膚爾康膠囊質量標準提升研究

張恩 潘泰 周小波

基金項目：

貴州省中醫藥管理局項目［QZYY-2021-175］；紅花崗區科技局項目［遵紅科合社字（2019）22號］。

作者簡介：

張恩（1991—），男，漢族，碩士，主管中藥師，研究方向為醫院制劑研發。E-mail：781302656@qq.com

通信作者：

【摘? 要】

目的： 提高膚爾康膠囊的質量標準，保證制劑的安全性和有效性。方法： 從定性、定量兩方面進行研究，用薄層色譜法（TLC）對膚爾康膠囊中苦參、白芷、牡丹皮三味中藥進行定性鑒別；用高效液相色譜法（HPLC）測定膚爾康膠囊中綠原酸的含量。結果：苦參、白芷、牡丹皮的薄層色譜斑點清晰，分離效果較好、無陰性干擾；綠原酸的質量濃度在0～120μg/mL范圍內呈良好線性關系（r=0.9994）；精密度、穩定性、重復性試驗的RSD均≤1.2%；平均加樣回收率為98.1%，RSD=1.3%（n=6）。結論：建立的方法有較強的專屬性及穩定性，可用于膚爾康膠囊的質量控制。

【關鍵詞】

膚爾康膠囊；質量標準；薄層色譜法；高效液相色譜法

【中圖分類號】R286.0??? 【文獻標志碼】 A??? 【文章編號】1007-8517（2023）24-0046-04

DOI：10.3969/j.issn.1007-8517.2023.24.zgmzmjyyzz202324010

Study on Quality Control of Fuerkang Capsules

ZHANG En? PAN Tai? ZHOU Xiaobo

Zunyi Hospital of Traditional Chinese Medicine， Zunyi 563000，China

Abstract：

Objective Improve the quality standard of Fuerkang capsules to ensure the safety and effectiveness of the hospital pharmaceutica. Methods From the qualitative and quantitative analysis， TLC（thin layer chromatography） was used to identify Sophorae Flavescentis Radix， Angelicae Dahuricae Radix and Moutan Cortex in Fuerkang capsules; The content of Chlorogenic acid in Fuerkang capsules was determined by HPLC （high performance liquid chromatography）. Results The TLC spots of Sophora Flavescentis Radix， Angelicae Dahuricae Radix and Moutan Cortex peel were clear， with good separation effect and without negative interference; The mass concentration of Chlorogenic acid showed good linear relationship in the range of 0～120μg/mL （r=0.9994）; RSDS of precision， stability and reproducibility tests were all lower than 1.2%. The average recovery was 98.1%， RSDS=1.3%（n=6）. Conclusion The established method has well specificity and stability， and can be used for the quality control of Fuerkang Capsules.

Keywords：

Fuerkang Capsules; Quality Standard; TLC；HPLC

膚爾康膠囊（批準文號：黔藥制字Z20030347）是遵義市中醫院自行研發的醫院制劑，處方由金銀花、苦參、白芷、牡丹皮、生地黃等藥物組成，具有清熱涼血、祛風止癢的功效，主治尋常型銀屑病、慢性蕁麻疹、老年性皮膚瘙癢等［1-2］。該制劑是我院皮膚科常用專科用藥，在臨床使用中有顯著療效、無不良反應，但該制劑原質量檢測項目僅為膠囊劑的常規檢查項，缺乏系統的質量控制標準，質量安全性難以有效控制。為較好地控制該制劑質量，保證臨床用藥的安全性和有效性，課題組采用薄層色譜法及高效液相色譜法對膚爾康膠囊進行定性鑒別、含量測定研究，以期建立較完善的質量控制標準。

1? 儀器與材料

1.1? 儀器? 島津LC-20AD高效液相色譜儀，SPD-M20二極管陣列檢測器，LcsoLution色譜數據工作站；Diamonsil C18 （ 4.6 mm× 250 mm，5μm） 色譜柱；梅特勒EL104電子分析天平（分度值0.01mg）；SK1200H型超聲清洗器（上海科導超聲儀器有限公司）；HH-W600數顯三用恒溫水箱（江蘇金壇市億通電子有限公司）。

