尿素測定試劑盒國家監督抽檢質量分析*

高 飛，黃 杰，孫 楠，蘭華林

（1.中國食品藥品檢定研究院，北京 100050；2.重慶醫療器械質量檢驗中心，重慶 400714）

尿素是人體內蛋白質的代謝分解產物［1］，是客觀反映腎小球濾過率的常規檢測指標，用于臨床評估腎功能損傷［2］。尿素測定值偏高常見于急性腎炎［3］、急性腎損傷［4-5］、慢性腎盂腎炎［6-7］等的臨床病變，偏低常見于急性肝萎縮、肝硬化和低蛋白飲食［8］等情況。目前臨床主要采用紫外- 可見分光光度法檢測人血清、血漿或尿液中尿素含量，輔助診斷疑似疾?。?］。但部分尿素測定試劑盒因生產工藝缺陷、研發體系不完善、原材料來源問題等因素導致產品性能較差。此外，國內大部分生產企業尚未形成產品質量溯源體系，僅以臨床比對結果與國外產品相符為標準，在標準品和臨床溯源方面欠深入研究，可能導致臨床檢驗結果不準確或實驗室間結果互換性較差，從而影響臨床的診斷、治療及患者的預后［10］。目前，絕大部分企業嚴格執行了《尿素測定試劑盒（酶偶聯監測法）》行業標準［11］，其中一些企業的產品性能指標高于行業標準，但也有產品質量欠佳。為強化醫療器械監管，維護市場秩序，促進體外診斷試劑行業的長足發展，確保產品安全有效和質量可控，國家藥品監督管理局組織了本次抽檢，筆者作為抽檢隊伍的一員，現將此次抽檢情況總結如下。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

7180 型全自動生化分析儀（日本Hitachi 公司）；UPS-B6K型純水儀（北京天創尚邦儀器設備有限公司）；移液器（德國Eppendorf 公司，規格為5～1 000μL）。

1.2 試劑

尿素、尿酸和總蛋白復合冰凍人血清標準品［中國食品藥品檢定研究院，批號為360012 - 201601，濃度（5.68±0.17）mmol/L］；尿素測定試劑盒［抽取來自北京、上海、天津、河北、江蘇、江西、四川、貴州、山東、安徽、湖南、浙江、吉林、遼寧、廣西、福建、河南、湖北、廣東的有效樣本43 批次，其中國產38 批次、進口5 批次，樣品均配套質控品或抽樣時企業提供的工作校準品或主校準品］。

2 方法與結果

2.1 有效樣本分布統計

檢索國家藥品監督管理局官網，通過關鍵詞查詢尿素測定試劑盒相關產品資料及數據，統計分析抽檢樣本的產品注冊證區域分布和業態分布。目前該產品國內生產企業70 家，進口生產企業5 家。43 批次有效抽樣樣本中，生產企業30 批次，使用單位12 批次，經營環節1 批次；涉及39 個注冊證。國內產品注冊證區域分布見圖1，抽檢樣本產品注冊證業態分布見圖2。

圖1 國內產品注冊證區域分布Fig.1 Regional distribution of domestic product registration certificates

圖2 抽檢樣本產品注冊證業態分布Fig.2 Distribution of business types of sample product registration certificates

2.2 法定檢驗

本次檢驗項目選擇了試劑空白吸光度、準確度和精密度3個關鍵性能指標，項目及規則信息詳見表1。綜合判定規則需依據以下幾點：1）表中任意項判定不合格，本次抽檢綜合結論即為不合格。2）樣本在正常檢驗過程中不能正常使用，本次抽檢綜合結論即為不合格。3）樣本若為封閉試劑（專機專用），由企業負責儀器安裝、調試，保證儀器正常使用并出具加蓋企業公章的證明。若正常檢驗過程中專用儀器不能正常使用，本次抽檢綜合結論即為不合格。4）適用的檢驗項目以注冊產品標準/產品技術要求中的規定為判定依據。5）所列檢驗項目中涉及推薦性要求的不包含在本檢驗方案中。

表1 檢驗項目及規則信息Tab.1 Testing items and rules information

試劑空白吸光度：該檢測項目有效樣本數為42 批次（1 批次產品技術要求未規定該性能指標）。其反應為降反應，應不小于1.0，結果均符合，其中空白吸光度不小于1.5的有36批次（85.71%），不小于2.0的有4批次（9.52%）。詳見圖3。

