急性支氣管肺炎患兒EOS%、CCR3、Eotaxin與病情嚴重程度的關系

王雅玲 黃運麗 田 密 王順蘭 肖 莉

（1.洪湖市人民醫院兒科，湖北 洪湖 433200；2.洪湖市中醫醫院內科，湖北 洪湖 433200；3.洪湖市人民醫院內科，湖北 洪湖 433200）

小兒支氣管肺炎是兒科常見疾病，若未得到及時控制，可能會引發其他重要器官或組織損傷，嚴重影響兒童健康[1]。因此，尋找敏感的血清學指標對評估支氣管肺炎患兒病情發展具有重要意義。氣道炎癥一般以嗜酸性粒細胞（eosinophil，EOS）浸潤為主[2]。發生炎性浸潤時，趨化因子會與靶細胞相應受體特異性結合，發揮組織定位、再循環等病理生理作用[3]。有研究發現，CC趨化因子受體3（CC chemokine receptor 3，CCR3）主要表達于EOS表面，通過與嗜酸性粒細胞趨化因子（eotaxin，Eotaxin）特異性結合來發揮作用，可使炎癥細胞向病灶聚攏，經活化、誘導，使更多炎癥因子被釋放，促進炎癥發生、發展[4]。有研究結果顯示，EOS、CCR3、Eotaxin分別在支氣管哮喘等呼吸系統疾病患兒中高表達[5-6]，但其在支氣管肺炎患兒中的表達水平及與患兒病情嚴重程度的關系尚不清楚。為此，本研究擬探討血清CCR3、Eotaxin水平和嗜酸性粒細胞百分比（eosinophil percentage，EOS%）與急性支氣管肺炎患兒疾病嚴重程度的關系。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2019年8月—2021年6月洪湖市人民醫院收治的急性支氣管肺炎患兒126例（支氣管肺炎組），其中男72例、女54例，年齡（5.97±1.22）歲。納入標準：1）均符合第8版《諸福棠實用兒科學》[7]中急性支氣管肺炎相關診斷標準；2）年齡≤12歲；3）均為首次治療，入院前未使用糖皮質激素、免疫制劑、大環內酯類抗菌藥物。排除標準：1）合并血液系統疾病或感染性疾??；2）合并腫瘤、免疫系統疾病；3）合并其他肺部疾病，如哮喘、慢性支氣管肺炎、肺結核；4）合并心、肝、腎等重要臟器功能不全。根據急性支氣管肺炎患兒入院時臨床肺部感染評分（clinical pulmonary infection score，CPIS）[8]將126例患兒細分為輕癥組（CPIS評分≤6分）[81例，其中男45例、女36例，年齡（6.04±1.29）歲]和重癥組（CPIS評分>6分）[45例，其中男27例、女18例，年齡（5.89±1.17）歲]。另選取同期洪湖市人民醫院體檢健康兒童60名（正常對照組），其中男36名、女24名，年齡（5.94±1.52）歲。入選標準：1）年齡≤12歲；2）體格檢查均正常；3）配合度良好，可完成相關研究。支氣管肺炎組與正常對照組年齡、性別差異均無統計學意義（P>0.05）。本研究獲得洪湖市人民醫院倫理委員會批準（LS2019-032），所有研究對象家屬或監護人均知情同意，并自愿簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 血清CCR3、Eotaxin水平檢測

采集支氣管肺炎患者確診后次日、正常對照者體檢當日的清晨空腹肘靜脈血5 mL，4 ℃ 1 000×g離心10 min，分離血清，-20 ℃保存，1周內統一完成檢測。采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清CCR3、Eotaxin水平。人CCR3試劑盒購自上海聯邁生物工程有限公司[批號M100975；線性范圍4.00～50.00 pg/mL，最低檢測限為2.12 pg/mL，批間變異系數（coefficient of variation，CV）<15%，批內CV<10%，標準曲線r值為0.996]；人Eotaxin試劑盒購自北京百奧萊博科技有限公司（批號BL60172；線性范圍63.10～300.00 pg/mL，最低檢測限為13.80 pg/mL，批間CV<15%，批內CV<10%，標準曲線r值為0.993）。檢測儀器為FT-SY96A全自動酶標儀（山東風途物聯網科技有限公司）。嚴格按儀器和試劑盒說明書進行操作。

1.2.2 外周血EOS%檢測

采用真空乙二胺四乙酸二鉀抗凝管采集所有研究對象靜脈血3 mL。采用XE-2100全自動血液分析儀（日本希森美康公司）及配套試劑檢測EOS%。

1.2.3 肺功能檢測

采用FGC-A+型全自動肺功能檢測儀（安徽安科生物工程股份有限公司）檢測急性支氣管肺炎患兒肺功能，包括潮氣量（tidal volume，VT）、呼吸頻率（respiratory rate，RR）、達峰容積比（the ratio of volume to peak expiratory flow to total expiratory volume，VPTEF/VE）、達峰時間比（the ratio of time to peak tidal expiratory flow to total expiratory time，TPTEF/TE）。檢測前清除患兒鼻咽部位分泌物，讓患兒自然睡眠或使用10%水合氯醛對患兒進行催眠，取仰臥位，將儀器面罩扣在患兒口鼻上，壓緊邊緣防止漏氣，每例患兒檢測5次，取至少3次有效數據，檢測結束后，取測量結果平均值。

