日糧添加益生菌對肉雞免疫功能及其生長性能的影響研究

朱春紅

(平邑縣畜牧發展促進中心，山東臨沂 273300）

目前，飼料全面“禁抗” 的成果斐然，抗菌肽、微生態制劑、植物提取劑以及益生菌等都成了肉雞養殖中廣泛使用的抗生素替代品。其中，益生菌的定義是非致病性活微生物，在適量的攝入后，對機體健康有益。在肉雞飼養中，益生菌能夠起到的有益作用有：促進機體免疫功能的發育、幫助腸道維持正常的微生物群落、強化腸上皮屏障功能等[1]。在肉雞的飼養上，腸道炎癥為常見病，其發病與肉雞腸道中有益菌數量的多少息息相關，若有害菌數量增多，便會誘使疾病發生。益生菌及其代謝產物可以調節腸道緊密連接蛋白，維系動物機體中腸道微生物區系的平衡狀態[2]。本試驗通過在日糧中添加益生菌，研究其對肉雞免疫功能和生長性能的影響，并進一步比較乳雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌兩種益生菌的應用效果，以期為肉雞飼養中益生菌的合理選用提供一定參考。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

本試驗選用乳雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌(皆購自廣東微生物菌種保藏中心）作為研究菌種，取凍干純菌菌粉各1g，將乳雙歧桿菌菌粉放到無菌牛乳中進行厭氧活化；嗜酸乳桿菌菌粉放到MRS肉湯培養基中進行活化；在37℃的條件下恒溫培養14h，接種到改良MRS 固體培養基上，再于37℃條件下培養持續36h，選擇大小大致相同、光滑且圓潤的單菌落在200mL、30%無菌脫脂牛乳中擴大培養14h。

1.2 日糧配方和營養組成

結合雞營養需求、飼養標準條件等，對配制試驗基礎日糧，使用的是玉米-豆粕型日糧。具體成分和營養水平如表1 所示。

表1 基礎日糧配方和營養組成

1.3 試驗設計

試驗選擇1 日齡的肉雞(皆為雄性）540 只，隨機分成3 組，每組有6 個重復、各重復有30只雞。處理1 中肉雞僅飼喂基礎日糧；處理2 和處理3 中肉雞分別在基礎日糧中添加0.5%的乳雙歧桿菌(益生菌活菌密度為4.15×109CFU/mL）和嗜酸乳桿菌(益生菌活菌密度為4.4×109CFU/mL）；為了保證試驗菌種的活性，菌種應每日新配并在4℃條件下進行保存，用攪拌機將其與日糧充分混合均勻之后使用。試驗飼養持續42d。試驗時間：2022 年6 月18 日—7 月29日，試驗地點為平邑縣運興生態農場。

1.4 飼養管理方法

該次試驗為全封閉管理，雞舍中使用的飼養方法為3 層階梯式籠養，肉雞為1～21 日齡時，各籠中飼養10 只；肉雞進入22～42 日齡后，各籠中飼養5 只。嚴格按照肉雞飼養管理要求進行雞舍環境管理，允許肉雞自由進食與飲水。每日定時投喂飼料，并觀察和記錄雞群的健康情況；按照正常程序進行疫苗的接種。記錄各處理組飼料消耗量。

1.5 分析指標

1.5.1 生長性能

記錄肉雞初始體重，并于試驗第21、42 天，分別對各處理組肉雞進行稱重，稱重之前肉雞禁食10h，但可自由飲水；結合試驗期記錄數據，計算肉雞平均日增重 (ADG）、平均日采食量(ADFI）以及耗料增重比(F/G）。

1.5.2 免疫功能

免疫器官指數：

于試驗第42 天，分別在各處理組隨機抽選肉雞3 只，在空腹(禁食10h、飲水自由）條件下稱重，于翅下采集靜脈血，屠宰。摘取試驗肉雞的胸腺、脾臟與法氏囊，將脂肪及結締組織剔除并稱重。計算公式：免疫器官指數=免疫器官鮮重(g）/宰前空腹體重(kg）×100%[3]。

