摘除花蕾對林下參不同部位中人參皂苷和植物激素含量的影響

羅嘉儀，羅旖璐，韓紅亮，Galina Ramskaya，徐 娟，林學鎂，申玲玲，何 新*，紀瑞鋒*

摘除花蕾對林下參不同部位中人參皂苷和植物激素含量的影響

羅嘉儀1，羅旖璐1，韓紅亮1，Galina Ramskaya2，徐 娟3，林學鎂3，申玲玲4，何 新1*，紀瑞鋒1*

1. 廣東藥科大學，廣東 廣州 510006 2. 莫斯科國立謝東諾夫第一醫科大學，莫斯科 119991 3. 拉芳家化股份有限公司，廣東 汕頭 515041 4. 島津企業管理（中國）有限公司廣州分公司，廣東 廣州 510640

考察摘除花蕾對林下參葉片、葉柄、莖頂端、莖中部、莖基部、蘆頭、根皮、根心、側根及須根主要人參皂苷和植物激素水楊酸、脫落酸含量的影響，研究人參皂苷含量變化與植物激素的相關性，為林下參的種植方式優化提供依據?；赨PLC-MS/MS技術分別建立含量測定方法，對林下參10個部位主要人參皂苷和植物激素進行測定，運用單因素分析評價林下參摘蕾與否的質量差異，并采用Spearman相關性分析方法探討植物激素與人參皂苷含量的相關性。所建立的含量測定方法穩定可行；摘蕾組林下參地下部位中參皮（＜0.05）和側根部位（＜0.001）中人參總皂苷含量顯著增加，地上部位包括林下參葉、葉柄與莖總人參皂苷含量均顯著降低（＜0.001）；摘蕾組人參皂苷Rd在蘆頭（＜0.05）、根皮（＜0.01）中的含量顯著上升。摘蕾組參皮和參心中水楊酸含量顯著降低（＜0.001）。水楊酸與人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1含量呈正相關，與人參皂苷Rg3、人參皂苷F1含量呈負相關。摘除花蕾可顯著提高林下參除須根外地下部位主要人參皂苷總含量，并使地上部位人參皂苷含量降低，提高林下參綜合經濟價值。摘除花蕾可引起內源性水楊酸含量變化，且該變化人參皂苷含量與人參皂苷含量變化有相關性。

林下參；摘蕾栽培；人參皂苷Rb1；人參皂苷Rg3；人參皂苷Rd；水楊酸；脫落酸；UPLC-MS/MS

人參為五加科人參屬植物人參C. A. Meyer的干燥根和根莖，人參葉為其干燥葉，兩者均具有補氣、益肺、生津的功效[1]。播種或移栽于森林之下的人參稱之為林下參，林下參全株均含有人參皂苷，其種類和含量是影響林下參藥理作用和藥材質量的主要因素，其中人參皂苷Rb1、人參皂苷Re和人參皂苷Rg1為《中國藥典》2020年版規定的林下參藥材質量控制的重要指標[1]。

在中藥栽培生產實踐中，摘除花蕾可以節約藥用植物生殖活動所消耗的能量及物質使其更多地被用于營養生長，從而提高藥用植物的總生物量[2-3]。20世紀80～90年代[4-5]，我國即有摘蕾可以提高人參產量10%～30%，西洋參摘蕾有效提高單產37%的報道，在國家標準《人參優質種植技術規范》中明確規定園參的種植“除留種田外，應及時掐掉花蕾”，但是對于林下參現有的國家標準、地方標準及團體標準中并無摘蕾的規定[6-9]。近年來在林下參的栽培生產過程中，出現了摘蕾以進一步提高產量的現象，但是摘蕾對林下參不同部位人參皂苷含量影響的研究尚不多[10]。

植物激素是植物體內的小分子化合物，調控著植物的休眠、生殖以及次生代謝物合成[11]等幾乎所有生命活動。水楊酸、脫落酸是目前研究較為深入的影響植物次生代謝物合成的植物激素，已有研究表明外源水楊酸、脫落酸可引起人參、西洋參中人參皂苷含量變化[12-13]。因此，外界刺激引起的人參皂苷含量變化可能與水楊酸、脫落酸等植物激素的含量變化呈現較高的相關性，即外界刺激可能通過影響水楊酸、脫落酸等植物激素含量，繼而引起人參皂苷的含量變化。