1.2? 藥品與試劑? 膚爾康膠囊（遵義市中醫院自制，樣品批號分別為210901、210902、210903）；綠原酸對照品（批號：120913-201109）、苦參對照藥材（批號：121367-200605）、白芷對照藥材（批號：121065-201406）、牡丹皮對照藥材（批號：120905-201610）均在中國食品藥品檢定研究院采購；乙腈（德國Merck公司）為色譜純；其他試劑均為色譜純；水為自制重蒸餾水。

2? 方法與結果

2.1? 薄層色譜鑒別

2.1.1? 苦參的薄層色譜鑒別［3-4］? 取膚爾康膠囊內容物3 g，加氨水1.0 mL，三氯甲烷20 mL，回流提取20 min，冷卻過濾，濾液蒸干，殘渣加三氯甲烷3 mL溶解作為供試品溶液。取缺苦參的膚爾康膠囊陰性樣品3 g，同法做成陰性對照溶液，另取苦參對照藥材0.1 g，三氯甲烷10 mL，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2020 年版四部通則0502）試驗，吸取上述3種溶液3～4 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-氨水（8∶[KG-*3/5]1∶[KG-*3/5]0.1）為展開劑，用濃氨試液飽和30 min，展開，取出晾干，噴稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾（如圖1 A所示 ）。

2.1.2? 白芷的薄層色譜鑒別［5-6］? 取膚爾康膠囊內容物2 g，加乙醚20 mL，浸泡1 h，時時振搖，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙酸乙酯2 mL溶解作為供試品溶液。另取缺白芷的膚爾康膠囊陰性樣品同法做成陰性對照溶液，取白芷對照藥材0.1 g，加乙醚10 mL，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2020 年版四部通則0502）試驗，吸取上述3種溶液各3～4 μL，點于同一以羧甲基纖維素鈉制備的硅膠GF254薄層板上，以苯-乙酸乙酯（5∶[KG-*3/5]1）為展開劑，展開，取出晾干，置紫外光燈（254 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾（如圖1 B所示）。

2.1.3? 牡丹皮的薄層色譜鑒別［7-8］? 取膚爾康膠囊內容物3 g，加10 mL乙醚，密塞，震蕩10 min，濾過，濾液揮干，殘渣加丙酮5 mL使溶解，作為供試品溶液。取缺牡丹皮的膚爾康膠囊陰性樣品同法做成陰性對照溶液，另取牡丹皮對照藥材0.5 g，加丙酮10 mL，同法制成作為對照品溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2020 年版四部通則0502）試驗，分別吸取供試品溶液，陰性對照溶液各5 μL、對照藥材溶液2 μL，點于同一硅膠G薄層板上，以環己烷-乙酸乙酯（3∶[KG-*3/5]1）為展開劑，展開，取出晾干，置紫外光燈365 nm熒光檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾（如圖1 C所示）。

2.2? 含量測定［9-10］

2.2.1? 色譜條件與系統適用性試驗? C18色譜柱；以乙腈-0.4%磷酸溶液（13∶[KG-*3/5]87）為流動相；柱溫不超過20 ℃；流速為1.0 mL/min，檢測波長為327 nm。理論板數按綠原酸峰計算應不低于8000。

2.2.2? 溶液的制備? 對照品溶液的制備：精密稱定綠原酸對照品10mg，置于10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，得1mg/mL對照品溶液。

供試品溶液制備：取本品內容物約1 g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，精密加入40%乙醇50 mL，稱定重量，搖勻，超聲處理（功率500 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，再稱定重量，用40%乙醇補足減失的重量，搖勻，經0.45μm濾膜濾過，取續濾液，即得。

