Syndecan-4 對(duì)類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者鑒別的診斷價(jià)值

李娟 譚立明

（1 南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科 江西南昌 330006；贛南衛(wèi)生健康職業(yè)學(xué)院 江西贛州 341000；2 南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科 江西省檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 江西南昌 330006）

類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）是一種表現(xiàn)為滑膜炎、鄰近骨侵蝕和關(guān)節(jié)破壞的自身免疫疾病。 曾小峰等的調(diào)查研究顯示，我國(guó)RA 患者的病程及活動(dòng)度對(duì)患者工作效率和健康生活影響巨大[1]。尤其是早期RA的臨床病理變化，可以引起血清中實(shí)驗(yàn)性標(biāo)志物水平變化，很多研究發(fā)現(xiàn)早期檢測(cè)的標(biāo)志物可以提升早期診斷價(jià)值[2-3]。臨床上對(duì)RA 的診斷存在一定的缺陷，本研究通過(guò)文獻(xiàn)[4-6]學(xué)習(xí)發(fā)現(xiàn)，多配體蛋白聚糖-4（SDC-4）蛋白屬于硫酸乙酰肝素蛋白聚糖家族成員之一，與抗環(huán)瓜氨酸多肽抗體（anti-CCP）和類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）等指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)。其對(duì)RA 的診斷效能頗佳。本研究對(duì)2019 年9 月～2020 年12 月南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院確診的患者和健康體檢者的血清SDC-4 蛋白、anti-CCP 和RF 等指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2019 年9 月～2020 年12 月南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院確診的100 例RA 患者、93 例Non-RA患者以及53 例健康體檢者作為研究對(duì)象。其中Non-RA 患者包括23 例干燥綜合征（SS）患者、30例骨性關(guān)節(jié)炎（OA）患者和40 例強(qiáng)直性脊柱炎（AS）患者。

RA 組男性35 例，女性65 例；年齡23～82 歲，平均（52.74±15.08）歲。

Non-RA 組中干燥綜合征（SS）男性3 例，女性20 例；年齡34～81 歲，平均（58.69±15.09）歲。

骨性關(guān)節(jié)（OA）男性14 例，女性16 例；年齡34～78 歲，平均（55.15±12.32）歲。

強(qiáng)直性脊柱炎（AS）男性11 例，女性29 例；年齡28～78 歲，平均（52.88±14.05）歲。

健康對(duì)照組男性20 例，女性33 例；年齡26～82 歲，平均（52.23±15.29）歲。

3 組研究對(duì)象年齡經(jīng)方差分析檢驗(yàn)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05；性別經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05。RA 患者診斷符合2010 年歐洲風(fēng)濕病協(xié)會(huì)和美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)；OA、SS 和AS患者診斷均符合對(duì)應(yīng)指南。所有標(biāo)本均在患者知情條件下獲得，并經(jīng)南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)許可。

1.2 試劑及方法

（1）ELISA 法檢測(cè)血清SDC-4 ：分別采用上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司和上海谷研生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑，運(yùn)用寶特ELX800 酶標(biāo)儀（北京普朗新技術(shù)有限公司）進(jìn)行比色, 使用450 納米波長(zhǎng)比色讀取吸光度,計(jì)算結(jié)果。（2）血清anti-CCP：iFlash 3000-C 化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑（深圳宏利生物科技有限公司）。（3）血清RF：采用貝克曼庫(kù)爾特IMMAGE 800 自動(dòng)特定蛋白分析儀及配套試劑采用速率散射濁度法檢測(cè)[5]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

SPSS 25 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)數(shù)資料用構(gòu)成比表示，組間差異用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料所有數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性分析和Levene`s 方差檢驗(yàn)。正態(tài)數(shù)據(jù)用（）表示；偏態(tài)分布數(shù)據(jù)用中位數(shù)（四分位距）M（IQR）表示。偏態(tài)分布計(jì)量資料，組間水平差異采用克魯斯卡爾- 沃利斯H 檢驗(yàn)（Kruskal-Wallis H test），3 個(gè)樣本間差異的校正方法用Bonferroni校正，校正后P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。繪制受試者工作特征（ROC）曲線，計(jì)算曲線下面積（AUC）綜合評(píng)價(jià)其對(duì)RA 的診斷價(jià)值。

2 結(jié)果

2.1 3 組研究對(duì)象血清各標(biāo)志物含量

RA 組血清Syndecan-4 含量中位數(shù)為1128.40皮克/毫升，anti-CCP 含量中位數(shù)為332.17U/ml，RF 含量中位數(shù)為143.00IU/ml，均顯著高于Non-RA 和健康對(duì)照組。見(jiàn)表1。

表1 各組血清標(biāo)志物的表達(dá)含量

2.2 血清SDC- 4 蛋白、anti- CCP 和RF 檢測(cè)結(jié)果ROC 曲線分析

所檢測(cè)指標(biāo)SDC-4、anti-CC 和RF 對(duì)RA 診斷均達(dá)到中等以上診斷價(jià)值，對(duì)應(yīng)cutoff 值分別為568.02皮克/毫升、119.25 U/ml 和60.00 IU/ml。見(jiàn)表2。

