。但該病毒對高溫以及常用的消毒劑較為敏感，65℃30min 可使其全部失去感染力，2%的氫氧化鈉、10%的石灰乳、1%的醋酸、20%的草木灰溶液均可使其快速滅活。

2 流行病學(xué)

羊口瘡病可以在各個品種、年齡、性別的羊群中發(fā)生，也可交叉感染其他物種，如駱駝、瞪羚、馴鹿等[5]，同時可傳播給人類。其中以6 月齡內(nèi)的小羊最為易感，發(fā)生在口腔的病變會阻礙羔羊哺乳，且容易發(fā)生繼發(fā)性細菌、真菌或蛆蟲感染進而導(dǎo)致羔羊死亡。病羊以及帶毒羊可以通過痂皮、口涎、滲出液等向環(huán)境排毒，污染飼槽、墊料等，引發(fā)健康羊只的感染并迅速傳播，24～72h 可傳播整個羊群[6]。人可通過破損的皮膚或粘膜直接接觸受感染的羊、尸體或接觸到受污染的材料而感染病毒。有研究表明，該病毒除了能在動物之間相互傳染、動物傳染給人以外，人和人之間也能相互傳染[7]。康復(fù)動物體內(nèi)仍有病毒且通常在幾個月內(nèi)都保持穩(wěn)定，能夠反復(fù)感染先前的宿主，因此羊場一旦發(fā)生過羊口瘡病的流行，后續(xù)反復(fù)發(fā)生的可能性會顯著提高。羊口瘡病一年四季均可發(fā)病，傳染范圍廣，中國多個省份都有該病報道，且基于傳染性膿皰病毒的遺傳進化分析，分布在各個地區(qū)的毒株呈現(xiàn)出種屬和地域特異性[8]，不同地域暴發(fā)的羊口瘡病的毒株會有所不同。

3 診斷

3.1 臨床診斷

3.1.1 羊感染臨床特征

羊口瘡病為嗜上皮性傳染病，感染后會在皮膚和黏膜組織形成丘疹、水皰、血痂和黏膜潰瘍，潛伏期通常為3～7d，具體取決于羊場的環(huán)境條件，病變主要發(fā)生在口唇部、蹄部和外陰部。其中口唇部最為常見，起初會在口角、唇部邊緣出現(xiàn)分散性小紅斑，其后形成軟硬小結(jié)節(jié)，繼而轉(zhuǎn)變?yōu)樗捇蚰摪挘茲⒑蠼Y(jié)成疣狀硬痂。病變也會發(fā)生在口腔粘膜以及舌部、齒齦等部位，發(fā)生灰白色水皰呈菜花樣變化。良性一般于7～14d 自行脫落，較嚴(yán)重時會有肉芽組織增生，嘴唇腫大外翻呈桑椹狀突起，可能形成大面積潰瘍，病羊表現(xiàn)為疼痛劇烈，不愿采食導(dǎo)致日漸衰弱。

蹄部病變多見于綿羊，病灶發(fā)生在蹄叉、蹄冠及周圍皮膚，初期形成水皰或膿皰，破裂后形成粘膜潰瘍。病羊表現(xiàn)為跛行或長期臥地，有可能在肺臟、肝臟中發(fā)生轉(zhuǎn)移性病灶，護理不周的情況下易繼發(fā)細菌性感染。

外陰部病變相對較為少見，公羊主要表現(xiàn)為陰鞘腫脹，附近皮膚有膿皰或潰瘍。母羊表現(xiàn)為陰部流出膿性分泌物，陰部附近皮膚以及乳房、乳頭的皮膚上發(fā)生膿皰、潰瘍，受感染的乳房可能會導(dǎo)致乳腺炎[9]。

與羊口瘡病癥狀相似的疾病包括羊痘、潰爛性皮炎、壞死桿菌病、口蹄疫病等，發(fā)生類似癥狀時應(yīng)根據(jù)流行病學(xué)特點與羊口瘡臨床特征及時做出早期鑒別診斷，以免延誤治療。

3.1.2 人感染臨床特征

人感染傳染性膿皰病毒，病灶主要發(fā)生在手部，尤其是手指背側(cè)，但也可能發(fā)生在其他部位，包括面部、腋窩、頭皮、臀部等[10]。瘡口起初為紅斑，其后形成小結(jié)節(jié)，中心壞死，外暈一圈紅色，呈荷包蛋樣式，在傷口未感染其他病菌情況下一般6～8 周可自行恢復(fù)。病程中人體會出現(xiàn)瘙癢、疼痛，少數(shù)會出現(xiàn)發(fā)燒和淋巴結(jié)腫大等癥狀。人感染傳染性膿皰病毒后可能會并發(fā)繼發(fā)性細菌感染、丹毒、淋巴結(jié)病、淋巴管炎、多形紅斑。據(jù)統(tǒng)計，7%～18%的患者在感染傳染性膿瘡病毒2～4 周后出現(xiàn)多形性紅斑[11]。

