茯磚茶與羊乳復合乳體系的抗氧化、物理及消化穩定性研究

呂嘉櫪 王維波 康婕 伍金金

摘?要：以陜西省特色的茯磚茶和羊乳為原料，以抗氧化穩定性、物理穩定性和消化穩定性為主要指標，研究茯磚茶與羊乳復合乳體系的穩定性.試驗結果表明，25 ℃放置7 d的過程中，茯磚茶與羊乳復合乳體系抗氧化活性總體呈降低趨勢，含活性金花菌的復合乳體系（樣品1）的抗氧化穩定性最好，含無活性金花菌的復合乳體系（樣品2）次之，不含金花菌的復合乳體系（樣品3）最差.物理穩定性試驗結果顯示，茯磚茶與羊乳復合乳體系隨著放置時間的延長，物理穩定性也不斷降低，樣品3的物理穩定性強于樣品1、樣品2；掃描電鏡顯微表征顯示，茶湯中的金花菌與羊乳酪蛋白可形成復合物，從而降低了復合體系的物理穩定性.消化穩定性試驗結果表明，隨著消化時間的延長，酪蛋白體外消化率均不斷增大，但與對照組相比，茯磚茶與羊乳復合乳體系抑制了乳蛋白的消化，且胃消化階段抑制效果強于腸消化階段，樣品2的抑制效果最強，樣品1次之，樣品3最差.研究結果為進一步開發研制茯磚茶羊奶奶茶新產品提供了重要理論依據與技術支撐.

關鍵詞：茯磚茶；羊乳；抗氧化穩定性；物理穩定性；消化穩定性

中圖分類號：TS201.3

文獻標志碼： A

文章編號：2096-398X（2023）04-0048-10

Abstract：Taking the characteristic Fu Brick tea and goat milk of Shaanxi Province as raw materials，and taking the antioxidant stability，physical stability and digestive stability as the main indicators，the stability of the complex milk system of Fu Brick tea and goat milk was studied.The results showed that the antioxidant activity of the complex system of Fu Brick tea and goat milk decreased after being placed at 25 ℃ for 7 days.Among them，the antioxidant activity of the compound milk system containing activated eurotium cristatum was the best（sample 1），the second was the compound milk system containing inactive eurotium cristatum（sample 2），the last one is the compound milk system without eurotium cristatum（sample 3）.The results of the physical stability test showed that the physical stability of Fu Brick tea and goat milk complex milk system decreased with the extension of time，the physical stability of sample 3 is stronger than that of sample 1 and sample 2，scanning electron microscope microscopic characterization showed that eurotium cristatum in tea soup could form a complex with casein from sheep milk，which reduced the physical stability of the complex system.Digestive stability test results show that the longer duration of digestion，casein in vitro digestibility are growing，but compared with the control group，Fu Brick tea with goat milk composite emulsion system inhibits milk protein digestion，and stomach digestion phase inhibition effect is stronger than the intestinal digestion phase，the strongest inhibitory effect of sample 2，second sample1，sample 3 is the worst.The research results provide important theoretical basis and technical support for further development of new products of Fu Brick tea and goat milk tea.

Key words：Fu Brick tea；goat′s milk；oxidation resistance stability；physical stability；digestion stability

0?引言

茶與乳復合作為奶茶飲用的歷史悠久，因其營養豐富、香醇可口，深受消費者喜食.茶乳復合既能中和茶的苦澀味和奶的乳腥味，同時又能保留奶的濃郁和茶的清香，口感獨特，滋味協調.茶作為天然的抗氧化劑能夠抑制乳蛋白的氧化，提高乳的抗氧化能力［1］.此外，乳中的鈣離子和茶中富含的草酸在體外的結合降低了體內草酸攝入的濃度，減少了腎結石（草酸鈣結石）在體內產生的風險［2］，因此茶與乳復合的飲用方式深受不同飲用者喜愛.

但茶與乳復合時，茶、乳主要成分之間會發生相互作用，影響復合體系的穩定性.目前，有關茶與乳復合相關研究主要集中在工藝配方上，關于不同種類的茶與不同種類的乳復合制備奶茶的工藝配方研究，紅茶奶茶［3，4］、烏龍茶奶茶［5］、抹茶奶茶［6］、普洱奶茶［7］、青磚茶奶茶［8］、茯磚茶奶茶［9］和綠茶羊奶茶［10］等都有研究.其中，紅茶和牛奶是制備奶茶的主要原料［3-10］.關于茶與乳復合之后活性成分的相互作用及其復合后各自的營養價值和穩定性的變化等研究，主要還是以紅茶和牛奶為主［11-13］.而茯磚茶與羊乳復合的研究較少.

