馬圓線蟲(chóng)病診斷與防治的研究進(jìn)展

李 燁

（ 黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)分院，黑龍江 齊齊哈爾 161000 ）

馬屬動(dòng)物的消化道線蟲(chóng)種類繁多，多達(dá)83種。馬屬動(dòng)物主要的消化道線蟲(chóng)為馬圓線蟲(chóng)，共64種，分別隸屬于圓線科（Strongylidae）的盅口亞科（Cyathostominae）和圓線亞科（Strongylinae）的29 個(gè)屬[1]。馬圓線蟲(chóng)呈世界范圍內(nèi)分布，早在十八世紀(jì)被首次發(fā)現(xiàn)，但是由于其種類繁多，分類方式一直存在爭(zhēng)議。2008 年，Lichtenfels 等[2]針對(duì)存在爭(zhēng)議的馬圓線蟲(chóng)分類進(jìn)行討論，總結(jié)歸納并提出了較全面的分類系統(tǒng)，結(jié)束了馬圓線蟲(chóng)分類混亂，此分類系統(tǒng)一直沿用至今。普通圓形線蟲(chóng)、無(wú)齒圓形線蟲(chóng)、馬圓形線蟲(chóng)是臨床最常見(jiàn)的大型圓線蟲(chóng)，成蟲(chóng)寄生于大腸，宿主通常表現(xiàn)為消瘦貧血、腹痛腹瀉，圓線蟲(chóng)寄生數(shù)量較大可導(dǎo)致宿主出現(xiàn)水腫、排出帶有蟲(chóng)體且氣味惡臭的糞便等情況，病情嚴(yán)重時(shí)可使宿主死亡。此外，馬圓線蟲(chóng)幼蟲(chóng)移行還會(huì)導(dǎo)致血栓性疝痛，病畜煩躁打滾、腹圍增大、排出血便。常見(jiàn)的小型圓線蟲(chóng)包括了三齒屬線蟲(chóng)、噴口屬線蟲(chóng)和食道齒屬線蟲(chóng)，此類圓線蟲(chóng)致病性較低，主要損害宿主腸黏膜，導(dǎo)致病畜消瘦、腹瀉，有時(shí)伴有腸絞痛、發(fā)熱，病情嚴(yán)重也可導(dǎo)致死亡[3-4]。馬圓線蟲(chóng)大量寄生可對(duì)病畜生命造成威脅，對(duì)我國(guó)畜牧業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。因此，準(zhǔn)確診斷馬圓線蟲(chóng)病對(duì)于此病的治療和防控十分重要。本文綜述了馬圓線蟲(chóng)的國(guó)內(nèi)外流行情況及近年來(lái)診斷、防治的研究進(jìn)展，以期為相關(guān)疾病的臨床防治提供參考。

1 馬圓線蟲(chóng)病國(guó)內(nèi)外流行情況

馬圓線蟲(chóng)在我國(guó)各地均有流行，多發(fā)生于新疆地區(qū)，其他地區(qū)有少數(shù)報(bào)道。張鵬舉等[5]對(duì)吉林省2個(gè)馬場(chǎng)的寄生蟲(chóng)感染情況進(jìn)行了調(diào)查，結(jié)果顯示馬圓線蟲(chóng)在各個(gè)年齡段均有分布，尤其是3歲以內(nèi)的幼齡馬感染率最高，可高達(dá)98.6%，且感染率和年齡呈反比。梁素聯(lián)等[6]對(duì)廣西壯族自治區(qū)田東縣的散養(yǎng)馬匹進(jìn)行了剖檢，發(fā)現(xiàn)了大量的馬圓線蟲(chóng)，確診馬匹死亡原因?yàn)閳A線蟲(chóng)感染。吳樹(shù)清[7]對(duì)內(nèi)蒙古地區(qū)馬術(shù)隊(duì)馬匹的寄生蟲(chóng)感染情況進(jìn)行了調(diào)查，其中馬圓線蟲(chóng)的感染率為86.18%。賽迪拉木等[8]對(duì)新疆地區(qū)的65匹普氏野馬進(jìn)行了消化道寄生蟲(chóng)的檢查，發(fā)現(xiàn)馬圓線蟲(chóng)的總感染率為34%，幼齡馬匹感染率為38%，成年馬匹感染率為32%，發(fā)現(xiàn)成年馬匹比幼齡馬匹感染率低，可能與幼齡馬匹的免疫功能較弱有關(guān)系。沈青義等[9]對(duì)新疆某馬場(chǎng)的馬體內(nèi)寄生蟲(chóng)感染情況進(jìn)行了調(diào)查，結(jié)果表明馬圓線蟲(chóng)的感染率為80%，雖感染率較高，但感染強(qiáng)度并不強(qiáng)。陳暉等[10]對(duì)新疆地區(qū)伊犁馬的寄生蟲(chóng)感染情況進(jìn)行調(diào)查，1 周齡馬匹的圓線蟲(chóng)感染率為98.11%，2 周齡馬匹感染率為90.52%，3 周齡馬匹感染率為88.18%，其感染率和年齡的關(guān)系亦成反比。

