基于快速檢測的煙草番茄斑萎病防控技術

閆 鼎，蔡憲杰，宋明健，李德文，倪 霞，未啟立，尚海麗，夏文凱，盤文政，肖家繁，李文陸，桂龍鳳，趙學通，張志紅

（1.上海煙草集團有限公司，上海 200082；2.云南省煙草公司昭通市公司，云南昭通 657000；3.云南省微生物發酵工程研究中心有限公司，昆明 650217；4.華環國際煙草有限公司，安徽滁州 233121）

番茄斑萎病毒（Tomato spotted wilt virus，TSWV）隸屬于布尼亞病毒目（Bunyavirales）番茄斑萎病毒科（Tospoviridae）正番茄斑萎病毒屬（Orthotopoviruses），是危害煙草的主要病毒［1，2］。自20 世紀90 年代傳入中國以來，該病毒迅速擴張，侵染超過1 090 種植物，嚴重影響中國經濟、糧食作物的生長和產量，甚至導致絕收，給農戶造成巨大的經濟損失［3，4］。煙草是云南省昭通市昭陽區重要的經濟支柱產業，番茄斑萎病連年發生，導致煙草大量減產，迫切需要建立一套病毒病早發現、早上報、早防治的綜合方法。

煙草番茄斑萎病的防控大多通過化學、物理、生物等手段控制傳毒介體薊馬的數量。云南省煙草公司昭通市公司利用薊馬對紫外光的忌避及對藍色的趨性，在煙田上鋪銀色地膜，煙田內懸掛信息素藍板，將煙株番茄斑萎病的發病率控制在5%以內［5］。穆青等［6］通過釋放捕食類螨，發現煙草番茄斑萎病防治效果可達66.97%。游堂貴等［2］通過小區試驗，施用1%香菇多糖水劑、3%超敏蛋白微粒劑、5%氨基寡糖素水劑和2%嘧肽霉素水劑4 種病毒抑制劑，發現3%超敏蛋白微粒劑對煙草番茄斑萎病的防效好，其防治效果高達59.91%。

番茄斑萎病毒病為云南省煙區煙草主要病毒病［2］。于海芹等［7］調查云南省主要煙區TSWV 陽性數情況，其中昭通市昭陽區煙草及周邊雜草的TSWV 陽性數達100%，嚴重影響了煙株的經濟價值，成為制約昭陽區煙草生產發展的瓶頸。有關控制該病毒傳播者薊馬的藥劑防治效果不太理想。膠體金免疫層析技術（Gold immuno-chromatography assay，GICA）具有操作簡便、快速、結果準確、無需特殊設備等優點［8］，在醫學、動植物檢疫、食品安全監督等領域得到廣泛應用［9-12］。本研究采用膠體金免疫層析快速檢測技術檢測煙株攜帶番茄斑萎病毒（TSWV）的情況，通過設計3 組田間小區試驗，對昭通市煙區常見的番茄斑萎病快速檢測技術進行探索性研究，在此基礎上研究低毒化學農藥施用時期、施用量和施用次數，以期建立一套病毒病綜合防治方法。

1 材料與方法

1.1 試驗時間及地點

試驗時間：2020 年3—10 月。

試驗地點：昭通市昭陽區蘇家院鄉迤那村。該地塊烤煙2016—2019 年長年連作，導致番茄斑萎病、馬鈴薯Y 病毒病等病害發生越來越嚴重。

1.2 試驗材料

供試品種：云煙121。

供試藥劑：嘧肽·嗎啉胍、氨基寡糖素、超敏蛋白、膠體金免疫層析快速檢測試紙（購自鄭州左安檢測科技有限公司）。

1.3 病毒病的快速檢測

試驗地在移栽前檢測煙苗帶毒情況，移栽后每隔7 d 利用膠體金免疫層析快速檢測試紙對煙株番茄斑萎病和馬鈴薯Y病毒病帶毒情況進行快速檢測。

1.4 病毒病田間防治小區試驗設計

根據“1.3”的檢測結果，以清水為對照，設置小區試驗研究不同藥劑及用量對病毒病的防治效果，試驗設計如表1 所示。

表1 病毒病防治試驗設計

1.5 煙株番茄斑萎病發病情況調查

用藥前調查一次病害，以后每次用藥后10 d 或15 d 分別進行調查，最后一次用藥后5 d 調查。按照《GB/T 23222—2008 煙草病蟲害分級及調查方法》［13］，以株為單位，對各處理煙株病毒病發病情況進行調查記錄，并計算病株率和病情指數。