綜上所述，目前摘蕾對林下參不同部位人參皂苷和植物激素影響的研究尚不多，本實驗基于UPLC-MS/MS技術探討摘蕾引起的林下參不同部位主要人參皂苷含量和植物激素的變化，并初步探討了人參皂苷與水楊酸、脫落酸2種植物激素含量變化的相關性，為林下參栽培過程中是否摘蕾提供參考依據。

1 材料、儀器與試劑

1.1 儀器

QUINTIX125D-1CN型十萬分之一電子分析天平，北京賽多利斯儀器系統有限公司；島津LC-40D X3plus四元泵，島津SIL-40C X3自動進樣器，島津CTO-40S柱溫箱，島津LCMS-8045三重四極桿質譜儀，日本島津公司；Sigma 3-30K型高速臺式離心機，德國默克公司；MD200-2氮吹儀，杭州奧盛儀器有限公司；ZQTY-50V臺式全溫振蕩培養箱，上海知楚儀器有限公司；SB-5200DTD超聲波清潔儀，寧波新芝生物科技股份有限公司。

1.2 材料

將同一年播種且生長環境及日常管理完全一致的林下參分為2組，其中未摘蕾（CK）組林下參種植年限為21年，自然生長，無額外干預；摘蕾（BR）組林下參在種植的第15年開始連續摘蕾7年直至其年限為21年。本研究所用上述2組藥材于2021年8月采自吉林省集安市，經廣東藥科大學紀瑞鋒博士鑒定為五加科人參屬植物人參C. A. Meyer林下參鮮樣，所有樣品留樣于廣東藥科大學中藥學院。

1.3 試劑

對照品人參皂苷Rb1（批號DSTDR000601）、人參皂苷Rd（批號DST200703-015）、人參皂苷Re（批號DSTDR001401）、人參皂苷F1（批號DST200302-025）、人參皂苷Rg1（批號DST200722-009）、人參皂苷Rg2（批號DST200518-010）、人參皂苷Rg3（批號DST191107- 011），均購自成都曼思特生物科技有限公司，質量分數均≥98%；水楊酸（批號H31A10B96366）、脫落酸（批號A09N11L130206），購自上海源葉生物；質譜級甲醇（批號I1101035028），購自德國Merck公司；甲酸（批號L2300107，質量分數≥98%）購自上海安譜實驗科技股份有限公司。

2 方法

2.1 樣品前處理

CK組和BR組各3個生物學平行，全株采挖，快速擦拭表面泥土，切分為10個部位，分別為地上部位：葉片、葉柄、莖頂端（自葉柄開始的莖上段部位，約為莖總長度的1/3）、莖中部（莖中間部分的1/3）、莖基部（自蘆頭開始的莖下段部位，約為莖總長度的1/3），地下部位：蘆頭、根皮、根心、側根、須根。以上10個部位錫箔紙包裹后放入液氮，備用。

2.2 供試品溶液的制備

2.2.1 人參皂苷溶液[14]林下參樣品快速液氮研磨，精密稱取0.1 g研碎的樣品，加入2 mL 70%甲醇水溶液，超聲提取30 min（100 Hz、50 ℃），超聲后補足損失體積，過0.22 μm微孔濾膜，取續濾液，即得。

2.2.2 植物激素溶液[15]林下參樣品快速液氮研磨，精密稱取50 mg研碎的樣品，平行3份，分別加入500 μL提取溶液（異丙醇-純水-濃鹽酸2∶1∶0.002），搖床振搖提取（100 r/min、30 min，4 ℃）；加入1 mL二氯甲烷，搖床振搖萃取（100 r/min、30 min、4 ℃）；離心機離心（13 000 r/min、5min，4 ℃）；吸取900 μL有機相至2 mL離心管；氮吹儀吹干，150 μL初始流動相復溶，過0.22 μm微孔濾膜，取續濾液，即得。