陰性對照溶液的制備：按處方比例稱取缺金銀花的其他藥材，按照膚爾康膠囊的制備工藝制備缺金銀花的陰性對照品，再按供試品溶液制備方法制得陰性對照溶液。

2.2.3? 專屬性試驗? 精密吸取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照溶液各10 μL，按“2.2.1”色譜條件進樣測定。結果顯示，供試品色譜在與對照品色譜相應位置上有色譜峰，而陰性對照色譜在與對照品色譜相應位置上未出現色譜峰，結果表明該法無陰性干擾，專屬性強（如圖2 A、圖2 B、圖2 C所示）。

2.2.4? 線性關系考察? 取綠原酸對照品溶液，配置成綠原酸濃度為0μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL、120μg/mL對照品溶液，分別精密吸取上述各濃度對照品溶液10 μL，注入液相色譜儀，測定蜂面積。以綠原酸含量為橫坐標，對應峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程為Y=2547.2X+20.075，r=0.9994，說明綠原酸對照品在0～120μg/L范圍內，峰面積值與進樣量呈良好的線性關系。

2.2.5? 精密度試驗? 精密吸取對照品溶液10μL，重復進樣6次，記錄峰面積并計算RSD。結果顯示RSD為1.20%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.2.6? 穩定性試驗? 精密吸取供試品溶液10 μL，分別于0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h進樣，測定峰面積。結果顯示綠原酸RSD為0.13%（n=6），表明供試品在24 h內穩定性良好。

2.2.7? 重復性試驗? 按擬定的含量測定條件及方法，取同一批號樣品，平行稱取6份進行含量測定。 結果顯示平均含量為5.8275mg/g，RSD為0.66%（n=6），表明重復性良好。

2.2.8? 加樣回收試驗? 稱取已知含量的樣品9份，每份約0.5 g，精密稱定，精密加入一定量的綠原酸對照品，按標準正文中綠原酸含量測定方法進行測定，計算回收率，結果顯示該方法平均回收率為98.1%，RSD為1.3%，表明其回收率較好（見表1）。

2.2.9? 樣品含量測定? 分別稱取3批膚爾康膠囊樣品約1 g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，精密加40%乙醇50 mL，稱定重量，搖勻，超聲處理（功率500 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，再稱定重量，用40%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過（0.45 μm濾膜），取續濾液，測定含量（見表2）。結果顯示膚爾康膠囊3個批次樣品的綠原酸平均含量為5.72mg/g，按其平均含量的80%設限，規定本品金銀花含量以綠原酸計不得少于4.6mg/g。

3? 結果與討論

特色醫療機構制劑在醫療服務中起著十分重要的作用，其質量的好壞關系著臨床用藥的安全性及有效性，提升醫療機構制劑質量標準在促進醫院科研、教學，保障用藥安全等方面有著重要意義［11-14］。膚爾康膠囊是我院使用了二十多年的院內制劑，具有清熱涼血、祛風止癢的功效，主治尋常型銀屑病、慢性蕁麻疹、老年性皮膚瘙癢等［1-2］，顯著的臨床療效得到廣大患者的認可。為了進一步規范工藝，有效控制膚爾康膠囊的質量，發揮膚爾康膠囊在治療銀屑病、慢性蕁麻疹等頑固性皮膚病的優勢，課題組對膚爾康膠囊的質量標準進行了提升研究。

在薄層色譜研究中，課題組參考相關文獻對膚爾康膠囊中全部藥味進行薄層鑒別試驗，其中苦參、白芷、牡丹皮三味藥材斑點清晰，分離度較好，專屬性強，故選擇上述三味藥材作為膚爾康膠囊的定性鑒別指標。在金銀花、生地黃等其他藥味的鑒別過程中，存在陰性干擾、斑點不清晰等因素，難以鑒別，故未納入質量標準中。

在建立含量測定方法時選擇了君藥金銀花中的綠原酸作為含量測定指標，綠原酸具有保護心血管、抗菌、抗病毒、增強免疫力等藥理作用［15-17］，因此研究制定綠原酸含量限度對保證膚爾康膠囊的臨床療效具有重要作用。