1.6 數據統計分析

記錄各級發病株數，根據公式計算發病率、病情指數及防控效果。試驗數據采用Excel 2010 軟件進行分析，計算公式如下。

2 結果與分析

2.1 病毒病快速檢測結果

為了檢測煙苗以及移栽后每隔7 d 煙株帶毒情況，利用膠體金快速檢測試紙對煙株番茄斑萎病和馬鈴薯Y 病毒病進行快速檢測，結果如表2 所示。從表2 中可以看出，試驗地的煙苗不帶毒，在5 月18日，接近團棵期時，番茄斑萎病的檢測結果為陽性，馬鈴薯Y 病毒病的檢測結果仍為陰性。

表2 試驗地番茄斑萎病和馬鈴薯Y 病毒病快速檢測結果

2.2 病毒病田間病情和防控效果

如表2 所示，5 月18 日在試驗地檢測出煙株帶番茄斑萎病的病原菌，因此從5 月18 日開始施用藥劑對番茄斑萎病進行防治。各處理煙株番茄斑萎病株率、病情指數統計結果見表3。從表3 中可以看出，隨著時間的推移，各處理煙株番茄斑萎病的病株率和病情指數均呈上升趨勢，以清水對照的上升趨勢最明顯；藥劑處理之間，以T3 處理和T5 處理的上升趨勢較明顯，T6 處理的次之，T2 處理和T4 處理的相對平緩。

表3 煙株番茄斑萎病病株率及病情指數調查結果

不同處理對煙株番茄斑萎病的防效統計結果見表4。從表4 中可以看出，T4 處理的防效最好，T2 和T3 的次之，T6 的稍差，T5 的最差。說明氨基寡糖素連續噴霧3次對番茄斑萎病的防效最好，達60.24%。

表4 不同處理對煙株番茄斑萎病的防效統計結果

3 小結與討論

利用快速檢測試紙對煙葉進行檢測，可以提前預測煙草病毒病的發生，從而提前預防。隨著時間的推移，各處理煙株番茄斑萎病的病株率和病情指數均呈上升趨勢，以清水對照的上升趨勢最明顯，氨基寡糖素連續噴霧3 次的上升趨勢較緩。不同處理對煙株番茄斑萎病的防效統計結果表明，氨基寡糖素連續噴霧3 次對番茄斑萎病的防治效果最好，達60.24%；波爾多液連續噴霧3 次的防效次之，為51.89%；氨基寡糖素連續噴霧2 次的防效接近波爾多液的防效，為47.32%；超敏蛋白連續噴霧3 次和2次的防效均較差，分別為43.94%和31.81%。游堂貴等［2］研究表明，5%氨基寡糖素水劑1 000 倍液處理的煙草TSWV 的防治效果為38.21%±9.65%。龍光泉等［14］通過試驗證明，在煙草病毒病發病前或發病初期連續施用5%氨基寡糖素AS 3 次，每次間隔7 d，每公頃施用750 g，其防治效果達73.95%，與本研究結果接近，與游堂貴等［2］的研究結果不同，究其原因可能是所施用的氨基寡糖素濃度遠低于本研究。

綜上所述，通過在昭通市昭陽區蘇家院鄉迤那村的田間試驗初步建立了一套基于快速檢測的病毒病綜合防治技術，即利用膠體金快速檢測試紙在移栽前檢測煙苗帶毒情況，移栽后每隔7 d 對煙株主要病毒病的帶毒情況進行快速檢測，當病毒病檢測結果呈陽性時使用氨基寡糖素噴霧防治，連續用藥3次，間隔10 d，每次用量1 500 mL/hm2，對病毒病的防效在60%左右。