血清學指標及IgG抗A/B抗體效價與新生兒溶血病嚴重程度的關系分析

王文萍　張呈球　程艷梅

【摘要】 目的：分析血清學指標及IgG型抗A/B抗體效價與新生兒溶血病（HDN）嚴重程度的關系。方法：選取2020年1月—2022年12月上饒市人民醫院收治的82例HDN患兒為研究對象，分析游離試驗與放散試驗結果，并進行不規則抗體篩查、測定血型抗體效價及檢測血清學指標[血清總膽紅素（STB）、非結合膽紅素（UCB）、紅細胞（RBC）計數、血紅蛋白（Hb）、白蛋白（ALB）]；比較不同IgG抗A/B抗體效價之間的STB、UCB、RBC、Hb、ALB水平及臨床指標；采用Pearson相關性分析RBC、Hb、ALB與STB、UCB的關系；采用Spearman相關性分析IgG抗A/B抗體效價與STB、UCB的關系。結果：游離試驗檢測HDN的陽性率為71.95%、放散試驗檢測HDN的陽性率為85.37%，兩種方式比較差異有統計學意義（P<0.05）。IgG抗A/B血型放散試驗抗體效價為1︰1～1︰32，最高為1︰32；游離試驗的抗體效價為1︰1～1︰2，最高為1︰2。不同IgG抗A/B抗體效價的STB、UCB、RBC、Hb、ALB水平及新生兒日齡、住院時間比較，差異均有統計學意義（P<0.05）。Pearson相關性分析結果顯示，血清RBC、Hb、ALB與STB、UCB呈負相關。Spearman相關性分析結果顯示，IgG抗A/B抗體效價與STB、UCB呈正相關（P<0.05）。結論：IgG抗A/B抗體效價能夠測定HDN患兒體內抗A/B抗體水平，血清RBC、Hb、ALB及IgG抗A/B抗體效價能夠輔助判斷HDN的嚴重程度。

【關鍵詞】 新生兒溶血病 血清學指標 抗體效價 IgG型

Analysis of the Relationship between Serological Indexes， IgG Anti-A/B Antibody Titer and the Severity of Neonatal Hemolytic Disease/WANG Wenping， ZHANG Chengqiu， CHENG Yanmei. //Medical Innovation of China， 2023， 20（36）： -134

[Abstract] Objective： To analyze the relationship between serological indexes， IgG anti-A/B antibody titer and the severity of hemolytic disease of newborn （HDN）. Method： A total of eighty-two children with HDN admitted to Shangrao People's Hospital from January 2020 to December 2022 were selected as the study objects， and the results of ionization test and release test were analyzed. Irregular antibody screening， blood group antibody titers and serological indicators [serum total bilirubin （STB）， unconjugated bilirubin （UCB）， red blood cell （RBC） count， hemoglobin （Hb）， albumin （ALB）] were detected. The STB， UCB， RBC， Hb， ALB levels and clinical indexes of different IgG anti-A/B antibody titers were compared; Pearson correlation was used to analyze the relationship between RBC， Hb， ALB and STB and UCB. Spearman correlation was used to analyze the relationship between IgG anti-A/B titer and STB and UCB. Result： The positive rate of HDN detected by ionization test was 71.95%， and that by release test was 85.37%， there was statistical significance between the two methods （P<0.05）. The titers of IgG anti-A/B blood group release test ranged from 1︰1 to 1︰32， with the highest being 1︰32. The titer of antibody in ionization test was 1︰1 to 1︰2， the highest was 1︰2. The levels of STB， UCB， RBC， Hb， ALB， neonatal age and hospital stay of different IgG anti-A/B antibody titers were statistically significant （P<0.05）. Pearson correlation analysis showed that serum RBC， Hb and ALB were negatively correlated with STB and UCB. Spearman correlation analysis showed that the titer of IgG anti-A/B antibody was positively correlated with STB and UCB （P<0.05）. Conclusion： IgG anti-A/B antibody titer can determine the level of anti-A/B antibody in children with HDN， and serum RBC， Hb， ALB and IgG anti-A/B antibody titer can assist in judging the severity of HDN.