茯磚茶被譽為西北各民族生命茶［14］，具有降血糖、降血脂、減肥、抗氧化、抗腫瘤、抑菌、調節胃腸道等多種保健功能［15］.羊乳被譽為“奶中之王”，在抗氧化、降低膽固醇、改善腸道功能、低致敏性、提高消化吸收等方面的作用都強于牛乳［16］.另外，茯磚茶中含有大量獨特的金花菌，金花菌具有很高的耐熱性，孢子較大，懸浮于溶液中，在茯磚茶與羊乳復合過程中，金花菌對復合體系穩定性的影響亟待研究.因此，本研究以陜西省特色的茯磚茶和羊乳為原料，通過對茯磚茶與羊乳復合乳體系的抗氧化穩定性、物理穩定性和消化穩定性等方面研究，為進一步開發茯磚茶羊奶奶茶新產品提供理論依據與技術支持.

1?材料與方法

1.1?實驗原料

1.1.1?原材料

茯磚茶：咸陽涇渭茯茶有限公司；羊乳：陜西金牛乳業有限公司.

1.1.2?培養基

PDA固體培養基：稱取PDA培養基37.0 g，加入1 000 mL蒸餾水中，加熱煮沸溶解，分裝，121 ℃高壓滅菌15 min，備用.

1.1.3?試劑樣品及配置

磷酸氫二鈉、三氯化鐵、濃鹽酸、磷酸二氫鉀、濃硫酸、氫氧化鈉、磷酸二氫鈉、醋酸鉀、硝酸鋁，天津市科密歐試劑有限公司;硫酸亞鐵、水楊酸、酒石酸鉀鈉、30% H2O2溶液、無水乙醇、鐵氰化鉀、三氯乙酸、氯化鈉、冰乙酸、尿素、氯化亞錫、茶氨酸，天津市天力化學試劑有限公司;結晶乙酸鈉，天津市恒興化學試劑有限公司;1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH），西安東升化工有限公司;蘆丁標準品，國藥集團化學試劑有限公司;以上試劑均為分析純.

胃蛋白酶（豬胃黏膜）、胰蛋白酶（豬胰）、BCA蛋白檢測試劑盒，福州飛凈生物科技有限公司;PDA培養基，北京奧博星生物技術有限責任公司.

配制的主要試劑如下：

（1）DPPH溶液（0.2 mmol/L）：準確稱取7.88 mg DPPH，用無水乙醇定容至100 mL.

（2）0.3 M pH 3.6的醋酸緩沖液：稱取0.364 g結晶乙酸鈉，加入3.2 mL冰乙酸，蒸餾水定容至200 mL，再用1 mol/L HCL調節pH至3.6.

（3）10 mmol/L TPTZ溶液：0.078 g TPTZ用40 mM鹽酸溶液定容至25 mL.

（4）20 mmol/L FeCl3溶液：2.78 g FeCl3.6H2O用去離子水定容至50 mL.

（5）FRAP工作液：0.3 M pH 3.6的醋酸緩沖液、10 mmol/L TPTZ溶液、20 mmol/L FeCl3溶液按順序以10∶1∶1的比例混合，現配現用.

1.2?儀器與設備

MJP型霉菌培養箱（北京中興偉業儀器）；UV-2600型紫外分光光度計（蘇州萊頓儀器）；HC-3018R型高速冷凍離心機（安徽中科中佳儀器）；SYQ-DSX-280B型壓力蒸汽滅菌鍋（上海申安醫療器械廠）；LECIA SMART生物顯微鏡（北京瑞克中義儀器）；LitesizerTM500納米粒度及zeta電位儀（奧地利安東帕）；PHENOM-PRO臺式掃描電鏡（上海飛納儀器）FJ200型高速分散均質機（廣州越特科學儀器）.

1.3?實驗方法

1.3.1?茯磚茶茶湯的制備

首先，根據前期試驗研究，以茶湯中茶多酚、茶黃素、茶紅素、茶褐色的含量，及其與羊乳復合后的乳液的感官評分、氨基酸總量、黃酮總量、多酚總量、可溶性蛋白質總量、可溶性糖總量等的分析，選出了茯磚茶茶湯制備的最優條件為料水比1 g∶45 mL，浸提溫度82 ℃，浸提時間30 min；其次，按照最優條件制備的茶湯，以離心沉淀率和感官評分為指標，得到茶湯和羊乳復合的最佳配比為2∶1；最后，在最佳浸提條件下制備了含活性金花菌的茶湯、含無活性金花菌的茶湯和無金花菌的茶湯三種茶湯.