2.3 對照品溶液的制備

分別稱取人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd、人參皂苷Re、人參皂苷F1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg2、人參皂苷Rg3對照品，精密稱定，加入色譜甲醇配制成人參皂苷檢測成分混合對照品溶液，質量濃度分別為0.162、0.185、0.075、0.110、0.077、0.050、0.050 mg/mL，加入色譜甲醇逐級稀釋，配制成7種質量濃度梯度的標準曲線工作溶液。

分別稱取水楊酸和脫落酸對照品，精密稱定，加入色譜甲醇配制成植物激素檢測成分混標溶液，水楊酸和脫落酸的質量濃度分別為2.00 μg/mL和2.16 μg/mL；加入色譜甲醇逐級稀釋制成7個質量濃度梯度的標準曲線工作溶液。

2.4 色譜與質譜條件

2.4.1 人參皂苷檢測條件 （1）色譜條件 Waters ACQUITY UPLC ACQUITY BEH色譜柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）；流動相為0.1%甲酸水（A）-甲醇（B），洗脫梯度為0～1 min，10%B；1～9 min，10%～60% B；9～12 min，60%～65% B；12～14 min，65%～70% B；14～23 min，70%～80% B；23～26 min，80%～85% B；26～29 min，85%～95% B；體積流量為0.5 mL/min；柱溫為40 ℃，進樣量為1 μL。

（2）質譜條件 ESI離子源；掃描模式為正負離子切換，多反應監測（multiple reaction monitoring，MRM）模式檢測；霧化氣流量3.0 L/min；干燥氣流量10.0 L/min；加熱氣流量10L/min；接口溫度300 ℃；去溶劑管溫度（desolvation line，DL）250 ℃；加熱塊溫度 400 ℃；碰撞誘導解離電壓（collision induced dissociation，CID）270 kPa。人參皂苷成分MRM參數見表1。

2.4.2 植物激素檢測條件 （1）色譜條件 Waters ACQUITY UPLC ACQUITY BEH色譜柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）；流動相為流動相為0.1%甲酸水（A）-甲醇（B），洗脫梯度為0～1 min，10% B；1～6 min，10%～15% B；6～16 min，15%～66% B；16～19 min，66%～95% B；體積流量為0.5 mL/min；柱溫為40 ℃，進樣量為5 μL。

（2）質譜條件：ESI離子源；掃描模式為正負離子切換，MRM模式檢測；霧化氣流量3.0 L/min；干燥氣流量10.0 L/min；加熱氣流量10 L/min；接口溫度300 ℃；DL溫度250 ℃；加熱塊溫度400 ℃；CID270 kPa。植物激素成分MRM參數見表1。

2.5 方法學考察

2.5.1 線性關系考察 取“2.3”項下制備的梯度質量濃度混合對照品工作溶液，按上述色譜質譜條件進行樣品分析，記錄色譜圖及峰面積。以峰面積為縱坐標（），質量濃度為橫坐標（），進行線性回歸；結果表明，在考察范圍內，7種人參皂苷成分與2種植物激素的濃度與峰面積呈良好的線性關系，均大于0.990，見表2。取上述混合對照品適量，用70%甲醇稀釋成濃度為梯度由高到低的系列溶液，進樣，取信噪比（/）為3和/為10的混合對照品溶液作為待測成分的檢測限（LOD）和定量限（LOQ）。

表1 植物激素與人參皂苷的MRM優化結果

表2 人參皂苷成分與植物激素的回歸方程、r、線性范圍、LOD和LOQ

2.5.2 精密度試驗 精密吸取同一混合對照品溶液，按“2.4”項下條件連續進樣6次，記錄待測成分的峰面積，并計算峰面積的RSD值，考察精密度。人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd、人參皂苷Re、人參皂苷F1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg2、和人參皂苷Rg3的精密度分別為4.77%、1.25%、1.20%、2.96%、1.19%、1.9%、3.89%；水楊酸、脫落酸的精密度為2.99%、1.72%。