圖3 試劑空白吸光度檢測結果分布Fig.3 Results of the blank absorbance test

準確度：該檢測項目有效樣本數為41 批次（1 批次產品技術要求未規定該性能指標，1 批次為已檢測樣本）。本次抽樣產品準確度評價方法有以下4種。1）相對偏差，要求不大于± 15.0%，該類樣本共37 批，檢測結果符合率100%（其中相對偏差值不大于± 5.0%的產品有30 批次，占比81.08%）；2）回收率，要求應為90%～110%，該類樣本共1批次，符合率100.00%；3）相關系數r，要求應不小于0.990 0，該類樣本共1 批，符合率100.00%；4）測定值應在質控品值范圍內，該類樣本共2批次，符合率為100.00%。詳見圖4。

圖4 37批次樣本準確度檢測結果分布Fig.4 Results of the accuracy test of 37 batches of samples

精密度：該檢驗項目有效樣本數為43批次。要求精密度變異系數（CV）應不大于5.0%，符合率100.00%；其中CV不大于1.0%的樣本為31批次（72.09%）。詳見圖5。

圖5 43批次樣本精密度檢測結果分布Fig.5 Results of the precision test of 43 batches of samples

2.3 貫徹標準（簡稱貫標）結果統計

統計企業產品技術要求是否嚴格執行行業標準或高于行業標準，若某性能指標參數低于行業標準或某一項性能指標或檢驗方法出錯等，均屬于貫標不符合。結果顯示，試劑空白吸光度、準確度和精密度項目貫標符合率分別為97.67%，93.02%，100.00%。本次抽檢產品的說明書和標簽均基本符合《醫療器械說明書和標簽管理規定》的規定，貫標符合率為100.00%。

2.4 探索研究

因抽檢產品性能指標差異較大，本次探索研究依據行業標準，采用尿素、尿酸和總蛋白復合冰凍人血清國家標準品對各樣本準確度進行評價［12-13］。結果顯示，42 批次抽檢樣本中，有36 批次（85.71%）的相對偏差在± 15.0% 范圍內；有28 批次（66.67%）相對偏差在±5.0%范圍內。詳見圖6。

圖6 合格樣本探索研究結果分布Fig.6 Results of the exploration research on qualified samples

3 討論

本次國家抽檢產品尿素測定試劑盒臨床應用廣泛，抽樣難度小，樣品覆蓋率高，業態分布廣，能較好地反映現階段該產品的質量情況。法定檢驗項目為試劑空白吸光度、準確度和精密度，依據各企業產品注冊標準或產品技術要求進行判斷。在法定檢驗基礎上，進行了貫標統計分析和探索研究，對檢測結果進行統計分析，發現以下問題。

性能指標和試驗方法不統一：本產品存在行業標準及國家標準品。在技術指標和試驗方法上均能較好地對照，生產企業可根據自身產品特點制訂相應的性能指標，但不得低于國家標準和行業標準要求。同時企業應動態跟蹤行業標準和產品技術審查指導原則的制修訂情況，實時調整本企業產品注冊標準或產品技術要求。《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監督管理總局令第48 號）第三十四條規定，“對于有適用國家標準品的，應當使用國家標準品對試劑進行檢驗”。中國食品藥品檢定研究院負責組織國家標準品的制備和標定工作，根據部門規章要求，本產品具有國家標準品，生產企業應根據要求選擇國家標準品來評價產品的準確度，而不建議利用相關系數和質控品來評估。

產品貫標情況有待進一步完善：本次抽檢的有效樣品中，有1 批樣品未規定試劑空白吸光度性能指標，有1批樣品未規定準確度性能指標，此兩指標均為產品質量的關鍵性能指標。若檢驗結果不合格，將導致臨床結果偏差較大，從而誤導臨床診斷。

生產企業臨床溯源體系建設需加強：通過探索研究結果分析發現，利用國家標準品評價各生產企業的產品，其準確度達標率僅為85.71%，遠低于臨床生化產品質量的平均水平，也提示各企業產品檢測結果的互換性差。在生產企業的注冊產品標準和產品技術要求中還存在用商業校準品和商業質控品代替有證參考物質的規定。

結合本次國家抽檢情況分析，為提高我國臨床用尿素檢測試劑盒質量，更好地服務臨床檢驗［14］，建議從以下幾個方面加強監督管理：1）強化企業主體責任，須隨時動態跟蹤國家標準、行業標準和產品技術審查指導原則的更新情況，并根據變更后的標準及時修訂產品執行標準。2）企業在進行注冊檢驗或出廠檢驗時，建議采用國家標準品來評價、控制試劑質量。國家標準品溯源鏈可查，標示值的不確定度合理，大多經過參考方法或多種方法驗證或多個參考實驗室協作賦值，其溯源性好，評價產品質量科學合理，互換性較好［15］。3）加強體外診斷試劑監督檢查力度，可將國家抽檢和省級抽檢作為常規性監督管理手段，對可能出現的風險進行預判，加大抽檢產品不合格企業的處罰力度，加強臨時飛行檢查頻次，倒推企業加大研發投入，提升產品質量。