（1）含活性金花菌的茶湯的制備：茯磚茶與水的料水比為1 g茶∶45 mL水，82 ℃浸提30 min后，100目過濾，取1 mL此茯磚茶茶湯通過PDA培養基培養5～7天檢測其中金花菌活菌數為154 CFU/mL，該茶湯即為含活性金花菌的茶湯.通過光學顯微鏡制水浸片來觀察茶湯中的金花菌，然后將茶湯通過12 000 r/min離心10 min，去掉上清液，將底部少量沉淀用掃描電鏡觀察茶湯中的金花菌，均發現有活性金花菌的存在.

（2）含無活性金花菌的茶湯的制備：將制備好的含活性金花菌的茶湯通過95 ℃、10 min的加熱條件殺菌，再用PDA培養基檢測金花菌活菌數，未檢測到活的金花菌，所以將制備的含活性金花菌的茶湯通過95 ℃、10 min滅菌處理，就可以得到含無活性金花菌的茶湯.通過光學顯微鏡制水浸片來觀察茶湯中的金花菌，然后將茶湯通過12 000 r/min離心10 min，去掉上清液，將底部少量沉淀用掃描電鏡觀察茶湯中的金花菌，均觀察到無活性的金花菌.

（3）無金花菌的茶湯的制備：將含活性金花菌的茶湯通過12 000 r/min離心10 min，再用0.45 um的微濾膜過濾兩次，用光學顯微鏡觀察此茶湯，光學顯微鏡下觀察到的茯磚茶茶湯已經顯示無金花菌存在，則能夠完全去除金花菌顆粒得到無金花菌的茯磚茶茶湯.

1.3.2?茯磚茶與羊乳復合乳液的制備

分別將含活性金花菌的茶湯、含無活性金花菌的茶湯和無金花菌的茶湯與羊乳按2∶1的體積比混合均勻，得到三種茯磚茶與羊乳的復合乳液（分別標記為樣品1、樣品2、樣品3），將此復合乳液于25 ℃下放置7天，并于0 d、1 d、3 d、5 d、7 d時取樣，分析測試其抗氧化穩定性、物理穩定性和酪蛋白消化穩定性.

1.3.3?抗氧化穩定性分析

樣品的前處理：參考顏慧等［17］的研究并稍作改進，分別取0 d、1 d、3 d、5 d、7 d時的樣品1、樣品2和樣品3 10 mL，加入5 mL 95%的乙醇、3 mL 10 g/L的三氯乙酸溶液和1 mL 10 g/L的氯化鈉溶液，最后用95%的乙醇定容至25 mL，靜置10 min后過濾，檢測濾液中的茶多酚含量、總抗氧化活性、DPPH自由基清除率、羥自由基清除率、總還原力.

1.3.4?物理穩定性分析

分別取0 d、1 d、3 d、5 d、7 d時的樣品1、樣品2和樣品3，拍照觀察樣品的沉淀分層現象，檢測其離心沉淀率，用納米粒度和zeta電位儀檢測其中的平均粒徑和zeta電位；用光學顯微鏡和掃描電鏡觀察茯磚茶中的金花菌與羊乳酪蛋白的復合情況.

1.3.5?消化穩定性分析

分別取0 d、1 d、3 d、5 d、7 d時的樣品1、樣品2和樣品3，測定樣其中的蛋白質的體外消化率和抗氧化活性的變化，以等量蒸餾水和等量羊乳復合做空白對照.

模擬胃消化：分別取30 mL樣品溶液，用2 mol/L鹽酸溶液調節pH值到3.0，按照1∶100的比例加入胃蛋白酶，37 ℃恒溫水浴，震蕩酶解2 h，胃消化完成后調節各組pH值到7.5終止消化.消化時，分別在0.5 h、1 h、2 h的時取樣分析.

模擬腸消化：將剩余的胃消化液繼續進行腸消化試驗.同樣按1∶100的比例加入胰蛋白酶，37 ℃恒溫水浴，震蕩酶解2 h，腸消化完成后，沸水浴10 min終止消化.分別在0.5 h、1 h、2 h的時取樣分析.

1.3.6?數據統計與分析

每組試驗數據平行測定三次，用Excel 2021軟件計算平均值和標準偏差，Origin 2021軟件作圖，SPSS 25.0軟件對數據進行顯著性分析，p<0.01或者p<0.05.