2.5.3 穩定性試驗 取CK組林下參葉樣品，按按“2.2”項下植物激素以及人參皂苷供試品制備方法分別平行制備6份供試品，室溫放置，分別于0、2、4、6、12、24 h按“2.4”項下條件進樣，記錄待測成分的峰面積，并計算峰面積的RSD值，考察穩定性。人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd、人參皂苷Re、人參皂苷F1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg2、和人參皂苷Rg3分別為2.23%、1.84%、2.55%、4.22%、1.09%、2.37%、2.61%；水楊酸和脫落酸分別為2.87%、2.89%。

2.5.4 重復性試驗 取CK組林下參葉樣品，按“2.2”項下植物激素以及人參皂苷供試品制備方法分別平行制備6份供試品，按“2.4”項下條件進行測定，記錄待測成分的峰面積，并計算峰面積的RSD值。人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd、人參皂苷Re、人參皂苷F1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg2、和人參皂苷Rg3分別為1.81%、2.41%、1.31%、1.58%、3.43%、2.54%、2.79%；水楊酸和脫落酸分別為2.99%、1.72%，表明重復性良好。

2.5.5 加樣回收率試驗 稱取已測定的液氮研碎樣品（CK組林下參葉）6份，每份約0.05 g，精密加入一定量的混合對照品溶液，分別按“2.2”項制備供試品，按“2.4”項條件進樣測定各成分含量，計算其回收率。人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd、人參皂苷Re、人參皂苷F1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg2、和人參皂苷Rg3的平均回收率分別為101.83%、114.69%、109.51%、105.53%、104.70%、103.95%、98.23%；RSD分別為2.3%、1.3%、4.3%、2.3%、5.3%、2.3%、1.3%；水楊酸和脫落酸的平均回收率分別為94.26%和100.57%；RSD分別為2.3%、1.3%。

2.6 數據處理

采用Labsolutions 工作站進行測定物濃度計算，用Excel進行數據整理，用 SPSS 24.0 進行統計分析，用R 語言（ggplot2 package、corrplot package）進行圖表繪制。

3 結果與分析

3.1 UPLC-MS/MS定量分析結果

2種UPLC-MS/MS定量分析方法可分別使7種人參皂苷（圖1-A）和2種植物激素分離（圖1-B），可用于林下參不同部位人參皂苷及植物激素的含量檢測。

圖1 目標化合物總離子流圖

3.2 摘除花蕾對林下參質量的影響

3.2.1 摘除花蕾對林下參不同部位主要人參皂苷含量的影響 按“2.1”項下方法處理樣品，“2.2”項下方法制備人參皂苷供試品，“2.4”項下色譜質譜條件進行檢測。人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1和人參皂苷Re為人參藥材質量的主要指標成分[1]，三者含量之和計為主要人參皂苷，2組樣品主要人參皂苷見圖2-A；所測7種人參皂苷含量之和計為總人參皂苷，2組樣品中總人參皂苷比較見圖2-B。

BR組林下參地下部位中主要人參皂苷和總人參皂苷含量均高于CK組林下參，其中根皮（＜0.05）、須根（＜0.05）2個部位具有顯著性差異，蘆頭及根心部位無顯著性差異；然而，對于地上部位而言，BR組主要人參皂苷和總人參皂苷含量均顯著低于CK組（0.0001)。2組林下參根皮中的人參皂苷含量均明顯高于根心（＜0.05）。

3.2.2 摘除花蕾對林下參不同部位單體人參皂苷含量的影響 林下參各部位人參皂苷含量見圖3及表3，與CK組比較，BR組人參皂苷Rb1在蘆頭和側根中含量顯著增加（＜0.05），在須根和葉中顯著降低（＜0.05）。BR組人參皂苷Rg1在側根以及須根中含量顯著升高（＜0.01），在葉中的含量顯著降低（＜0.05）。BR組中，人參皂苷Re在蘆頭、葉、葉柄以及須根中均顯著下降（＜0.05），均少于CK組的50%。BR組人參皂苷Rd在蘆頭（＜0.05）、根皮（＜0.01）中的含量顯著上升，其中蘆頭中的Rd增至CK組的12倍以上。與CK組比較，BR組人參皂苷Rg2含量在側根、須根和葉中的含量顯著升高（＜0.05）。BR組人參皂苷Rg3在葉中的含量顯著升高，增至CK組（＜0.01）的10倍以上，在其他部位無顯著性差異。2組間人參皂苷F1含量無顯著性差異。

