慢性腎臟病患者血清HMGA2蛋白、FGF-23水平與腎功能損傷程度的相關性研究

張瑞，何娜，郗雋

西電集團醫院檢驗科，陜西 西安 701177

慢性腎臟病(chronic kidney disease，CKD)是由各種原發或者繼發腎小球腎炎、腎小管損傷和腎血管病變導致的腎臟損傷或腎功能障礙[1]。CKD根據腎小球濾過率(glomerular filtration rate，GFR)可分為5 期，進展至晚期時需進行血液透析或腎臟替代治療[2]。多項研究表明，CKD早期發現和早期干預可顯著降低并發癥產生風險，恢復腎功能，但CKD早期無特異性表現，多數患者確診時腎損傷已達中晚期，腎功能損傷可逆性較低，嚴重影響治療效果[3-4]。高遷移率族蛋白A2(high mobility group protein A1，HMGA2)是一種非組蛋白染色體蛋白，可通過與DNA的高親和性調控誘導基因轉錄，在維持干細胞分化潛能和自我更新方面起關鍵作用，在胚胎期高表達，在成熟細胞中幾乎不表達，但在腫瘤細胞中存在高表達[5]。研究表明，在產生間質的轉化細胞和腫瘤細胞中，HMGA2 存在高表達，HMGA2 已被證實與腫瘤侵襲轉移密切相關，目前與CKD 相關研究較少，但上皮間質轉化與CKD 密切相關，HMGA2 可能與CKD 腎功能損傷存在一定相關性[6]。成纖維細胞生長因子23(fibroblast growth factor 23，FGF-23)是一種由骨細胞生成，可促進新血管生成、修復受損細胞的磷酸鹽調節激素，與CKD 的發展密切相關[7]。本研究旨在分析血清HMGA2蛋白、FCF-23 水平與腎功能損傷程度的相關性，以期指導CKD患者的早期發現與干預治療。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021 年2 月至2022 年3 月在西電集團醫院診治的108例CKD患者(CKD組)為研究對象。納入標準：(1)符合改善全球腎臟病預后組織(kidney disease：improVing 910bal outcomes，KDIGO)2012 年發布的《慢性腎臟疾病評估和管理的臨床實踐診療指南》[8]中的CKD 診斷標準；(2)非血液透析者；(3)所有患者臨床資料完整，均對本研究知情并簽署知情同意書。排除標準：(1)腎移植者；(2)合并有嚴重心、肝、腦等重要器官疾病或腫瘤者；(3)存在免疫系統功能障礙者；(4)認知障礙或無法溝通者；(5)急性腎損傷者；(6)近3個月服用免疫抑制劑者。CKD組患者中男性57 例，女性51 例；年齡33～65 歲，平均(48.13±7.13)歲；糖尿病腎病35 例，腎小球腎炎32 例，高血壓腎小動脈硬化41 例。根據國際KDIGO 指南[8]的CKD 分期標準，以GFR 為標準將患者劃分為1～5 期，其中A 組42例(1～2期)、Β組45例(3～4期)和C 組21例(5 期)。選取同期參加體檢的健康者108 例作為對照組，其中男性60 例，女性48 例；年齡35～67 歲，平均(49.67±6.58)歲。CKD組和對照組受檢者的性別和年齡比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 觀察指標與檢測方法

1.2.1 檢測方法 (1)HMGA2 水平：抽取兩組受檢者晨間外周血5 mL，室溫下靜置30 min后離心取上層血清，-80℃保存，使用購于上海彩佑實業有限公司的ELISA 試劑盒檢測HMGA2 蛋白水平(貨號：IHC0100731)；(2) FCF-23 水平：取上述外周血采用ELISA 法嚴格按照試劑盒操作方法檢測FCF-23 水平(貨 號：EH189RΒ)；(3)尿 素 氮(blood urea nitrogen，ΒUN)水平：取上述外周血采用北京普朗新技術有限公司生產的PUZS-600A/Β 全自動生化分析儀檢測ΒUN水平。

1.2.2 觀察指標 (1)比較CKD組和對照組受檢者的HMGA2、FCF-23及ΒUN水平；(2)比較不同分期CKD 患者的HMGA2、FCF-23 及ΒUN 水平；(3)分析CKD患者血清HMGA2、FCF-23水平與腎功能損傷的相關性。

1.3 統計學方法 應用SPSS20.0 統計學軟件分析數據。計數資料比較采用χ2檢驗；計量資料以均數±標準差(±s)表示，組間兩兩采用t檢驗，多組間比較采用單因素方差；采用Pearson 相關系數分析CKD 患者血清HMGA2、FCF-23 水平與腎功能損傷的相關性。檢驗標準α=0.05，以P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 CKD組和對照組受檢者的HMGA2、FCF-23及ΒUN 水平比較 CKD 組患者的HMGA2、FCF-23及ΒUN 水平明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 CKD 組和對照組受檢者的HMGA2、FCF-23 及BUN 水平比較(±s)Table 1 Comparison of HMGA2, FCF-23, and BUN between CKD group and control group(±s)

表1 CKD 組和對照組受檢者的HMGA2、FCF-23 及BUN 水平比較(±s)Table 1 Comparison of HMGA2, FCF-23, and BUN between CKD group and control group(±s)

組別CKD組對照組t值P值例數108 108 HMGA2(ng/mL)3.59±1.42 0.96±0.43 18.422 0.001 FCF-23(pg/mL)432.16±43.15 306.55±35.63 23.327 0.001 ΒUN(μmol/L)6.43±1.46 4.35±1.27 11.171 0.001

2.2 不同分期CKD 患者的HMGA2、FCF-23 及ΒUN水平比較 A 組患者的血清HMGA2、FCF-23 及ΒUN 水平明顯低于Β 組和C 組，而Β 組患明顯低于C組，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

表2 不同分期CKD患者的HMGA2、FCF-23及BUN水平比較(±s)Table 2 Comparison of HMGA2,FCF-23, and BUN among patients with different CKD staging(±s)

表2 不同分期CKD患者的HMGA2、FCF-23及BUN水平比較(±s)Table 2 Comparison of HMGA2,FCF-23, and BUN among patients with different CKD staging(±s)

注：與A組患者比較，aP＜0.05，與Β組患者比較，bP＜0.05。Note:Compared with group A,aP＜0.05,Compared with group Β,bP＜0.05.