1.4?檢測方法

1.4.1?掃描電鏡顯微表征

參考文獻［18］方法，取待測樣品，高速離心后去掉上清液，取沉淀物用2.5%的戊二醛溶液固定3～4 h，然后5 000 r/min離心10 min去除上清液.用無菌磷酸鹽緩沖液清洗三次，每次均需離心去除上清液.使用乙醇梯度（30%、50%、75%、100%）脫水10 min，然后同樣離心去除上清液.將上述處理后的樣品放入烘箱60 ℃干燥處理，干燥好的樣品放置于真空鍍膜裝置鍍金，噴金后的樣品即可在掃描電鏡下觀察.

1.4.2?茶多酚含量

采用GB/T 21733-2008《茶飲料》中的酒石酸亞鐵比色法測定茶多酚含量［19］.

1.4.3?總抗氧化活性

參考劉宇等［20］的方法，以1～10 mmol/L不同濃度的FeSO4溶液濃度值為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線，如圖1所示.

用移液槍吸取供試樣液100 μL，加入FRAP工作液3 mL，37 ℃反應10 min，于593 nm處測吸光度.將吸光度值代入標準曲線y=0.307 01x-0.007 89即可得到總抗氧化活性FRAP值（mmol/L）.

1.4.4?DPPH自由基清除率

測定加樣的程序如表1所示.按表1加入試液后，混合均勻，避光反應30 min，分別在517 nm波長下測定吸光值A樣、A空、A對，DPPH自由基清除率（%）=［1-（A樣-A空）/A對］ ×100%.

1.4.5?羥自由基清除率

依次將1 mL FeSO4溶液（9 mmol/L）、1 mol水楊酸（9 mmol/L）及1 mol試樣加入到10 mL離心管中，混勻后加入1 mL H2O2（8.8 mmol/L）引發反應，反應在37 ℃下進行30 min后用紫外分光光度計測定510 nm處的吸光度值.以水代替H2O2測定樣品的本底吸光度值，以蒸餾水代替試樣測空白對照的吸光度值.利用公式（1）計算羥自由基清除率：

式（1）中：A0為空白對照樣品吸光度，Ax為試樣吸光度，Ax0為水替代H2O2的本底吸光度.

1.4.6?總還原力

采用鐵氰化鉀還原法［20］檢測總還原力，總還原力以吸光度值的大小表示.

1.4.7?離心沉淀率

稱取10 mL離心管的質量記為m0，分別加入8 mL試樣，稱取離心管和試樣的質量之和記為m1，3 000 g離心30 min，去掉清液后稱取沉淀物和離心管的質量之和記為m2，離心沉底率（%）=（m2-m0）/（m1-m0）×100%.

1.4.8?平均粒徑

納米粒度和zeta電位儀相關參數：90 °散射角，顆粒吸收率0.887 2，顆粒折射率1.450，分散劑折射率1.330，分散劑為水.樣品池直徑為1 cm，加樣體積不超過2/3，測定溫度為 25±1 ℃，由儀器自帶的軟件計算平均粒徑.

1.4.9?zeta電位

納米粒度和zeta電位儀相關參數與平均粒徑的檢測設定相同.加樣量（1 mL以下）不超過最大刻度線.

1.4.10?蛋白質體外消化率

取待測試液和等體積10%的三氯乙酸溶液混合，4 000 r/min離心10 min，取上清液，用BCA蛋白檢測試劑盒檢測蛋白質濃度，并計算含量，計算時需減去消化0 h的上清液中蛋白質含量.按公式（2）～（4）計算蛋白質胃消化率（PDG）、蛋白質腸消化率（PDI）、蛋白質總消化率（PDT）：

式（2）～（4）中：P0為樣品中的蛋白質含量/mg；P1、P2分別為模擬胃液、腸液消化后上清液中的蛋白質含量/mg.

2?結果與討論

2.1?茶湯的顯微表征

茯磚茶中有獨特并且大量存在的金花菌，圖2為含活性金花菌的茶湯中金花菌的顯微特征，圖3為含無活性金花菌的茶湯的顯微特征.

由圖2、圖3可知，含活性金花菌的茶湯中金花菌的子囊果較為完整，掃描電鏡下只有很少的子囊果破裂，子囊孢子的形態良好；而含無活性金花菌的茶湯中金花菌的子囊果破裂較多，光學顯微鏡下觀察到子囊孢子較多地釋放到茶湯中，且掃描電鏡下部分子囊孢子有干癟的跡象.說明溫度過高能夠使金花菌的子囊果破裂，子囊孢子失去活性，從而使含活性金花菌的茶湯變為含無活性金花菌的茶湯.