供試品溶液制備過程中考察了提取溶劑、提取方法和提取時間，綜合考慮提取率及操作時間，選擇以40%乙醇，超聲提取30 min作為產品供試品溶液制備方法。在流動相的選擇過程中，課題組參照藥典方法在其基礎上進行優化，確定以乙腈-0.4%磷酸為流動項，所得色譜圖分離效果良好，解決了色譜峰拖尾的問題。根據考察結果顯示，綠原酸含量在0～120μg/mL的范圍內，線性回歸方程是Y=2547.2X+20.075，r=0.9994，其線性關系良好；精密度試驗結果RSD為1.20%，穩定性試驗結果RSD為0.13%，重復性試驗結果RSD為0.66%；回收率為98.1%，RSD為1.3%。

4? 結論

課題組建立的鑒別方法操作簡便，專屬性較強，得到的TLC圖譜斑點清晰，無陰性干擾；建立的含量測定方法專屬性強、穩定性、重現性較好，可用于膚爾康膠囊的質量控制。該研究為膚爾康膠囊的質量控制提供了理論基礎，有助于提高該制劑的穩定性與可控性。

參考文獻

［1］

黎明，衛術，陳隆芝.膚爾康膠囊治療慢性蕁麻疹150例報告［J］.貴陽中醫學院學報，2006（2）：20-21.

［2］黎明，姚龍華，陳隆芝，等.清熱解毒、活血解郁法為主治療尋常型銀屑病臨床療效觀察［J］.中國中醫基礎醫學雜志，2011，17（4）：441-442.

［3］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）［S］.北京：中國醫藥科技出版社，2020：211-212.

［4］張恩，楊昌貴，江維克，等.參術康胃膠囊質量標準研究［J］.中華中醫藥學刊，2017，35（2）：448-450，525.

［5］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典中藥材薄層色譜彩色圖集（一冊）［M］.北京：人民衛生出版社，2009：382.

［6］楊昌貴，張恩，周濤，等.蓮龍膠囊質量標準的研究［J］.貴陽中醫學院學報，2016，38（1）：21-25.

［7］丁志遠. 仙茜顆粒的制備工藝及質量標準研究［D］.濟南：山東中醫藥大學，2021.

［8］周海萍，季巧遇，吳樣明，等.六味地黃膏薄層色譜鑒別方法研究［J］.亞太傳統醫藥，2017，13（23）：27-29.

［9］范婉思，張貞嬋，胡建焜.高效液相色譜法測定復方金銀花顆粒中綠原酸的含量［J］.中國藥物經濟學，2017，12（2）：22-25.

［10］辛冬雪，趙宇.復方金銀花顆粒質量標準的研究［J］. 黑龍江醫藥.2018，31（5）：954-957.

［11］馮志剛，高云龍.醫院制劑質量標準的發展現狀及對策［J］.黑龍江中醫藥，2019，48（1）：140.

［12］黃久遂，張韞琪，孫昌潔，等.探討醫院制劑臨床應用現狀及發展趨勢［J］.現代醫院，2020，20（6）：860-862.

［13］唐勇琛.中醫醫院中藥制劑的發展思考［J］.海峽藥學，2019，31（11）：267-270.

［14］肖輝.中藥特色技術傳承項目在醫院中藥制劑的應用［J］.中國當代醫藥，2019，26（28）：24-27.

［15］嚴永旺，肖蘭，周旭，等.綠原酸的藥理作用及藥用研發對策［J］.中國藥房，2017，28（19）：2729-2732.

［16］禹勇軍.中藥金銀花的有效成分及藥理作用分析［J］.內蒙古中醫藥，2017，36（14）：131-150.

［17］王慶華，杜婷婷，張智慧，等.綠原酸的藥理作用及機制研究進展［J］.藥學學報，2020，55（10）：2273-2280.

（收稿日期：2023-04-03? 編輯：陶希睿）