張郁松
西安武警工程大學裝備學院(西安 710086)
泡菜是以新鮮蔬菜為原料,添加或不添加輔料,用食鹽或食鹽水泡漬發酵,經調味或不調味加工而成的發酵型蔬菜制品[1]。泡菜以其酸味純正、清爽可口、滋味鮮美、質地脆嫩、解膩開胃、促進消化、取食方便、物美價廉等特點而深受消費者青睞。
泡菜加工主要有自然發酵和純種發酵2種方式。傳統的自然發酵周期長、發酵條件難控制、產品質量不穩定、產品易存在安全性隱患。純種發酵是人工將單一或混合菌種接種于蔬菜上而進行發酵的過程。原理是增強發酵中乳酸菌群的優勢,促進乳酸菌大量繁殖。其優點在于能縮短發酵周期,降低生產成本,提高產品質量及適于工業化大規模生產。
基于乳酸菌純種發酵泡菜的優點,篩選出適宜的菌種,研究接種量、食鹽添加量、蔗糖添加量及發酵溫度對泡菜品質的影響,并優化乳酸菌制劑發酵泡菜的最佳工藝條件,以期為泡菜新工藝的研究提供理論依據和技術指導。
新鮮紅皮蘿卜、食鹽、蔗糖等(均當地市場所售)。植物乳酸桿菌、腸膜明串珠菌及短乳桿菌(微生物實驗室提供)。
YQX 型厭氧培養箱(上海躍進醫療器械廠);JA2003N電子天平(上海精密科學儀器有限公司);ST3100X型pH計(奧豪斯儀器有限公司);SW-CJ-2FD型超凈工作臺(蘇州尚田潔凈技術有限公司);溫度計;5L陶質泡菜壇(購于當地農貿市場)。
MRS培養基:酵母膏5 g,牛肉膏10 g,蛋白胨10 g,葡萄糖10 g,檸檬酸二銨2 g,NaAc 5 g,MnSO40.25 g,K2HPO42 g,MgSO40.58 g,吐溫-80 1.0 g,用蒸餾水定容至1 000 mL,pH 6.2~6.4,于121 ℃高壓滅菌15 min。1.3 試驗方法
1.3.1 泡菜的制作工藝

1.3.2 感官品質評定[4]
邀請10名接受過感官評價的專業人士組成評定小組,根據發酵泡菜感官質量評分標準中的色澤、氣味、滋味、質地4項指標進行評價,滿分100分,取其平均值。

表1 泡菜感官評定標準
2.1.1 菌種選擇與配比[5]
研究表明,泡菜中的乳酸菌主要是乳球菌屬、乳桿菌屬、明串珠菌屬與片球菌屬,包括植物乳桿菌、腸膜明串珠菌、乳酸鏈球菌、短乳桿菌、乳酸片球菌、干酷乳桿菌和彎曲乳桿菌等。黃業傳等[6]篩選出適合榨菜葉發酵酸菜的發酵劑,得出的最優混合發酵劑為腸膜明串珠菌、短乳桿菌、植物乳桿菌三者比例3∶1∶1,可生產出口感、風味、質地俱佳的酸菜。故試驗也選定腸膜明串珠菌、植物乳桿菌和短乳桿菌作為發酵泡菜的混合發酵劑。
含酸量是衡量泡菜菌種發酵性能的重要指標,在發酵過程中總酸越大,泡菜酸味、顏色及脆度越好。因此,以泡菜總酸為評價指標,通過試驗,確定植物乳桿菌∶短乳桿菌∶腸膜明串珠菌2∶1∶1為純種發酵的最佳菌株間配比組合。
2.1.2 接種量對泡菜感官品質的影響[8-10]
接種量對發酵速度有較大的影響,選擇合適的接種量,不僅可以縮短發酵周期,也有利于風味物質的形成。
在植物乳桿菌∶短乳桿菌∶腸膜明串珠菌2∶1∶1組合菌種,食鹽添加量4%,蔗糖添加量3%,室溫28℃條件下發酵5 d,研究接種量對泡菜品質的影響。
接種量對泡菜的品質有較大影響。接種量小,發酵時間就越長,會使泡菜酸味不足,滋味和香氣較差,組織狀態也不佳,不夠爽脆。接種量大,泡菜產酸速度快,發酵周期短,風味物質形成較少,酸味過重,風味不協調,香氣與滋味一般。由表2可知,接種量4%(濃度比)時,風味協調,質地脆嫩,滋味、香氣較佳,感官評分最高。是加工泡菜必不可少的材料。鹽濃度的變化在改變泡菜風味的同時,也會對泡菜發酵速度產生重要的影響。