馬圓線蟲(chóng)病在世界范圍內(nèi)也均有流行。Sazmand等[1]對(duì)伊朗地區(qū)馬圓線蟲(chóng)病情況進(jìn)行了概括，馬、驢、騾的圓線蟲(chóng)病感染率分別為4.4%～69.2%、65.4%～96.4%、80.0%。Alemayehu等[11]對(duì)埃塞俄比亞地區(qū)的384匹馬的圓線蟲(chóng)病進(jìn)行了調(diào)查，圓線蟲(chóng)病的總感染率為67.19%。Matthee等[12]對(duì)南非地區(qū)驢的寄生蟲(chóng)感染情況進(jìn)行了調(diào)查，發(fā)現(xiàn)普通圓形線蟲(chóng)、無(wú)齒圓形線蟲(chóng)和馬圓形線蟲(chóng)，其中普通圓形線蟲(chóng)的數(shù)量最多。Studzińska等[13]對(duì)波蘭地區(qū)某屠宰場(chǎng)的725 匹馬的圓線蟲(chóng)感染情況進(jìn)行了調(diào)查，其中普通圓形線蟲(chóng)感染率為22.8%，無(wú)齒圓形線蟲(chóng)感染率為18.3%，馬圓形線蟲(chóng)感染率為1.7%。

2 馬圓線蟲(chóng)病的診斷

目前臨床診斷和感染情況調(diào)查多采用飽和鹽水漂浮法對(duì)病畜糞便進(jìn)行檢查，顯微鏡下圓線蟲(chóng)卵呈淺灰褐色的橢圓形，卵殼比較薄，表面光滑，其內(nèi)包含數(shù)量不等的卵細(xì)胞；糞檢發(fā)現(xiàn)圓線蟲(chóng)的蟲(chóng)卵即可確認(rèn)病畜患有圓線蟲(chóng)病。賽迪拉木·托合提[14]采用飽和鹽水法和蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)法對(duì)新疆65 匹普氏野馬的糞樣進(jìn)行了鏡檢，馬圓線蟲(chóng)感染率可達(dá)86.6%。蘇娃等[15]采用飽和鹽水漂浮法和蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)法對(duì)伊犁馬的消化道線蟲(chóng)進(jìn)行了調(diào)查，馬圓線蟲(chóng)感染率為80%。Harvey 等[16]采用飽和鹽水漂浮法和蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)法對(duì)澳大利亞的6個(gè)野馬種群的糞樣進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示圓線蟲(chóng)感染率為96.7%。

此外，病畜死亡后也可以采取剖檢法進(jìn)行檢測(cè)，在病畜的腸腔中有大量蟲(chóng)體或者腸道壁上有大量幼蟲(chóng)結(jié)節(jié)可確診為圓線蟲(chóng)感染。張偉等[17]對(duì)山東聊城市某屠宰場(chǎng)80 頭驢的腸道進(jìn)行剖檢，發(fā)現(xiàn)馬圓線蟲(chóng)的感染率為21.3%。張偉信等[18]采用系統(tǒng)剖檢法對(duì)新疆塔里木盆地驢進(jìn)行檢查，發(fā)現(xiàn)9種圓線亞科蟲(chóng)體，數(shù)量最多的是普通圓形線蟲(chóng)，感染率為86.5%。Gonzales-Viera 等[19]對(duì)7月齡自然死亡的小母馬進(jìn)行了剖檢，腹腔大面積出血，腸道漿膜表面可見(jiàn)大量線蟲(chóng)幼蟲(chóng)，經(jīng)鑒定為無(wú)齒圓形線蟲(chóng)感染造成的死亡。目前常用的圓線蟲(chóng)鑒定方法為形態(tài)學(xué)鑒定，馬圓線蟲(chóng)長(zhǎng)度約1～8 mm，蟲(chóng)體呈較對(duì)稱的紡錘形，其口囊、食道、交合傘等特征均可作為鑒定圓線蟲(chóng)的依據(jù)。高遠(yuǎn)[3]對(duì)5種盅口亞科的圓線蟲(chóng)進(jìn)行了形態(tài)學(xué)鑒定，對(duì)蟲(chóng)體的長(zhǎng)度、口囊形態(tài)、內(nèi)葉冠和外葉冠的數(shù)量、雄蟲(chóng)尾部交合傘等特征進(jìn)行了描述，為鑒定不同種圓線蟲(chóng)提供了參考資料。

