雞球蟲病診斷技術與防治方法的研究進展

李 燁

（ 黑龍江省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)分院，黑龍江 齊齊哈爾 161000 ）

雞球蟲病是一種由艾美耳屬球蟲引起的常見腸道寄生蟲病，呈世界范圍內流行，我國已將其劃分為三類動物疫病[1]?？筛腥倦u的球蟲有7 種，包括柔嫩艾美耳球蟲（Eimeria tenella）、堆型艾美耳球蟲（Eimeria acervulina）、毒害艾美耳球蟲（Eimeria necatrix）、巨型艾美耳球蟲（Eimeria maxima）、和緩艾美耳球蟲（Eimeria mitis）、布氏艾美耳球蟲（Eimeria brunetti）以及早熟艾美耳球蟲（Eimeria praecox）[2]。

不同種類雞球蟲的致病性、臨床癥狀、病理變化均不同，其中致病性最強的是柔嫩艾美耳球蟲和毒害艾美耳球蟲[3]。成年雞感染球蟲一般不會發(fā)病，但可傳播此病，是主要傳染源；雛雞感染球蟲病一般呈急性發(fā)作，精神沉郁、貧血消瘦、排血便，病情嚴重時病死率可達80%，對養(yǎng)雞業(yè)造成嚴重的經濟損失。因此，準確診斷和科學防控對雞球蟲病的治療和凈化十分重要。本文總結了國內外雞球蟲的流行情況、診斷方法、治療藥物及疫苗的研究進展，以期為雞場防控相關疾病提供參考。

1 國內外雞球蟲病流行情況

雞球蟲在我國各地均有分布，優(yōu)勢蟲種有4種：柔嫩艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、和緩艾美耳球蟲和巨型艾美耳球蟲。蘇鑫堯[4]對浙江省10個養(yǎng)雞場共500份糞便樣本進行卵囊檢測，雞球蟲的感染率為53%，其中以40 日齡以下的雛雞感染率最高。宋顯明等[5]對新疆和田地區(qū)共計11 個養(yǎng)殖場的雞糞便樣本進行分子生物學檢測，結果顯示，艾美耳球蟲的總感染率為16.5%。周春炎等[6]對江蘇省如皋市17個雞場的雞球蟲感染情況進行了調查，結果顯示，艾美耳球蟲的總感染率為65.4%。

雞球蟲病在世界范圍內均有流行，包括亞洲、非洲、澳大利亞、美洲、歐洲。Flores 等[7]對韓國共計388 個養(yǎng)雞場的雞球蟲感染情況進行調查，291個養(yǎng)雞場為陽性，且肉雞和散養(yǎng)土雞比籠養(yǎng)雞的感染率更高。Alam 等[8]檢測了孟加拉國18個肉雞場糞便樣本，并收集卵囊進行鑒定，發(fā)現(xiàn)各雞場樣本中均分離出柔嫩艾美耳球蟲的卵囊。Nedjima等[9]對阿爾及利亞國貝賈亞地區(qū)的35 個雞場的球蟲感染情況進行了調查，其中19個雞場為陽性，部分農場存在多種艾美耳球蟲交叉感染情況，總感染率為54.28%。Godwin等[10]對澳大利亞的260份雞糞便樣本進行檢測，結果顯示，98%的商品雞和81%的散養(yǎng)雞均存在艾美耳球蟲感染的情況。Mesa等[11]對哥倫比亞4個地區(qū)245個肉雞養(yǎng)殖場的雞球蟲感染情況進行了調查，其中180個農場存在艾美耳球蟲的感染情況。Andreopoulou等[12]對希臘3個地區(qū)的42個養(yǎng)雞場進行了流行病學調查，共檢出7種艾美耳球蟲，總感染率為85.7%。