表2 接種量對泡菜品質的影響
在植物乳桿菌∶短乳桿菌∶腸膜明串珠菌2∶1∶1組合菌種,接種量4%,蔗糖添加量3%,室溫28 ℃條件下發酵5 d,研究食鹽添加量對泡菜品質的影響。
從表3可以看出,食鹽添加量對泡菜的品質影響較大。添加量過低,易促進乳酸發酵,產品酸味較重,口味偏淡,容易滋生雜菌,導致發酵過程中生成不良氣味,香氣、滋味較差;添加量太高又會抑制乳酸菌的生成,不利于發酵,使得泡菜的酸味不足,咸味過重,高添加量的鹽溶液還會使泡菜失去較多水分,脆度下降。綜合考慮,食鹽添加量5%(質量比)時,泡菜質地脆嫩,香氣濃郁,風味協調,感觀評價最佳。

表3 食鹽添加量對泡菜品質的影響
2.1.4 蔗糖添加量對泡菜感官品質的影響
蔗糖主要是增加甜味,改善泡菜的風味,同時也提供碳源,促進乳酸菌的生長,提高發酵速度。糖濃度的變化在改變泡菜風味的同時,也大幅影響泡菜的香氣及滋味。
在植物乳桿菌∶短乳桿菌∶腸膜明串珠菌2∶1∶1組合菌種,接種量4%,食鹽添加量4%,室溫28 ℃條件下發酵5 d,研究蔗糖添加量對泡菜品質的影響。
蔗糖作為乳酸菌生長的重要碳源,適量添加可以提高發酵速度,縮短生產周期,增加產品風味。蔗糖還可與泡菜中的酸味相互融合,減輕強烈酸味所帶來的刺激性,使泡菜中的酸味與甜味充分協調,產品更加爽口。但添加量過高時,由于過甜而使得各種風味物質沒有較好地相輔,反會降低泡菜的酸爽感,從而影響到產品的香氣及滋味。由表4泡菜感官評價顯示,蔗糖添加量2%(質量比)時,泡菜色澤明亮,風味協調、香氣濃郁,聞起來香氣濃郁。

表4 蔗糖添加量對泡菜品質的影響
2.1.5 發酵溫度對泡菜感官品質的影響
溫度也是影響泡菜發酵的重要因素,不同微生物生長繁殖都有其適宜的溫度范圍,在一定范圍內,溫度越高,發酵速度越快。
在植物乳桿菌∶短乳桿菌∶腸膜明串珠菌2∶1∶1組合菌種,接種量4%,蔗糖添加量3%,食鹽添加量4%,不同溫度下發酵5 d,研究發酵溫度對泡菜品質的影響。
溫度是影響泡菜發酵的重要因素,溫度過低,乳酸菌就會生長緩慢,泡菜生產率就會大大降低,在一定溫度范圍內,溫度越高,乳酸菌增殖越快,產酸越多。但溫度太高及高酸性環境也會使乳酸菌的生理活性受到抑制,而且對于產品風味而言,如果產酸過快,發酵周期就會縮短,風味物質就會越少,此時泡菜產品滋味較差,酸味太濃,香氣不正。從表5感官評價可知,32 ℃的發酵溫度,既縮短發酵周期也最符合感官品質的要求。

表5 發酵溫度對泡菜品質的影響
在單因素試驗基礎上,選擇影響較大的接種量、食鹽添加量、糖添加量及發酵時間4個因素進行正交試驗設計,正交試驗因素水平表見表6,試驗結果見表7。

表6 試驗因素水平表
從表7可以看出,4個因素對泡菜感官評分影響大小依次為食鹽添加量>接種量>發酵溫度>蔗糖添加量。在該組合中,以A3B2C2D3出的產品風味最佳,即接種量6%(濃度比),食鹽添加量5%(質量比),蔗糖添加量3%(質量比),發酵溫度32 ℃。所得產品色澤紅艷、酸爽脆嫩、滋味鮮美且香氣濃郁。

表7 正交試驗結果分析
確定乳酸菌純種發酵泡菜的最佳工藝:以鮮辣椒為原料,以植物乳桿菌∶短乳桿菌∶腸膜明串珠菌2∶1∶1為菌株間配比組合,接種量添加量6%(濃度比),食鹽添加量5%(質量比),白砂糖3%添加量(質量比),發酵溫度32 ℃、發酵時間5 d。在此條件下發酵的蘿卜泡菜色澤紅艷、酸爽脆嫩、滋味鮮美且香氣濃郁。
純種發酵可快速增加泡菜的活菌量,提高乳酸含量,縮短發酵周期,因乳酸菌成為優勢菌種,還抑制雜菌生長,與傳統自然發酵相比較,產品亞硝酸鹽含量明顯減少,適于工業化大批量生產。
受泡菜發酵過程中微生物菌落結構的影響,純種發酵泡菜的風味往往不及自然發酵,多菌種協同是純種發酵研究發展的重要方向。