[Key words] Hemolytic disease of newborn Serological indicators Antibody titer IgG type

First-author's address： Shangrao People's Hospital， Jiangxi Province， Shangrao 334000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2023.36.030

新生兒溶血病（hemolytic disease of newborn，HDN）是由于孕母與新生兒體內的紅細胞血型不吻合，導致新生兒出現免疫性溶血性疾病[1-2]。HDN的發病機制是胎兒代表父母雙方的紅細胞抗原表型不一致，當胎兒代表父體紅細胞抗原的紅細胞進入母體時，母體的免疫系統會產生破壞新生兒紅細胞的IgG型抗體，并且通過胎盤屏障進入胎兒的血液循環，破壞胎兒體內的紅細胞[3]。目前臨床上對HDN的診斷主要依據游離試驗及放散試驗的結果進行判定，當出現多個試驗陽性結果時，以放散試驗的結果為HDN的診斷標準[4]。HDN具有發病急，癥狀重及病情進展迅速等特點，患兒多伴隨有不同程度的黃疸、溶血性貧血、呼吸窘迫等癥狀，嚴重的情況下甚至會引起患兒死亡[5]。有研究表明，母體的抗A/B抗體通過結合患兒紅細胞表面相應抗原引起溶血，孕母體內的IgG型抗A/B抗體效價對新生兒HDN具有較好的預測作用，新生兒HDN嚴重程度與孕母體內抗體效價水平相關[6]。目前對HDN患兒體內IgG型血型抗體效價與病情嚴重程度的關系尚不明確，相關研究報道較少。本研究通過分析血清學指標及IgG型抗A/B抗體效價與HDN嚴重程度的關系，為臨床診治提供參考意見。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年1月—2022年12月上饒市人民醫院收治的82例HDN患兒為研究對象。納入標準：（1）均符合HDN的相關診斷標準[7]；（2）在出生后存在黃疸、血紅蛋白降低、呼吸窘迫、高膽紅素血癥等相關癥狀；（3）均為單胎，且足月分娩；（4）均為ABO血型。排除標準：（1）合并存在其他先天性發育畸形疾病；（2）合并存在先天性心血管病變；（3）合并存在新生兒感染性疾病；（4）合并存在凝血功能障礙；（5）其他血型系統或其他原因引起的HDN。研究對象中男43例，女39例；新生兒日齡1～7 d，平均（3.47±0.89）d；體重2.6～3.9 kg，平均（3.16±0.58）kg；血型分型為A型41例、B型38例、AB型3例。本研究已獲得本院醫學倫理委員批準同意，患兒的監護人均簽署相關的知情同意書。

1.2 檢測方法

1.2.1 儀器與試劑 ABO血型檢測卡，抗人球蛋白檢測卡及離心機和微柱孵育器；抗A、B血清試劑，標準ABO紅細胞及ABO正反定型試劑卡；微柱凝膠檢測卡；血細胞計數儀；西門子全自動生化分析儀。

1.2.2 檢測內容 （1）血型鑒定與抗體篩查：采集HDN患兒入院時的靜脈血3 mL，在離心機以3 000 r/min離心5 min（離心半徑6 cm），分離紅細胞與血漿，采用微柱凝膠檢測卡檢測ABO血型與不規則抗體。（2）游離試驗及放散試驗檢測：選取HDN患兒的紅細胞，以生理鹽水進行3次洗滌后，分別進行游離試驗及放散試驗檢測。（3）IgG型抗A/B抗體效價：采用等比例梯度濃度稀釋法對放散試驗與游離試驗的陽性樣本檢測液進行稀釋，并置于微柱凝膠檢測卡進行抗體效價測定。（4）血細胞計數：采集HDN患兒靜脈血2 mL，檢測血液標本的紅細胞（red blood cell，RBC）計數、血紅蛋白（hemoglobin，Hb）、白蛋白（albumin，ALB）水平。（5）生化檢測：采集HDN患兒靜脈血2 mL，