2.2?茯磚茶與羊乳復合乳體系的抗氧化穩定性

2.2.1?茶多酚含量的變化

由圖4可知，茶湯和羊乳復合0 d時，樣品1、樣品2、樣品3的茶多酚含量相差不顯著；放置1 d 時樣品1、樣品2的茶多酚含量顯著高于樣品3的茶多酚含量；放置3 d時樣品1的茶多酚含量顯著高于另外兩組，3 d時樣品1、樣品2、樣品3的茶多酚含量分別為15.56 mg/g、12.15 mg/g、11.88 mg/g；放置5 d時樣品1、樣品2、樣品3的茶多酚含量之間都有顯著性差異，且樣品1的茶多酚含量最高，樣品2次之，樣品3含量最低；放置7 d時同3 d時，樣品1的茶多酚含量明顯高于另外兩組.

2.2.2?總抗氧化活性的變化

由圖5可知，隨著放置時間的延長，樣品1、樣品2、樣品3的鐵離子還原總抗氧化活性都不斷增大，并且一直是樣品1的FRAP值最大，樣品2的FRAP值次之，樣品3的FRAP值最小；放置3 d時，樣品1、樣品2、樣品3的FRAP值分別為8.56 mmol/L、8.52 mmol/L、8.49 mmol/L.另外，樣品1放置3 d時總抗氧化活性顯著增強，樣品2放置5 d時總抗氧化活性顯著增強，而樣品3放置7 d時總抗氧化活性才顯著增強.說明金花菌有利于提高茯磚茶茶湯和羊乳復合體系的抗氧化穩定性.

2.2.3?DPPH自由基清除率的變化

由圖6可知，隨著放置時間的延長，樣品1、樣品2、樣品3的DPPH自由基清除率都在不斷降低，這與總抗氧化活性的結果正好相反.其中，樣品1、樣品2的DPPH自由基清除率在放置7 d時顯著降低，而樣品3的DPPH自由基清除率在放置3 d時就顯著降低，說明茶湯中的金花菌具有延緩茯磚茶茶湯和羊乳復合體系抗氧化活性降低的作用.復合0 d時，樣品2的DPPH自由基清除率最高，為94.98%；但放置1 d后，三個樣品的DPPH自由基清除率一直是樣品1最大，樣品2次之，樣品3最小；放置3 d時，樣品1、樣品2、樣品3的DPPH自由基清除率分別為92.82%、92.04%、91.87%.

2.2.4?羥自由基清除率的變化

由圖7可知，隨著放置時間的延長，樣品1、樣品2、樣品3的羥自由基清除率也在不斷降低，這與2.2.3的結果一致.復合0 d時，三組樣品的羥自由基清除率差異不顯著，但是在放置1 d、3 d和5 d時，樣品1的羥自由基清除率都顯著高于另外兩組，到放置7 d時三組樣品之間的羥自由基清除率才沒有顯著性差異.說明茶湯中的活性金花菌在一定時間（0 d～5 d）內有利于延緩茯磚茶茶湯和羊乳復合體系抗氧化活性的降低.放置3 d時，樣品1、樣品2、樣品3的羥自由基清除率分別為82.80%、81.16%、80.56%.

2.2.5?總還原力的變化

由圖8可知，隨著放置時間的延長，樣品1、樣品2的總還原力呈略微波動后降低的趨勢，樣品3的總還原力逐漸降低，放置7 d時三組樣品的總還原力低于復合0 d時的總還原力.放置3 d時樣品1、樣品2的總還原力有增強現象可能是茶湯中金花菌包含的活性物質隨著子囊果的破裂和子囊孢子的解離被釋放出來從而增強體系的總還原力.另外，放置3 d、5 d時樣品1、樣品2的總還原力顯著高于樣品3的總還原力.說明茶湯中的金花菌（包括活性和無活性金花菌）在一定時間（0～5 d）內有利于延緩茯磚茶茶湯和羊乳復合體系抗氧化活性的降低.放置3 d時，樣品1、樣品2、樣品3的總還原力分別為1.873、1.858、1.777.