1.3 統計學方法

采用SPSS 25.0軟件進行統計分析。呈正態分布的計量資料以±s表示，2個組之間比較采用t檢驗。計數資料以例或率表示，組間比較采用χ2檢驗。采用Pearson相關分析評估各項指標之間的相關性。采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評價各項指標診斷重癥急性支氣管肺炎的效能。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 支氣管肺炎組和正常對照組EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平比較

支氣管肺炎組EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平均顯著高于正常對照組（P=0.000）。見表1。

表1 支氣管肺炎組和正常對照組EOS%、血清CCR3、Eotaxin水平比較

2.2 輕癥組和重癥組血清CCR3、Eotaxin水平、EOS%、肺功能指標比較

與輕癥組比較，重癥組血清CCR3、Eotaxin水平和EOS%、RR顯著升高（P<0.01），VT、VPTEF/VE、TPTEF/TE顯著降低（P<0.01）。見表2。

表2 輕癥組和重癥組EOS%、血清CCR3、Eotaxin水平及肺功能指標比較

2.3 急性支氣管肺炎患兒EOS%、CCR3、Eotaxin與肺功能指標的相關性分析

急性支氣管肺炎患兒EOS%、CCR3、Eotaxin與RR呈正相關（P<0.05），與VPTEF/VE、TPTEF/TE呈負相關（P<0.05），與VT無相關性（P>0.05）。見表3。

表3 急性支氣管肺炎患兒EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平與肺功能指標的相關性

2.4 EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平對重癥急性支氣管肺炎患兒的診斷價值

ROC曲線分析結果顯示，以輕癥組為對照，EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平單項檢測和聯合檢測（以3項指標均陽性為聯合檢測陽性）診斷重癥急性支氣管肺炎的曲線下面積（area under curve，AUC）分別為0.861、0.762、0.826、0.931。見表4、圖1。

圖1 EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平診斷重癥急性支氣管肺炎的ROC曲線

表4 EOS%、血清CCR3、Eotaxin水平對重癥急性支氣管肺炎患兒的診斷價值

3 討論

由EOS、淋巴細胞和巨噬細胞等分泌的細胞因子、炎癥介質等產生的浸潤性炎癥反應是支氣管肺炎的病理學基礎，其中EOS是引起支氣管肺炎的重要效應細胞之一，在炎癥的發展過程中起核心作用[9-10]。有研究認為，肺泡或上皮損傷可引起炎癥細胞的激活，導致白細胞介素33、白細胞介素25和胸腺基質淋巴蛋白的分泌，這些上皮細胞因子可刺激2型固有淋巴細胞并使輔助性T細胞2（T helper cell 2，Th2）極化，引起肺部EOS激活、聚集，上述細胞因子的存在又進一步放大了EOS的激活效應和Th2極化，加重患者病情[11]。Eotaxin是EOS高度特異性的趨化因子，正常情況下，Eotaxin主要由呼吸道上皮細胞產生；當支氣管上皮細胞處于炎癥狀態時，Eotaxin主要由巨噬細胞和EOS分泌[12]。Eotaxin的活性功能受Eotaxin受體CCR3的調控。有研究結果顯示，Eotaxin可與EOS表面的特異性受體CCR3結合，通過激活絲裂原活化蛋白激酶途徑使EOS脫顆粒，從而使EOS升高[13]。徐凌云等[14]的研究結果顯示，支氣管哮喘患兒血清Eotaxin水平明顯高于正常對照組和肺炎組（P<0.05），且血清Eotaxin可在一定程度上反映呼吸道炎癥狀態。有研究結果顯示，慢性喘息組、肺炎組、正常對照組EOS%依次降低（P<0.05），EOS對兒童支氣管哮喘具有較高的診斷價值[15]，與本研究結果相似。本研究結果顯示，急性支氣管肺炎患兒EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平均顯著高于正常對照者（P=0.000），且重癥組EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平顯著高于輕癥組（P=0.000），表明EOS%、CCR3和Eotaxin可在一定程度上反映急性支氣管肺炎患兒病情的嚴重程度。ROC曲線分析結果顯示，EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平單項檢測和聯合檢測診斷重癥急性支氣管肺炎的AUC分別為0.861、0.762、0.826、0.931，提示EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平對重癥急性支氣管肺炎均有一定的診斷價值，聯合檢測的診斷效能更高。

本研究結果還顯示，與輕癥組相比，重癥組VT減少，RR明顯增快，表明隨著支氣管肺炎病情的加重，患兒肺內通氣/血流比例失調，發生氣體彌散障礙，導致低氧血癥或高碳酸血癥，機體代償性RR增加，與李春芳等[16]支氣管肺炎患兒每分鐘VT降低的結論相符。VPTEF/VE、TPTEF/TE是反映氣道阻塞，尤其是小氣道阻塞的重要指標[17]，數值越低，表明小氣道阻塞越嚴重。本研究Pearson相關分析結果顯示，EOS%、CCR3和Eotaxin與RR呈正相關（P<0.05），與VPTEF/VE、TPTEF/TE呈負相關（P<0.05），表明外周血EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平可在一定程度上反映急性支氣管肺炎患兒肺功能的變化，具有較高的臨床價值。

綜上所述，急性支氣管肺炎患兒血清CCR3、Eotaxin水平和EOS%顯著升高，可在一定程度上反映患兒肺功能狀態，與患兒病情的嚴重程度密切相關，或可作為臨床判斷急性支氣管肺炎病情發展的血清學指標。