3.2 病理學(xué)診斷

對病死羊進行解剖，查看病變位置是否存在膿皰、血痂等病變，心臟、肺臟等內(nèi)臟器官是否有出血現(xiàn)象，并進一步組織實驗室病理學(xué)檢測，查看是否存在特征性的組織學(xué)變化，包括角化不良、角化過度、表皮內(nèi)水皰、角質(zhì)形成細胞氣球狀變性、真皮血管增加、細胞質(zhì)和細胞核空泡化，以及由淋巴細胞、組織細胞、中性粒細胞和嗜酸性粒細胞組成的致密混合炎癥細胞浸潤等[12]。病理學(xué)檢測可作為輔助診斷手段，確診還需結(jié)合更多的實驗室檢測技術(shù)。

3.3 病原學(xué)診斷

3.3.1 電子顯微鏡檢測

羊口瘡病病毒屬于副痘病毒屬，通過電子顯微鏡技術(shù)可以從病毒樣本中觀察到典型的副痘病毒顆粒。但副痘病毒屬還包含牛丘疹性口腔炎病毒、偽牛痘病毒、新西蘭紅鹿病毒，僅通過電子顯微鏡觀察病毒顆粒的形態(tài)難以將傳染性膿瘡病毒和其他副痘病毒屬區(qū)分。但在結(jié)合其他檢測結(jié)果的情況下，電子顯微鏡技術(shù)仍然是比較直觀且有效的診斷副痘病毒的重要工具。

3.3.2 病毒分離培養(yǎng)鑒定

從病樣中成功進行病毒的分離培養(yǎng)和鑒定是診斷病毒感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”。根據(jù)已有研究，傳染性膿瘡病毒能夠在各種原代和連續(xù)細胞系中培養(yǎng)成功，例如原代羔羊睪丸細胞、羔羊腎臟細胞、羔羊肌肉細胞，胎牛肌肉細胞、肺細胞、牛腎細胞（MDBK）和非洲綠猴腎細胞（Vero）細胞等[13]，可通過觀察病毒接種后的致細胞病變作用判斷感染細胞成功與否。雞胚接種也可以用來培育傳染性膿皰病毒，接種后的雞蛋尿囊膜表現(xiàn)出血、水腫以及小的灰白色斑點等病理學(xué)變化[14]。病毒分離雖然是確診的最佳標(biāo)準(zhǔn)，但對實驗室要求較高，且非常耗時，不適用于對羊場突然暴發(fā)的疫情進行快速診斷。

3.4 血清學(xué)診斷

傳染性膿皰病毒抗體的酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、病毒中和試驗、瓊脂擴散試驗均可用于檢測羊口瘡病。早期的ELISA 抗體檢測方法是應(yīng)用過氧化物酶結(jié)合蛋白A 或G 檢測羔羊血清樣品[15]，鑒于傳染性膿皰病毒在環(huán)境中的存活力較強，有研究建立了一種間接ELISA 方法（rF1LELISA）檢測傳染性膿皰病毒特異性抗體，特異性達到92%，靈敏度超過89%[16]。目前國內(nèi)外有多種檢測羊口瘡病的ELISA 成品試劑盒（ORF-Ab），能夠快速診斷。但不建議將血清中和試驗作為初期診斷方法，且不能作為唯一診斷工具，因為傳染性膿皰病毒主要是細胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)[17]，中和抗體的濃度較低，在實踐檢測中需結(jié)合更多其他檢測方式獲得較為準(zhǔn)確的診斷。

3.5 分子生物學(xué)診斷

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）具有高靈敏度與特異性，能夠快速診斷病料樣本，是較為常用的實驗室診斷方法。當(dāng)前對傳染性膿皰病毒進行分子診斷最常用的是B2L 基因和F1L 基因。為了更好的鑒別診斷羊口瘡病，多重PCR 是更為有效的方法，例如針對傳染性膿皰病毒B2L 基因和針對綿羊痘病毒和山羊痘病毒A29L 基因設(shè)計的多重PCR 方法，能夠有效區(qū)分病毒[18]。相較于傳統(tǒng)的PCR，基于B2L 基因設(shè)計的實時熒光定量PCR（qPCR）方法能夠?qū)Σ《具M行定量分析，結(jié)果更為精準(zhǔn)且耗時較少。此外，環(huán)介導(dǎo)的等溫擴增分子診斷技術(shù)也是一種有效的診斷工具，該技術(shù)的靈敏度與實時熒光定量PCR 相差不大[19]，且有快速、簡單、可視化等優(yōu)勢。