然而，傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)方法存在一定弊端，對(duì)鑒定者的專業(yè)知識(shí)要求較高，且鑒定形態(tài)相似的蟲(chóng)種容易造成誤判。而分子生物學(xué)鑒定可解決其弊端，具有耗時(shí)短、準(zhǔn)確率高等優(yōu)勢(shì)，廣泛地應(yīng)用于寄生蟲(chóng)的蟲(chóng)種鑒定。常見(jiàn)的分子生物學(xué)方法鑒定寄生蟲(chóng)有很多，如:PCR技術(shù)、多重PCR技術(shù)、熒光定量PCR 技術(shù)、同工酶技術(shù)、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RAPD）等。張淑熠[20]通過(guò)PCR 方法對(duì)35 種圓線蟲(chóng)的Cox1和Nad1序列進(jìn)行擴(kuò)增，鑒定蟲(chóng)種并探究其系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。El-Gameel等[21]使用掃描電鏡觀察了普通圓形線蟲(chóng)，并對(duì)其ITS2 序列進(jìn)行擴(kuò)增和鑒定蟲(chóng)種。Jürgenschellert等[22]對(duì)484匹馬糞便樣本進(jìn)行ELISA檢查，樣本陽(yáng)性率為66.7%，從陽(yáng)性馬匹獲得成蟲(chóng)后進(jìn)行PCR，發(fā)現(xiàn)有普通圓形線蟲(chóng)、無(wú)齒圓形線蟲(chóng)、馬圓形線蟲(chóng)和Strongylus asini。Halvarsson 等[23]對(duì)普通圓形線蟲(chóng)和無(wú)齒圓線蟲(chóng)進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定，后采用PCR 方法對(duì)其ITS2 序列進(jìn)行擴(kuò)增，進(jìn)行了一代測(cè)序和高通量測(cè)序，發(fā)現(xiàn)使用高通量測(cè)序可以更好地分析ITS2 的變化。在分子生物學(xué)鑒定方法中，PCR檢測(cè)方法具有高特異性、高敏感性，可準(zhǔn)確地鑒定蟲(chóng)種甚至隱蔽種、亞種等，是使用最廣泛的一種鑒定方法。ELISA 檢測(cè)法操作相對(duì)比較簡(jiǎn)單，但是費(fèi)用較高，易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，不適合生產(chǎn)中使用。

3 馬圓線蟲(chóng)病的防治

馬匹要定期進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng)，一般6～8周進(jìn)行一次治療為宜。有文獻(xiàn)表示可以通過(guò)使用驅(qū)蟲(chóng)藥驅(qū)除蟲(chóng)卵和L3期幼蟲(chóng)[24]。治療馬圓線蟲(chóng)的藥物包括四氫嘧啶噻啶類、苯并咪唑類、大環(huán)內(nèi)酯類。雙羥萘酸噻嘧啶片為四氫嘧啶噻啶類抗線蟲(chóng)藥，其作用機(jī)制是對(duì)敏感蟲(chóng)體產(chǎn)生的神經(jīng)肌肉阻斷作用，使蟲(chóng)體麻痹。此藥物對(duì)馬圓形線蟲(chóng)、普通圓形線蟲(chóng)等具有高效作用，對(duì)無(wú)齒圓形線蟲(chóng)、小型圓形線蟲(chóng)等效果較差。阿苯達(dá)唑片為苯并咪唑類抗線蟲(chóng)藥，具有廣譜驅(qū)蟲(chóng)作用，線蟲(chóng)對(duì)其敏感，作用機(jī)制是與線蟲(chóng)的微管蛋白結(jié)合發(fā)揮作用。本品不但對(duì)成蟲(chóng)作用強(qiáng)，對(duì)未成熟蟲(chóng)體和幼蟲(chóng)也有較強(qiáng)作用，還具有殺蟲(chóng)卵作用。奧芬達(dá)唑片為苯并咪唑類抗線蟲(chóng)藥，作用機(jī)制與阿苯達(dá)唑相似，抗蟲(chóng)譜不如阿苯達(dá)唑廣，但是作用效果略強(qiáng)。伊維菌素為大環(huán)內(nèi)酯類藥物，主要對(duì)體內(nèi)線蟲(chóng)和體表節(jié)肢動(dòng)物具有作用，作用機(jī)制是干擾神經(jīng)肌肉間的信號(hào)傳遞，使蟲(chóng)體松弛麻痹，導(dǎo)致蟲(chóng)體死亡或被排出體外。