在離心機以3 000 r/min離心5 min（離心半徑10 cm），

檢測血液標本中的血清總膽紅素（serum total bilirubin，STB）、非結合膽紅素（unconjugated bilirubin，UCB）水平。

1.3 觀察指標

（1）分析HDN患兒游離試驗及放散試驗檢測結果；（2）分析HDN患兒IgG型抗A/B抗體效價的分布情況；（3）收集所有患兒的日齡、性別、血型、體重、血液指標等一般資料，并比較不同IgG抗A/B抗體效價之間的STB、UCB、RBC、Hb、ALB水平；（4）采用Pearson相關性分析RBC、Hb、ALB與STB、UCB的關系；采用Spearman相關性分析IgG抗A/B抗體效價與STB、UCB的關系。

1.4 統計學處理

采用SPSS 21.0統計學軟件分析所有數據。符合正態分布的計量資料以（x±s）表示，進行獨立樣本t檢驗，多樣本或多組間比較采用F檢驗；計數資料以率（%）表示，進行字2檢驗；采用Pearson相關性分析及Spearman相關性分析兩變量之間的相關性。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HDN患兒游離試驗及放散試驗結果分析

在82例HDN患兒中，游離試驗檢測HDN的陽性率為71.95%、放散試驗檢測HDN的陽性率為85.37%，兩種方式比較，差異有統計學意義（字2=4.395，P=0.036），見表1。

2.2 HDN患兒IgG抗A/B抗體效價的分布情況分析

分析放散試驗與游離試驗陽性樣本的IgG抗A/B抗體效價，其中放散試驗的抗體效價為1︰1～1︰32，最高為1︰32；游離試驗的抗體效價為1︰1～1︰2，最高為1︰2，見表2。

2.3 不同IgG抗A/B抗體效價之間的一般資料比較

不同IgG抗A/B抗體效價的STB、UCB、RBC、Hb、ALB水平及新生兒日齡、住院時間比較，差異均有統計學意義（P<0.05），見表3。

2.4 RBC、Hb、ALB與STB、UCB的相關性

Pearson相關性分析結果顯示，血清RBC、Hb、ALB與STB、UCB均呈負相關（P<0.001），見表4。

2.5 IgG抗A/B抗體效價與STB、UCB的相關性

Spearman相關性分析結果顯示，IgG抗A/B抗體效價與STB、UCB均呈正相關（rs=0.586，P<0.001；rs=0.574，P<0.001）。

3 討論

HDN是一種新生兒血型與母體不符合引起新生兒紅細胞破壞的疾病，以ABO血型最為常見，ABO-HDN占比達到80%～95%，其主要發生在O型孕產婦與A型、B型新生兒之間，也可能發生在A型、B型孕產婦生育的非O型新生兒身上[8-9]。O型孕產婦產生的IgG型抗體通過結合胎兒胎盤上的Fc受體進入胎兒的血液循環，IgG型抗體與胎兒紅細胞抗原結合使紅細胞損害，進而導致出現溶血，而且IgG型抗體的效價和亞型均會影響HDN的發生發展[10]。李丹等[11]研究指出，由于ABO-HDN是母嬰血型不合導致母體的IgG型抗A/B抗體進入胎兒血液循環損害胎兒紅細胞，對孕產婦進行血清IgG型抗A/B抗體效價測定與凝集強度檢測是預防新生兒發生HDN的重要措施，母體IgG型抗A/B抗體效價水平與HDN患兒的溶血癥狀及病死率呈正相關。因此，分析HDN患兒體內的IgG型抗體效價水平對臨床診治可能具有積極意義。