4 預(yù)防

4.1 羊場科學(xué)規(guī)劃布局

為了防止野生反芻動物傳播傳染性膿皰病毒，造成羊口瘡病的流行，羊舍選址時應(yīng)選擇相對干燥，采光好的地方，且場區(qū)周圍應(yīng)有圍墻、防疫溝等物理隔離設(shè)施。羊場內(nèi)要細化分區(qū)，生活區(qū)、糞污處理區(qū)、和無害化處理區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開，以便在發(fā)生疫情時能有效控制。當(dāng)場內(nèi)出現(xiàn)零散病例時，病羊要及時單獨隔離，隔離區(qū)最好設(shè)置在場區(qū)的下風(fēng)口位置，與羊舍保持一定的距離。羊口瘡病的傳播速度較快，細分養(yǎng)殖欄能有效減少羊群間的接觸頻率，當(dāng)飼養(yǎng)羊群數(shù)量較為龐大時，建議場區(qū)設(shè)置不同飼養(yǎng)區(qū)域，再細化為不同羊舍，羊舍內(nèi)再細分養(yǎng)殖欄[6]，合理控制飼養(yǎng)密度。

4.2 優(yōu)化飼養(yǎng)管理

在進行羊群喂養(yǎng)時，應(yīng)保證充足干凈的飲水和飼料科學(xué)搭配，根據(jù)羊的生理狀況合理搭配精飼料和粗飼料，同時注意日糧中微量元素、礦物質(zhì)鹽和維生素等物質(zhì)的添加，保持營養(yǎng)均衡。對于生長狀況較差的羊或抵抗力較低的羔羊可單獨飼喂，選擇適口性好、易消化的飼料。飼料存放區(qū)要有一定的通風(fēng)性和光照條件[19]，保證干凈衛(wèi)生，飼喂前要檢查有無霉變情況并及時挑出雜質(zhì)。在日常飼喂中要注意羊群的進食情況以及精神狀態(tài)，以便在早期出現(xiàn)羊口瘡病癥狀時及時發(fā)現(xiàn)并處理。

羊口瘡病可以通過向環(huán)境排毒迅速感染羊群，其結(jié)痂可以長時間保持感染力，因此做好羊場飼養(yǎng)環(huán)境管理能有效降低羊口瘡病的發(fā)病率。羊舍內(nèi)保持清潔干燥并及時清理羊糞，羊舍連廊等地面保持潔凈，清理工具專舍專用，舍內(nèi)無雜物堆積。建議羊場自繁自養(yǎng)，養(yǎng)殖戶若要引種，要慎重選擇引種地區(qū)，加強檢疫并采取嚴(yán)格的消殺措施，防止引入病羊或帶毒羊。

4.3 注重疫苗接種

對健康羊群接種疫苗能有效控制羊口瘡病的流行，當(dāng)前生產(chǎn)中較為常用的是羊傳染性膿皰弱毒疫苗，疫病流行區(qū)域要使用與當(dāng)?shù)亓餍卸局晗嗤娜醵疽呙缰曜鳛榻臃N疫苗[20]。對健康羊群采用口腔下唇黏膜內(nèi)注射的方式，感染的羊群可使用弱毒疫苗在股內(nèi)側(cè)皮下進行緊急接種。懷孕母羊可以在生產(chǎn)前1 個月左右接種，以期讓新生小羊獲得較高的母源抗體保護。即使沒有母源抗體，小羊在出生后4d 即采取股內(nèi)側(cè)皮下劃痕接種，也能獲得較高的免疫保護力，接種劑量通常為0.2mL，免疫保護可持續(xù)6 個月。