使用藥物需根據(jù)馬圓線蟲(chóng)的流行病學(xué)以及當(dāng)?shù)匕l(fā)病情況、耐藥性進(jìn)行選擇。四氫嘧啶噻啶類對(duì)包囊中幼蟲(chóng)作用不大，對(duì)成蟲(chóng)的效果較好，苯并咪唑類對(duì)成蟲(chóng)或者幼蟲(chóng)階段均有作用。有研究表明，伊維菌素不能驅(qū)除L3 期和L4期幼蟲(chóng)，但對(duì)圓線蟲(chóng)成蟲(chóng)的驅(qū)蟲(chóng)效果較好[25]。盅口線蟲(chóng)對(duì)四氫嘧啶噻啶類和苯并咪唑類藥物會(huì)呈現(xiàn)不同程度的抗藥性，可采用大環(huán)內(nèi)酯類藥物進(jìn)行治療，此類藥物對(duì)盅口線蟲(chóng)的二次感染依然有效。Tavassoli 等[26]研究了分布于伊朗的兩種本地植物阿魏和大蒜提取物對(duì)圓線蟲(chóng)幼蟲(chóng)的體外抗寄生蟲(chóng)作用，結(jié)果表明兩種植物提取物均對(duì)其具有殺蟲(chóng)作用。Apolinário 等[27]研究了芬苯達(dá)唑、伊維菌素和阿維菌素三種藥物對(duì)巴西東南部24個(gè)馬場(chǎng)的驅(qū)蟲(chóng)效果，結(jié)果顯示伊維菌素和阿維菌素對(duì)17個(gè)馬場(chǎng)有效，芬苯達(dá)唑?qū)?1個(gè)馬場(chǎng)有效果。Vera等[28]評(píng)價(jià)了芬苯達(dá)唑、伊維菌素和莫西菌素對(duì)巴西馬群的療效，結(jié)果顯示馬群對(duì)芬苯達(dá)唑有耐藥性，伊維菌素和莫西菌素具有較好的療效。Butler等[29]研究了雙羥萘酸噻嘧啶和伊維菌素對(duì)加拿大的馬場(chǎng)圓線蟲(chóng)的治療效果，通過(guò)糞卵計(jì)數(shù)法分析顯示治療后蟲(chóng)卵數(shù)可降低10%。D?r?bu?等[30]研究了羅馬尼亞馬場(chǎng)的18匹馬對(duì)苯并咪唑的耐藥性，結(jié)果顯示有一匹馬對(duì)苯并咪唑具有耐藥性。此外，制定科學(xué)的管理制度，加強(qiáng)養(yǎng)飼養(yǎng)管理，注意養(yǎng)殖場(chǎng)衛(wèi)生，按時(shí)清掃糞便、定期消毒、科學(xué)放牧等也有助于預(yù)防馬圓線蟲(chóng)感染。

4 結(jié)論

馬圓線蟲(chóng)病是一種常見(jiàn)的馬屬動(dòng)物寄生蟲(chóng)病。馬圓線蟲(chóng)種類繁多，數(shù)量龐大，感染強(qiáng)度最高可達(dá)上萬(wàn)條，大量寄生可導(dǎo)致腸絞痛和腸梗阻，嚴(yán)重危害了馬屬動(dòng)物的健康，對(duì)畜牧業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。由于不同種類的圓線蟲(chóng)抗藥性不一樣，所以不可濫用驅(qū)蟲(chóng)藥物進(jìn)行預(yù)防和治療，需要根據(jù)當(dāng)?shù)伛R圓線蟲(chóng)的流行病學(xué)情況，制定科學(xué)合理的綜合防控方案。