血清免疫球蛋白：取試驗采集血液放到促凝管里，在室溫條件下靜放20min，并以3000r/min的速度進行離心處理15min，取其上層血清，使用ELISA 試劑盒對IgA、IgG、IgM 含量指標進行測定

1.6 數據分析

采用SPSS 26.0 統計學軟件對試驗結果進行分析。結果以平均數±標準誤表示，數據的檢驗使用F 檢驗，p＜0.05 表示差異顯著。

2 結果和分析

2.1 益生菌對肉雞生長性能的影響

由表2 可知，肉雞在1～21 日齡、22～42 日齡時，處理2、處理3 平均日增重顯著高于處理1 (p＜0.01），料重比顯著低于處理1 (p＜0.01）；處理2 平均日增重均顯著高于處理3 (p＜0.01），處理2 料重比顯著低于處理3 (p＜0.01）。對于平均日采食量，1～21 日齡各組之間差異不顯著，但在22～42 日齡時，處理2、處理3 平均日采食量顯著高于處理1 (p＜0.01）。

表2 不同處理組肉雞生長性能差異

2.2 益生菌對肉雞免疫功能的影響

由表3 可知，在免疫器官指數上，處理2、處理3 胸腺指數、脾臟指數以及法氏囊指數均顯著高于處理1 (p＜0.01），且處理2 顯著高于處理3 (p＜0.01）；在血清免疫球蛋白上，處理2、處理3 肉雞血清IgM 顯著高于處理1 (p＜0.05），且處理2 肉雞血清IgM 顯著高于處理3 (p＜0.05），但IgG 和IgA 各組之間差異不顯著(p＞0.05）。

表3 不同處理組肉雞免疫功能差異

3 討論

在本試驗中，與處理1 相比，處理2、處理3 肉雞在21 日齡及42 日齡時的平均日增重皆有顯著提高、料重比均有明顯降低，說明在日糧中添加0.5%的益生菌有利于改善肉雞生長性能。其原因可能是益生菌會定植于肉雞腸道中，刺激消化酶分泌，使得肉雞能夠更有效地吸收日糧當中的營養物質，從而促進其生長性能的提高[4]。此外，發現處理2 相較于處理3 的平均日增重更有顯著提高、料重比更低，提示添加0.5%乳雙歧桿菌相較于添加0.5%嗜酸乳桿菌更有利于提高肉雞生長性能。可能是因為乳雙歧桿菌在肉雞胃腸道里的生存能力更高，胃腸道里的有效菌株能夠競爭性的將致病菌排除，對免疫加以刺激，使胃腸道更好地利用營養物質，使肉雞獲得益處[5,6]。

胸腺、脾臟和法氏囊是重要的免疫器官，發揮著中樞、外周和體液免疫作用，其發育狀況可以在很大程度上反映出機體的免疫水平[7]。在本試驗中，42 日齡時，處理2、處理3 肉雞胸腺指數、脾臟指數以及法氏囊指數都明顯高于處理1，說明在日糧中添加0.5%益生菌有利于促進肉雞免疫器官的生長發育，同時處理2 以上評估指數數據皆要更高于處理3，說明添加0.5%乳雙歧桿菌相較于添加0.5%嗜酸乳桿菌更有利于肉雞免疫器官的生長發育。另外，動物機體中的免疫球蛋白可通過對病原微生物的清除來溶解細菌、中和病毒，并基于抗原作用發揮重要的免疫調節功能[8]。在本試驗中，處理2、處理3 肉雞血清IgM 皆要顯著高于處理1，且處理2 肉雞血清IgM 更高于處理3，說明益生菌能夠有效作用于對肉雞機體免疫系統的調節，尤其是乳雙歧桿菌可以通過對肉雞機體抗炎因子、促炎因子水平的平衡維持，激活機體免疫系統，保證良好的免疫功能。

4 結論

在本試驗條件下，綜合考慮平均日增重、料重比、免疫器官指數和免疫球蛋白，日糧中添加益生菌能夠顯著提高肉雞免疫功能與生長性能，與嗜酸乳桿菌相比，乳雙歧桿菌的使用效果較好。