游離試驗及放散試驗是診斷新生兒HDN的主要方式，本研究分析了游離試驗及放散試驗對HDN診斷的敏感度，放散試驗檢測的敏感度優于游離試驗。這是因為新生兒體內的游離抗體與致敏紅細胞會隨著出生時間的延長而逐漸消失及被破壞，導致游離試驗診斷的敏感度下降[12]。母體內的IgG型抗體效價與抗體數量會隨著孕期的增加而增加，抗體數量超過母體自身抵抗范圍時，容易引發新生兒發生HDN，而且IgG型抗體會通過胎盤進入胎兒的血液循環，對新生兒體內的IgG型抗體效價水平產生重要影響[13-14]。宋建等[15]研究指出，IgG型抗體在進入HDN患兒體內后會立即與紅細胞進行結合，使大部分IgG型抗體以結合的形式在HDN患兒體內存在，導致放散試驗的抗體效價高于游離試驗。本研究對HDN患兒IgG型抗A/B抗體效價檢測結果顯示，放散試驗的抗體效價為1︰1～1︰32，最高為1︰32；游離試驗的抗體效價為1︰1～1︰2，最高為1︰2，與上述研究一致。

IgG是血清主要的抗體成分，以單體形式存在，屬于人體免疫球蛋白之一，其合成與分泌主要通過脾、淋巴結中的漿細胞進行，在HDN的發病過程中發揮了關鍵作用，HDN的發生發展及嚴重程度與IgG血型抗體效價的高低相關[16-17]。RBC、Hb、ALB、STB及UCB等血清學指標同樣與HDN的疾病進程密切相關，而且STB與UCB水平能夠用于評估HDN患兒的病情，其水平與病情嚴重程度成正比[18]。劉寅寅等[19]研究指出，新生兒發生HDN會導致體內的紅細胞被大量破壞，造成紅細胞數量急劇減少，導致體內的RBC、Hb水平降低。薛松等[20]研究表明，HDN患兒體內大量紅細胞破壞會導致Hb含量下降，血清STB水平與體內衰老紅細胞裂解相關，衰老紅細胞裂解后能夠促進大量的Hb釋放，引起HDN患兒體內STB水平升高，并且STB包括直接膽紅素與UCB，同樣會影響HDN患兒體內的UCB水平。段靈等[21]研究認為，ALB不僅能夠提高膽紅素的水溶性以及增加血漿對膽紅素的處理能力，而且可以減少膽紅素對組織細胞毒性的影響，血清ALB水平降低容易導致機體對膽紅素代謝能力下降，進而導致膽紅素水平升高。本研究結果顯示，HDN患兒的血清STB、UCB水平隨著IgG抗A/B抗體效價升高而上升，RBC、Hb、ALB水平隨著IgG抗A/B抗體效價升高而下降。這可能是因為IgG抗A/B抗體效價越高，攜帶的抗體數量會越多，進而增加HDN患兒體內的紅細胞破壞情況，導致血清RBC、Hb、ALB水平下降及STB、UCB水平增加。本研究進一步分析了RBC、Hb、ALB及IgG抗A/B抗體效價與STB、UCB的關聯性，Pearson相關性分析結果顯示，血清RBC、Hb、ALB與STB、UCB呈負相關，Spearman相關性分析結果顯示，IgG抗A/B抗體效價與STB、UCB呈正相關。提示對RBC、Hb、ALB水平及IgG抗A/B抗體效價與HDN患兒病情的嚴重程度相關，在HDN的相關診治過程中需要密切監測RBC、Hb、ALB及IgG抗A/B抗體效價水平。

綜上所述，IgG抗A/B抗體效價能夠測定HDN患兒體內抗A/B抗體水平，血清RBC、Hb、ALB及IgG抗A/B抗體效價能夠輔助判斷HDN的嚴重程度。本研究僅分析了ABO血型HDN患兒的IgG抗A/B抗體效價，未對Rh等其他血型HDN患兒的IgG抗A/B抗體效價進行分析，未來仍需進一步研究。

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（收稿日期：2023-09-14） （本文編輯：白雅茹）