LT-蘆頭 GP-根皮 GX-根心 CG-側根 G-須根 Y-葉 YB-葉柄 JL-莖基部 JM-莖中部 JH-莖頂端 BR與CK組比較：*P＜0.05 **P＜0.01

LT-蘆頭 GP-根皮 GX-根心 CG-側根 G-須根 Y-葉 YB-葉柄 JL-莖基部 JM-莖中部 JH-莖頂端

表3 林下參不同部位單體人參皂苷含量(, n = 3)

與CK組比較：*＜0.05**＜0.01

*< 0.05**< 0.01CK group

3.3 摘蕾對人參影響的機制

3.3.1 摘蕾對林下參不同部位植物激素含量的影響 取“2.1”項下同樣的林下參植株，按“2.2”項下制備方法制備植物激素供試品，按“2.4”項下色譜質譜條件進行檢測，BR組和CK組不同部位植物激素的含量分布結果見表4和圖4。

2組林下參中的水楊酸在參皮、參心間含量無顯著差異性，其他部位均具有顯著性差異（＜0.05）。CK組林下參中脫落酸在不同部位間的分布無顯著性差異，但在BR組中，地上部位與地下部位含量分布具有顯著性差異（＜0.05），須根與其他部位的脫落酸含量均具有顯著性差異（＜0.05）。林下參莖中每段間的植物激素含量無顯著性差異。

表4 CK組與BR組中不同部位植物激素的含量分布(, n = 3)

“—”表示含量低于檢測限；同列數據不同字母表示顯著性差異（＜0.05）

The symbol“—”means below LOQ; Different letters in the same column indicate significant difference (< 0.05)

LT-蘆頭 GP-根皮 GX-根心 CG-側根 G-須根 Y-葉 YB-葉柄 JL-莖基部 JM-莖中部 JH-莖頂端；BR組與CK組比較：*P＜0.05 **P＜0.001

相比于CK組，BR組根皮、根心水楊酸含量顯著降低（＜0.05）；CK組中，葉柄和莖中水楊酸含量低于檢測限，BR組中水楊酸含量顯著升高；其他部位水楊酸含量在兩組間無顯著性差異。2組間林下參不同部位脫落酸含量變化無顯著性差異。

3.3.2 水楊酸、脫落酸與人參皂苷含量分布相關性 采用IBM SPSS 26和R Studio軟件，對2組樣品人參皂苷以及植物激素含量進行Spearman相關性分析、雙尾顯著性檢驗，從而分析林下參中脫落酸和水楊酸與人參皂苷的含量分布相關性，結果見圖5。

水楊酸與人參皂苷Rb1（＝0.467，＜0.01）、人參皂苷Rg1（＝0.294，＜0.05）呈正相關，與人參皂苷Rg3（＝?0.257，＜0.05）和人參皂苷F1（＝?0.355，＜0.01）呈負相關。脫落酸與人參皂苷Re（＝0.257，＜0.05）、人參皂苷F1（＝0.258，＜0.05）呈正相關。水楊酸與總人參皂苷含量（＝0.266，＜0.05）呈正相關，與主要人參皂苷含量（＝0.304，＜0.05）呈正相關。