2.3?茯磚茶與羊乳復合乳體系的物理穩定性

2.3.1?平均粒徑的變化

由圖9可知，樣品1、樣品2、樣品3，0 d時體系的水動力學平均粒徑無顯著性差異；放置1 d時，樣品1、樣品3的平均粒徑略有減小，說明短時間內復合體系的顆粒有輕微溶解，物理穩定性仍然維持較好；放置1 d時樣品2的平均粒徑略有增大，顯著大于另外兩組，可能是樣品2的金花菌子囊孢子和羊乳酪蛋白接觸比表面積更大，所以放置1 d時體系的物理穩定性低于樣品1和樣品3；放置3 d時樣品1、樣品2的平均粒徑開始顯著增大，且顯著大于樣品3的平均粒徑，說明樣品1、樣品2的穩定性在放置3 d時顯著降低；樣品3在放置1 d、3 d時的平均粒徑無顯著性變化，放置5 d時平均粒徑才顯著增大，說明樣品3的穩定性在放置5 d時顯著降低；放置3 d時，樣品1、樣品2、樣品3的平均粒徑分別為897.41 nm、1029.09 nm、475.21 nm；說明含金花菌的茶湯和羊乳復合體系的穩定性低于無金花菌的茶湯和羊乳復合體系的穩定性.

2.3.2?zeta電位的變化

由圖10可知，樣品1、樣品2、樣品3，0 d時復合體系的zeta電位絕對值無顯著性差異；隨著放置時間的延長，樣品1、樣品2、樣品3的zeta電位絕對值都不斷降低，說明茯磚茶茶湯和羊乳復合體系隨放置時間的變化穩定性不斷降低；樣品1、樣品2的zeta電位絕對值在第3 d顯著降低，說明含金花菌的茶湯和羊乳復合體系在放置3 d時變得不穩定；而樣品3的zeta電位絕對值在放置5 d時才陡然降低，說明無金花菌的茶湯和羊乳復合體系在放置5 d時變得不穩定；放置3 d時，樣品1、樣品2、樣品3的zeta電位絕對值分別為18.07 mV、17.83 mV、20.93 mV；所以無金花菌的茶湯和羊乳復合體系的穩定性強于含金花菌的茶湯和羊乳復合體系.

2.3.3?離心沉淀率的變化

由圖11可知，樣品1、樣品2、樣品3，0 d時體系的離心沉淀率無顯著性差異；隨著放置時間的延長，樣品1、樣品2、樣品3的離心沉淀率都不斷增大，說明茯磚茶茶湯和羊乳復合體系隨時間的變化穩定性不斷降低；樣品1、樣品2的離心沉淀率在放置3 d時陡然增大，說明含金花菌的茯磚茶茶湯和羊乳復合體系在放置3 d時變得不穩定；樣品3的離心沉淀率在放置5 d時才陡然增大，說明無金花菌的茶湯和羊乳復合體系在放置5 d時變得不穩定；放置3 d時，樣品1、樣品2、樣品3的離心沉淀率分別為10.04%、10.29%、6.93%；所以無金花菌的茶湯和羊乳復合體系的穩定性強于含金花菌的茶湯.

2.3.4?沉淀分層的變化

由圖12可知，樣品1、樣品2、樣品3，0 d時體系保持物理穩定，無沉淀分層現象，隨著放置時間的延長，樣品1、樣品2在3 d時發生沉淀分層現象，樣品3在3 d時仍然保持物理穩定，在放置5 d時才發生沉淀分層現象，這與上文檢測的平均粒徑、zeta電位、離心沉淀率等數據所反應的結果一致，樣品3相對于樣品1和樣品2與羊乳復合體系的物理穩定性更好.

總之，無金花菌的茶湯和羊乳復合體系的物理穩定性強于含金花菌的茶湯，金花菌對復合體系維持物理穩定性有顯著抑制作用，金花菌可能會和羊乳體系中的酪蛋白相互作用從而導致復合體系發生沉淀分層現象.

2.3.5?茶湯與羊乳復合乳體系的顯微表征

由圖13、圖14可知，茯磚茶與羊乳復合體系中，釋放到茶湯中的金花菌子囊孢子會被羊乳酪蛋白膠束包裹.由于樣品2中的金花菌子囊果絕大部分破裂，子囊孢子分散開，散落的子囊孢子與羊乳酪蛋白接觸的比表面積更大，包裹更充分，因此很難被掃描電鏡觀察到，偶然觀察到幾個子囊孢子結合在酪蛋白膠束中；樣品1中未破裂的金花菌子囊果內部的子囊孢子無法和羊乳酪蛋白結合，只有子囊果破裂后，散落的子囊孢子才能夠和羊乳酪蛋白充分結合；總之，無論是含活性金花菌還是含無活性金花菌的茶湯，和羊乳復合后，其中的金花菌都會和羊乳酪蛋白結合形成復合物，從而可能降低復合體系的物理穩定性，這也解釋了為什么含金花菌的茶湯和羊乳復合體系的物理穩定性低于無金花菌的茶湯.