表2 各標(biāo)志物ROC 曲線參數(shù)

2.3 3 組研究對(duì)象SDC- 4 蛋白、anti- CCP 和RF 診斷效能評(píng)價(jià)

通過(guò)分析3 組研究對(duì)象的SDC-4 蛋白、anti-CCP 和RF 的靈敏度、特異度、預(yù)測(cè)值和似然比等，發(fā)現(xiàn)SDC-4 蛋白的靈敏度最高；anti-CCP 的特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值最高。見(jiàn)表3。

表3 各診斷指標(biāo)診斷價(jià)值

3 討論

RA 的致病機(jī)制尚不明確，病理非常復(fù)雜，女性多于男性。隨著病程的進(jìn)展，其關(guān)節(jié)損傷的程度越來(lái)越嚴(yán)重，最后導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形。在這漫長(zhǎng)的過(guò)程中，患者體內(nèi)發(fā)生復(fù)雜的變化。瓜氨酸化蛋白的研究較多，有研究發(fā)現(xiàn)患者對(duì)該蛋白的免疫應(yīng)答較強(qiáng)。同時(shí)臨床上也將anti-CCP 應(yīng)用于臨床RA 的診斷，其診斷的特異性較RF 高。從微觀角度來(lái)觀察RA患者整個(gè)病程是比較長(zhǎng)的，在影像學(xué)檢查前，患者體內(nèi)就發(fā)生了一系列的血清學(xué)變化，所以在臨床上急需發(fā)現(xiàn)非創(chuàng)口性的檢測(cè)手段提高RA 的早期診斷的價(jià)值。RA 是一種高致畸性、難以治愈的疾病，因此臨床上都是以控制疾病、預(yù)防并發(fā)癥的發(fā)生為主。縱使RA 發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，但是滑膜增生、骨畸變對(duì)疾病的發(fā)展影響較大。許多研究證實(shí)SDC-4 與RA之間的關(guān)系緊密，DC-HIL/SDC-4通路通過(guò)介導(dǎo)MDSC 的T 細(xì)胞抑制功能來(lái)調(diào)節(jié)自身免疫反應(yīng)，進(jìn)一步證實(shí)SDC-4 參與自身免疫反應(yīng)。所以筆者選擇SDC-4 聯(lián)合anti-CCP、RF進(jìn)行試驗(yàn)，目的是探索SDC-4 對(duì)RA的診斷價(jià)值[7]。

本研究結(jié)果顯示，RA 組患者血清SDC-4 含量中位數(shù)為1128.40 皮克/毫升；血清anti-CCP 含量中位數(shù)為332.17U/ml；血清RF 含量中位數(shù)為143.00IU/ml 均顯著高于Non-RA 和健康對(duì)照組等水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表1 顯示SDC-4 在OA 和AS 也略有升高，這可能與SDC-4的作用機(jī)制有關(guān)。SDC-4 不但通過(guò)影響MMP 來(lái)影響關(guān)節(jié)骨和軟骨的破壞，還通過(guò)調(diào)節(jié)RPTPσ 影響骨和軟骨的平衡。而金屬酶是預(yù)測(cè)RA 患者骨質(zhì)破壞的一個(gè)重要的預(yù)測(cè)性指標(biāo)。本研究提示SDC-4還影響著關(guān)節(jié)相關(guān)的疾病，有相關(guān)的文獻(xiàn)也顯示SDC-4 在OA 動(dòng)物模型中有所升高并參與軟骨與骨損傷。該研究Anti-CCP 在RA 組水平明顯升高。RF 是由于某種原因?qū)е碌囊宰冃訧gG 為抗原的抗體，是診斷RA 患者中發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)自身抗體。但是RF 的特異性不高，敏感性也不如SDC-4 高。RF 增高不僅見(jiàn)于RA，還可見(jiàn)于SS、SLE 等其他自身免疫性疾病。本研究顯示，SS 組RF 的含量雖沒(méi)有RA組的高，但是較OA 組、AS 組、健康對(duì)照組的平均值高[7]。

根據(jù)ROC 曲線統(tǒng)計(jì)分析得出AUC，所檢測(cè)指標(biāo)SDC-4、anti-CCP 和RF 對(duì)RA 診斷均達(dá)到中等以上診斷價(jià)值。通過(guò)分析3 組研究對(duì)象的血清SDC-4 蛋白、anti-CCP 和RF 的靈敏度、特異度、預(yù)測(cè)值和似然比等，發(fā)現(xiàn)靈敏度最高的是SDC-4蛋白為86.5%；特異度最高的是anti-CCP 為95.0%；陽(yáng)性預(yù)測(cè)值最高的是anti-CCP 為0.91[8]。

綜上，本研究表面血清SDC-4 蛋白可作為RA 新的輔助診斷指標(biāo)。本研究的缺陷是沒(méi)有納入研究骨代謝相關(guān)指標(biāo)及SDC-4 在RA 疾病活動(dòng)度的關(guān)系。今后可以進(jìn)一步研究SDC-4 與RA 骨平衡及其他骨關(guān)節(jié)炎相關(guān)的疾病。