2 雞球蟲病的診斷

2.1 診斷方法

病雞生前可通過采用糞便涂片法或飽和鹽水漂浮法檢查糞便中是否存在卵囊診斷是否患有雞球蟲病。也可在病雞死后解剖，刮取腸道黏膜涂片或觸片于顯微鏡下觀察，檢出裂殖體、裂殖子或配子體即可確診。目前對雞球蟲的蟲種鑒定方法常見的是傳統(tǒng)形態(tài)學方法，但此方法存在一些弊端，如不易鑒別形態(tài)相似、親緣關系較近的蟲種，球蟲卵囊分離純化培養(yǎng)周期較長，浪費人工物力等。因此，近年來開展了許多分子生物學診斷雞球蟲的方法，如常規(guī)聚合酶鏈式反應（PCR）技術、同工酶技術、熒光定量PCR 技術、隨機擴增多態(tài)性DNA（RAPD）、序列特征性擴增區(qū)域（SCAR）、多重PCR 技術、限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）、擴增片段長度多態(tài)性（AFLP）、單鏈構象多態(tài)性（SSCP）等，其中PCR和RAPD技術應用最為廣泛[13]。

張黎等[14]采用SCAR方法對山西太谷區(qū)某雞場球蟲病的病原進行了分子鑒定，并通過動物試驗、卵囊培養(yǎng)試驗對卵囊形態(tài)、孢子化時間、寄生部位進行確定，最終鑒定此球蟲為毒害艾美耳球蟲。楊洪靜[15]試驗建立了一種四重PCR 檢測方法，經驗證表明該方法靈敏度高、重復性好。Alam等[16]采用PCR方法對孟加拉國地區(qū)雞球蟲的ITS1序列進行了擴增，并鑒定出5種雞球蟲。

2.2 與其他疾病的鑒別診斷

雞組織滴蟲?。弘u球蟲病與組織滴蟲病的相同點為傳染性強，患病雞出現(xiàn)精神萎靡、羽毛蓬亂、排血便等癥狀，剖檢可見盲腸腫脹、腸壁增厚、腸腔內含有血液內容物。區(qū)別是組織滴蟲病患病雞的雞冠發(fā)紫，剖檢可見盲腸潰瘍，肝臟呈紫黑色且表面有壞死灶[17]。

傳染性貧血：兩者相同點為傳染性強，患病雞精神萎靡、羽毛蓬亂、雞冠蒼白、腹瀉。區(qū)別是解剖患傳染性貧血的病雞可見肌肉和內臟蒼白，肝臟、腎臟腫大，全身淋巴結萎縮[18]。

禽腺病毒病：兩者相同點為患病雞精神萎靡、食欲廢絕、羽毛蓬亂、雞冠蒼白。區(qū)別是解剖患禽腺病毒病的雞可見脾臟顏色變淺、質地變脆，肝臟、肌肉有出血點[19]。

3 雞球蟲病的防治手段

3.1 治療方法

3.1.1 化學藥物

目前雞球蟲病的防治方法以化學藥物為主。抗球蟲藥物可分為聚醚離子載體類抗球蟲藥和化學合成類抗球蟲藥等兩大類[20]。其中聚醚離子載體類抗球蟲藥主要包括鹽霉素、莫能霉素、馬杜霉素、那拉霉素、海南霉素、拉沙里霉素等。而化學合成類抗球蟲藥種類較多，包括磺胺類、酰胺類、吡啶類、胍類、抗硫胺素類、均苯脲類、三嗪類等。Vereecken 等[21]采用尼卡巴嗪、莫能菌素、尼卡巴嗪+莫能菌素組合對柔嫩艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲的防治作用進行了研究，結果顯示尼卡巴嗪和莫能菌素組合的藥效最好。韓明政等[22]采用體內試驗與體外試驗，研究了氫溴酸常山酮對肉雞球蟲病的防制作用。結果顯示，此藥物體內外試驗中均可抑制球蟲感染。呂鳳霞等[23]對磺胺氯吡嗪鈉甲氧芐啶可溶性粉的抗球蟲效果進行了研究，結果顯示，此藥物對球蟲病的臨床治療效果較好。關琛等[24]研究了張家口市部分養(yǎng)雞場雞柔嫩艾美耳球蟲耐磺胺氯吡嗪鈉的情況，指出治療雞球蟲可根據(jù)藥物敏感性試驗結果進行調整，緩解因耐藥性對養(yǎng)雞產業(yè)造成的經濟損失。