組別A組Β組C組F值P值例數42 45 21 HMGA2(ng/mL)3.01±0.97 3.42±1.24a 5.13±2.01ab 18.130 0.001 FCF-23(pg/mL)398.53±40.37 444.86±46.34a 472.19±48.74ab 22.232 0.001 ΒUN(μmol/L)4.87±1.42 6.98±2.07a 8.37±2.41ab 26.409 0.001

2.3 CKD患者血清HMGA2、FCF-23水平與腎功能損傷的相關性 經Pearson相關分析結果顯示，CKD組患者血清HMGA2、FCF-23水平與ΒUN呈明顯正相關(r=0.513、0.425，P＜0.05)。

3 討論

CKD 是一種病因較為復雜且所有年齡均可發生的進展性疾病，全球發病率為10.1%～13.3%，因并發癥多，治療費用高，已成為世界公共衛生問題[9-10]。HMGA2蛋白具有HMGA家族特征性A-T結構，其所具有的GRP三肽模式對DNA單鏈有強親和力，可誘導DNA分子發生彎曲、拉伸和解旋，可影響基因轉錄[11]。HMGA2蛋白可直接作用于轉錄因子Snail 的調節區域使其發生轉錄，刺激多種分子促進腎小管上皮間質轉化，產生腎功能損傷[12]。李凱等[13]提出，HMGA2與腫瘤侵襲和上皮間質轉化關系密切。郭哲等[14]發現，糖尿病腎病患者血清HMGA2 蛋白水平隨腎功能下降而上升，且與腎小管間質病變程度密切相關。在本研究中，CKD組HMGA2水平高于對照組，不同分期CKD患者中，A組CKD 患者血清HMGA2 水平明顯低于Β 組和C 組患者，Β 組 患 者 血 清HMGA2 水平低于C 組患者(P＜0.05)，結果說明，血清HMGA2蛋白水平可反映腎功能損傷嚴重程度，HMGA2可作用于腎臟細胞，調控腎小管細胞分化和纖維化，CKD患者體內HMGA2 蛋白表達異常，加快腎小管細胞纖維化進程，腎小球細胞進一步受損，進而導致腎功能下降。

FGF-23 由骨細胞分泌，主要作用于腎臟，可調節磷的重吸收和維生素D 的代謝[15]。除在腎臟外，FGF-23 蛋白在小腸、腦、甲狀腺和肝等組織和器官也有不同程度的表達，FGF-23可直接作用于甲狀腺，調節PTH的分泌，進而調控機體內鈣磷等礦物離子代謝平衡[16]。閆奇奇等[17]發現，在CKD 早期，腎功能開始下降，其他指標正常時，血清FGF-23蛋白水平出現代償性升高，維持機體內礦物離子平衡。楊雄等[18]研究發現，CKD患者血清FGF-23蛋白濃度越高，肌酐清除率越低，越易發生血管受損和血管鈣化等并發癥。在本研究中，CKD組血清FCF-23水平高于對照組，不同分期CKD患者中，A組CKD患者血清FCF-23水平明顯低于Β組和C組患者，Β組患者血清FCF-23水平低于C 組患者(P＜0.05)，結果說明，血清FCF-23 水平與CKD 分期增加和腎功能損傷程度增加有關，可能與FCF-23 參與鈣磷等礦物離子的代謝有關。蛋白質的磷酸化是維持細胞生命活動的基礎之一，CKD患者體內FCF-23 高表達會引起機體內磷代謝紊亂，影響細胞內蛋白質磷酸化水平，損傷腎小球細胞，同時FCF-23 還可通過調節絲裂原激活的蛋白激酶信號通路影響腎小球細胞的增殖和代謝，FCF-23高表達會抑制腎小球細胞增殖和代謝導致腎小球細胞減少進一步損傷腎功能，因而血清FCF-23 水平與腎臟損傷程度關系密切，與田浩等[19]研究一致。

ΒUN 主要由腎小球排出，其血清含量異常升高時，提示腎小球細胞受損，ΒUN 是臨床上判斷腎功能的重要指標。馮小娟等[20]發現CKD 3～5 期患者血清FCF-23 水平與磷和PTH 正相關明顯，與GFR 成負相關，可通過調節血磷水平調控FCF-23 蛋白水平進而減少并發癥的發生。本研究發現，CKD 組患者血清HMGA2 及FCF-23 蛋白水平與ΒUN 呈正相關(P＜0.05)，結果說明隨著CKD 分期增加，患者血清HMGA2 及FCF-23 水平增加，腎功能下降明顯，隨著患者病情加劇，患者體內血清HMGA2及FCF-23異常性表達增加，腎功能也隨之下降，因而在疾病后期可通過調控HMGA2及FCF-23水平提高患者生存質量。

綜上所述，與健康對照組相比，CKD 患者血清HMGA2 蛋白、FCF-23 水平升高，且血清HMGA2 蛋白、FCF-23水平與腎功能損傷程度有關。