5 應(yīng)對措施

5.1 治療

在羊只出現(xiàn)羊口瘡病癥狀時及時干預(yù)治療能有效縮短病程，減少經(jīng)濟損失。當(dāng)前羊口瘡病的治療以局部消毒配合抗感染為主，針對口唇部、蹄部、外陰周圍以及乳房的病灶，可以先用0.1%的高錳酸鉀溶液、來蘇爾、2%～3%硼酸水等清洗創(chuàng)面，再涂抹碘甘油、冰硼散、松餾油、魚肝油氧化鋅軟膏、明礬粉末等消毒止痛，收斂傷口。蹄部的病灶嚴(yán)重時可選用5%的福爾馬林浸泡。當(dāng)發(fā)生羊口瘡病后繼發(fā)細菌感染時，可使用鏈霉素等抗生素進行肌注。抗病毒藥物對羊口瘡病的治療也有效果，有相關(guān)研究證實利用西多福韋的抗病毒活性及硫糖鋁的促愈合特性制成的噴霧制劑對治療羔羊有效[21]。此外，中藥也可用于治療羊口瘡病，以黃芪5g、耳茶10g、金銀花10g、梔子10g、黃連10g 為主要藥物，制成的中藥可涂抹瘡口[19]，也可選用具有滋陰降火功效的中藥配方灌服調(diào)理，但中藥治療的周期相對較長。

5.2 加強護理

發(fā)生羊口瘡病疫情時，要及時將病羊與健康羊群分開，可以在飲水和飼料中添加板藍根、高清太保、黃芪多糖等抗病毒藥物，協(xié)助羊群提高免疫力，降低病毒大面積擴散的風(fēng)險。對病羊要加強護理，保證病羊舍干燥、通風(fēng)、舒適，減少舍內(nèi)細菌滋生導(dǎo)致的并發(fā)感染。病灶發(fā)生在口唇時，羊只會因疼痛難以進食導(dǎo)致身體虛弱，可以加強對病羊的營養(yǎng)供給，例如對于身體狀況不良的小羊進行食道插管補充葡萄糖溶液，對需要哺乳的羔羊進行人工干預(yù)喂養(yǎng)；病灶發(fā)生在乳房時要停止哺乳，通過人工擠奶的方式排出乳汁。在協(xié)助羊群進行治療與護理時要穿戴好防護用具，并及時消毒，使用過的一次性用具以及醫(yī)療廢物要進行無害化處理。

5.3 科學(xué)消毒

傳染性膿皰病毒對環(huán)境的耐受力較強，但對普通的消毒藥敏感，當(dāng)羊場內(nèi)出現(xiàn)傳染源時，要及時對羊舍以及羊場內(nèi)的用具材料進行全面消毒，可選用生石灰、有機氯制劑、絡(luò)合碘、季銨鹽等消毒劑。只要與病羊接觸過的工具表面均噴灑霧碘溶液等及時消毒，病死羊要進行無害化處理，保持羊場內(nèi)清潔衛(wèi)生，人員和物資的進出要執(zhí)行嚴(yán)格消毒程序。羊口瘡病是一種人畜共患病，人在接觸病羊以及可能帶毒羊后要清潔消毒手部以及其他暴露部分，當(dāng)身體出現(xiàn)傷口時，應(yīng)避免直接接觸正在發(fā)病的羊群。

6 公共衛(wèi)生意義

羊口瘡病病毒可傳播給人類，面臨風(fēng)險的人群主要是與養(yǎng)殖相關(guān)的養(yǎng)殖戶、牧民、獸醫(yī)、屠宰場工作人員等，例如養(yǎng)殖場工人在準(zhǔn)備草料的過程中極易造成手指等皮膚割傷，進而在照料出現(xiàn)癥狀的病羊或接觸到環(huán)境中受污染的用具時引發(fā)感染。羊口瘡病病毒也能存在一些非職業(yè)的環(huán)境中，例如養(yǎng)殖戶家中、動物園等，由于傳染性膿皰病毒可以在人和人之間傳播[7]，養(yǎng)殖戶的家人尤其是兒童發(fā)病的概率會顯著提高，因此在接觸到羊口瘡病病羊后，若傷口出現(xiàn)瘙癢、疼痛等早期癥狀應(yīng)及時消毒，主動就醫(yī)縮短病程，減少進一步傳播的風(fēng)險。

7 小結(jié)

羊口瘡病的病原耐受力很強，能夠長期存活在養(yǎng)殖場內(nèi)，造成羊群的反復(fù)感染，是危害羊養(yǎng)殖業(yè)重要的皮膚病之一[22]，給羊業(yè)造成嚴(yán)重經(jīng)濟損失。我們應(yīng)不斷完善快速診斷方法，對羊口瘡病開展積極有效的防控。此外針對養(yǎng)殖戶，需加大羊口瘡病相關(guān)的防治宣傳力度，提高對羊口瘡病暴發(fā)的應(yīng)急處理能力以及自我防護能力，最大化地降低羊口瘡病帶來的損失。