2.4?茯磚茶與羊乳復合乳體系的消化穩定性

茯磚茶與羊乳復合乳體系的蛋白胃消化率、腸消化率和總消化率的變化如圖15～17所示.由圖15～17可知，PDG、PDI、PDT分別代表蛋白質模擬體外胃消化率、蛋白質模擬體外腸消化率和蛋白質模擬體外總消化率.

在胃消化30 min時，樣品1、樣品2、樣品3的PDG分別從16.38%降低到14.87%、13.60%（P<0.05）和14.97%；胃消化60 min時，分別從23.95%降低到18.38%（P<0.000 1）、16.60%（P<0.000 1）和19.77%（P<0.001）；胃消化120 min時，分別從28.33%降低到20.95%（P<0.000 1）、18.17%（P<0.000 1）和23.66%（P<0.001）.

在腸消化30 min時，樣品1、樣品2、樣品3的PDI分別從34.22%降低到28.21%（P<0.01）、27.23%（P<0.01）和29.29%（P<0.01）；腸消化60 min時，分別從50.51%降低到40.24%（P<0.001）、38.52%（P<0.000 1）和43.18%（P<0.01）；腸消化120 min時，分別從53.57%降低到43.65%（P<0.000 1）、40.08%（P<0.000 1）和46.84%（P<0.001）.

其中，樣品1、樣品2、樣品3的PDG在120 min時分別降低了26.05%、35.86%、16.48%，降低呈顯著性；樣品1、樣品2、樣品3的 PDI在120 min時分別降低了18.52%、25.18%、12.56%，降低呈顯著性.說明樣品1、樣品2、樣品3對乳蛋白在胃消化階段的抑制作用大于腸消化階段，這可能是因為胃消化階段為酸性環境，而腸消化階段為堿性環境，而蛋白質在酸性條件下難溶，在中性和堿性條件下易溶，所以在胃消化階段，羊乳蛋白以不溶性的膠體或顆粒形式存在，茶湯此時和羊乳復合，其包含的活性成分更易包裹在蛋白質周圍形成較大的粒子從而阻礙其消化.

另一方面，在胃消化階段，樣品1、樣品2、樣品3的蛋白質體外消化率分別從30 min的14.87%、13.6%、14.97%增長到120 min的20.95%、18.17%、23.66%，增速分別為40.89%、33.60%、58.05%；腸消化階段則分別從28.21%、27.23%、29.29%增長到43.65%、40.08%、46.84%，增速分別為54.73%、47.20%、59.92%；進一步說明了樣品1、樣品2、樣品3在腸消化階段的消化作用強于胃消化階段，即在胃消化階段的抑制作用大于腸消化階段.

總之，隨著消化時間的延長，蛋白質體外消化率不斷增大.樣品1、樣品2、樣品3的模擬體外胃消化率、腸消化率和總消化率均顯著低于對照組，說明茶湯和羊乳復合有利于降低乳體系的蛋白質的模擬體外消化率，主要原因可能是茶湯中主要是多酚等小分子活性成分，它們易于和乳中蛋白質結合從而降低蛋白質的體外消化率，這與杜淑霞等［21］的研究一致.另外，樣品2的體外蛋白質胃消化率、腸消化率和總消化率最低，樣品1次之，樣品3最高.說明金花菌在茶湯和羊乳復合體系中也能夠起到降低乳中蛋白質體外消化率的作用，且無活性的金花菌的作用強于活性金花菌的作用，這可能是因為金花菌也能夠和羊乳蛋白結合從而降低蛋白質的體外消化率，而由顯微表征可知，無活性金花菌因其大部分子囊果破裂，子囊孢子和活性成分釋放更充分，更增大了其與羊乳蛋白質接觸的比表面積，所以其降低乳蛋白體外消化率的作用更強.

3?結論

試驗以陜西省特色茯磚茶和羊乳為原料，制備了三種茯磚茶茶湯，且分別與羊乳進行復合，較為全面系統地研究了復合乳體系的抗氧化穩定性、物理穩定性和消化穩定性，表明了二者復合后對三種穩定性均有不同的影響.

其中，隨著放置時間的延長，抗氧化活性呈現降低趨勢，茯磚茶中的金花菌有利于維持茯磚茶與羊乳復合體系的抗氧化穩定性，且活性金花菌的作用強于無活性金花菌；隨著放置時間的延長，物理穩定性不斷降低，茯磚茶中的金花菌不利于維持茯磚茶與羊乳復合體系的物理穩定性，通過掃描電鏡發現可能是由于金花菌能夠與羊乳酪蛋白結合形成復合物；而隨著消化時間的延長，復合體系的消化作用不斷增強，腸消化階段的消化作用強于胃消化階段，茯磚茶中的金花菌對復合體系的消化有抑制作用，且無活性金花菌的抑制作用強于活性金花菌，無活性金花菌的子囊孢子釋放更充分，和羊乳酪蛋白結合的比表面積更大，所以對體外消化的抑制作用更強.