3.1.2 中獸藥

由于化學藥物易產生抗藥性，易造成藥物殘留。中獸藥憑借成分安全、對肝臟損傷小等特點成為近年的新興產業(yè)。中獸藥對球蟲的作用機制主要有殺蟲抑蟲、增強機體免疫力、抗菌消炎，常見的抗球蟲中藥有青蒿、白頭翁、苦參、柴胡、常山等。代培培[25]在雞日糧中添加石榴皮，探討其對雞球蟲病的防治效果。結果顯示，石榴皮具有一定的抗球蟲效果，還可保護腸道絨毛的完整性。黃海斌等[26]測試復方中草藥和鼠李糖桿菌共發(fā)酵物的抗球蟲效果，發(fā)現(xiàn)此藥物可增加體重、減輕盲腸病理變化、降低排出卵囊數(shù)。牛彪等[27]研究了青蒿散抗雞球蟲的藥效，發(fā)現(xiàn)此藥物可緩解盲腸病理變化，降低排出卵囊數(shù)。廖義瀟等[28]研究表明，使用高、中劑量的牛至油-青蒿素復方納米乳治療雞球蟲病的效果較好。王建麗等[29]研究發(fā)現(xiàn)，使用青蒿、訶子、苦參、柴胡、黃芪、山楂、木香等7味中藥組成的復方中藥制劑具有一定的抗球蟲作用，還可提高肉仔雞增重。

3.2 疫苗

目前廣泛應用的雞球蟲疫苗多為弱毒苗和強毒苗，但此類疫苗存在一些缺點，如強毒苗有可能造成雞群感染球蟲病，弱毒苗研發(fā)成本較高。因此，新型疫苗成為研究熱點，篩選雞球蟲入侵宿主關鍵分子更是研發(fā)新型疫苗的重點。雞球蟲入侵宿主的關鍵分子包含微線蛋白、棒狀體蛋白、致密顆粒蛋白、熱激蛋白、蛋白激酶、表面抗原等。

王雅坤[30]通過試驗將柔嫩艾美耳球蟲表面蛋白EtCab與重組乳酸桿菌制備疫苗并進行了免疫效果評價，結果顯示免疫重組乳酸桿菌疫苗可較好地預防此病。高陽[31]通過轉錄組學和蛋白質組學鑒定差異表達的基因和蛋白，篩選出EnSAG、Enp25、EnMIC3 蛋白分子，制備重組亞單位疫苗，對其免疫保護效果進行評價。結果顯示，此疫苗可減少球蟲卵囊，增加雞群平均體重。畢天奇等[32]制備的堆型艾美耳球蟲重組亞單位疫苗對雛雞具有較好的免疫效果。崔凱玲等[33]研究了白細胞介素-4（IL-4）和白細胞介素-2（IL-2）重組融合基因佐劑對雞球蟲活疫苗的增效作用，篩選出最小有效劑量、最優(yōu)給藥方式以及最短免疫間隔時間，為新型雞球蟲疫苗的研發(fā)提供了一定依據(jù)。

3.3 綜合防控措施

球蟲病的綜合防控措施是基于使用疫苗、天然飼料添加劑、預防性抗球蟲藥物以及改進圈舍環(huán)境的管理方式。保證環(huán)境、食水衛(wèi)生及適當通風，可最大限度地減少卵囊孢子的產生，降低發(fā)病率。應制定科學合理的管理制度，加強飼養(yǎng)管理，定期對舍內地面、墻壁、料槽、水槽等進行消毒；分群飼養(yǎng)，養(yǎng)殖密度合適；舍內通風良好，無有害氣體，保證雞舍內溫度適宜。此外，有研究表明，飼料中添加益生菌、益生元、有機酸、植物制劑等天然添加劑可提高機體免疫力，防止致病菌和球蟲病入侵[34-35]。

4 結論

雞球蟲病傳播速度快，對雛雞危害大，可對養(yǎng)雞業(yè)造成嚴重的經濟損失。本文總結了近年來雞球蟲病的流行情況，綜述了雞球蟲病的診斷技術和防治方法的研究進展和應用情況，提出加強飼養(yǎng)管理、合理使用藥物和疫苗、加強營養(yǎng)是預防此病的主要措施；一旦出現(xiàn)患病雞應立即隔離，并對雞舍進行徹底消毒；根據(jù)當?shù)仉u群流行病學和耐藥情況選擇合理的藥物，制定科學的用藥方式進行治療，如聯(lián)合用藥、穿梭用藥、輪換用藥和中草藥等。