研究結果表明了茯磚茶與羊乳復合的可行性，揭示了茯磚茶中的金花菌是影響茯磚茶與羊乳復合體系穩定性的因素，金花菌對復合體系抗氧化穩定性的影響較小，對物理穩定性和消化穩定性的影響較大，且無活性金花菌的作用強于活性金花菌.研究結果為進一步開發茯磚茶羊奶奶茶新產品提供了重要理論依據與技術支持.

參考文獻

［1］ 趙鉅陽，姚恒喆，石長波.多酚與蛋白質相互作用及其對蛋白質影響［J］.食品與生物技術學報，2020，39（12）：14-20.

［2］ Noonan S C，Savage G P.Oxalate content of foods and its effect on humans［J］.Asia Pacific Journal of Clinical Nutrition，2015，8（1）：64-74.

［3］ 楊慶瑩，謝克英，王彥平，等.奶茶工藝配方的研究［J］.河南農業，2015，26（8）：62-64.

［4］ 阮巧莉，韓俊成，代?濛，等.新疆奶茶對小鼠生理生化指標的影響［J］.現代食品，2021，7（9）：94-100.

［5］ 傅新征，張美玲.大紅袍奶茶加工工藝的研究［J］.武夷學院學報，2014，33（5）：28-32.

［6］ 王國宇，張?維，張?鐵，等.抹茶奶茶固體飲料研制［J］.福建茶葉，2014，36（4）：16-19.

［7］ 楊薇紅，韓艷麗，洪文龍，等.紫薯普洱奶茶的配方優化研究［J］.農產品加工，2017，16（6）：14-16.

［8］ 閆?舒，王凌琴，劉紅娜.不同工藝條件對青海傳統蒙古奶茶品質的影響［J］.中國奶牛，2019，37（6）：48-54.

［9］ 邵?帥，李宗軍，李?珂，等.正交試驗法優化茯磚茶奶茶配方［J］.農產品加工（學刊），2013，12（13）：37-38，42.

［10］ 王?攀.核桃羊奶茶的研制［J］.陜西農業科學，2014，60（9）：50-53.

［11］ Ryan L，Petit S.Addition of whole，semiskimmed，and skimmed bovine milk reduces the total antioxidant capacity of black tea［J］.Nutrition Research，2010，30（1）：14-20.

［12］ 劉夫國，馬翠翠，王?迪，等.蛋白質與多酚相互作用研究進展［J］.食品與發酵工業，2016，42（2）：282-288.

［13］ Wu X L，Wang W P，Zhu T，et al.Phenylpropanoid glycoside inhibition of pepsin，trypsin and α-chymotrypsin enzyme activity in kudingcha leaves from ligustrum purpurascens［J］.Food Research International，2013，54（2）：1 376-1 382.

［14］ 李佳蓮，胡博涵，劉素純，等.微生物與茯磚茶品質形成研究進展［J］.食品工業科技，2010（9）：406-408，413.

［15］ 王?宇，胡文忠，管磬馨，等.茯磚茶主要化學成分及其功效研究進展［J］.大連民族大學學報，2020，22（1）：16-20.

［16］ 李?賀，馬?鶯.羊乳營養及其功能性特性［J］.中國乳品工業，2017，45（1）：29-33，49.

［17］ 顏?慧，張?鵬，鄒勇平，等.奶茶飲料中茶多酚含量測定的方法改進［J］.食品安全導刊，2017，11（36）：154-156.

［18］ 李?穎，李明春.真菌生物學實驗教程［M］.北京：科學出版社，2015.

［19］ GB/T 21733-2008，茶飲料［S］.

［20］ 劉?宇，熊?亮，彭?成，等.姜黃醇提物化學成分及其抗氧化活性分析［J］.食品科學，2019，40（12）：226-231.

［21］ 杜淑霞，歐仕益，貝惠玲，等.茶多酚與牛奶蛋白互作對蛋白質離體消化率的影響［J］.食品與發酵工業，2010，36（2）：76-79.

【責任編輯：陳?佳】

基金項目：陜西省科技廳重點研發計劃項目（2022NY-027）

作者簡介：呂嘉櫪（1964—），女，陜西三原人，教授，研究方向：食品微生物