4 討論

4.1 色譜條件考察

高效液相色譜質譜聯用法具有專屬性強、定量限低和分析時間短等優點，近年來越來越多地用于人參藥材中人參皂苷和植物激素的含量測定[16-17]。人參體內植物激素水楊酸與脫落酸含量極低，數量級約為10?8～10?7，因此適合使用高效液相色譜質譜聯用法進行測定。針對人參皂苷和植物激素檢測，本實驗比較了甲醇-水、甲醇-水（0.05%甲酸）、甲醇-水（0.1%甲酸）洗脫系統，結果表明采用甲醇-水作為洗脫系統時，人參皂苷及植物激素的離子化效果差；采用甲醇-0.1%甲酸水溶液作為洗脫系統時，人參皂苷時離子響應效果最好；而采用甲醇-0.05%甲酸水溶液與甲醇-0.1%甲酸水溶作為液洗脫系統，植物激素響應效果無差別，因此選用甲醇-0.1%甲酸水溶液進行洗脫。

左下角數值為P值，右上角顏色表示r值

本實驗成功建立了可用于人參皂苷含量測定及人參內源植物激素含量測定的UPLC-MS/MS方法，并對林下參10個不同部位中的7種人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg3、人參皂苷Rg2、人參皂苷Rd、人參皂苷Re、人參皂苷F1及2種植物激素水楊酸、脫落酸進行了含量測定，所建立的方法穩定可行。

4.2 林下參不同部位人參皂苷的分布規律及摘蕾對其的影響

研究表明摘蕾可顯著提高園參、三七及西洋參的產量及人參皂苷含量[4-5, 18]。為了考察摘蕾對林下參品質的影響，本實驗對未摘蕾及摘蕾林下參中7種人參皂苷含量進行測定。人參皂苷含量部位間分布差異大[19]，且分布差異與運輸密切相關[20-21]，Schramek等[20]用13C標記的同位示蹤法發現，人參皂苷合成的前體存在從葉子轉移到根中的現象。Kim等[22]與Han等[23]研究小組發現，人參皂苷分布與基因表達并不一致，由此可以推測，人參皂苷含量在葉片、葉柄、莖頂端、中部、基部、蘆頭、根皮、根心、側根與須根的空間分布可能呈依次遞增或遞減規律。因此本實驗將林下參切分為10個部位并對其含量分別進行檢測。本實驗結果表明，正常生理狀態下，地上部分人參皂苷總含量葉＞葉柄＞莖頂端＞莖中部＞莖基部，即人參皂苷總含量在葉、葉柄與莖中呈遞減規律，這可能是人參皂苷由葉片合成然后運輸到根造成的，與前期文獻報道相符[22-23]。摘蕾后人參皂苷在地上部位的含量均降低，但其含量遞減現象與正常組基本一致。

與未摘蕾組相比，摘蕾組林下參地下部位除須根部位外中主要人參皂苷和總人參皂苷含量均上升，地上部位主要人參皂苷和總人參皂苷含量均顯著降低。考慮到須根在林下參植株總生物量中占比較少，因此摘除花蕾可提高林下參藥材整體質量，但是林下參來源的人參葉藥材品質卻有所下降。

4.3 摘除花蕾對林下參影響的植物激素相關機制

研究表明外源水楊酸及脫落酸處理對人參皂苷的含量有顯著影響，例如，外源水楊酸處理可以提高林下參根中人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re等人參皂苷的含量[12]。

研究表明水楊酸及脫落酸均參與調控植物人參皂苷的生物合成，例如水楊酸通過提高人參合成酶活性，促進人參皂苷積累[12]，脫落酸通過上調人參皂苷合成酶相關基因啟動子的表達，影響西洋參人參皂苷的積累[13, 24]。因此，本實驗對林下參不同部位水楊酸及脫落酸的含量進行了檢測。摘蕾對不同部位水楊酸的含量變化有顯著影響。植物在受到外界環境刺激時可通過調控水楊酸、脫落酸等植物激素，促進次生代謝物的合成來抵御環境脅迫[25]。水楊酸通過影響關鍵酶活性、關鍵酶基因差異表達、調控轉錄因子和啟動子活性、植物激素間協同交互影響人參皂苷的生物合成和積累[26]。因此，摘蕾改變林下參中內源性水楊酸的含量，可能通過調控三萜類化合物在生物合成中的關鍵酶活性或基因差異表達，進而影響人參皂苷的合成與運輸。

摘除花蕾可提高林下參除須根外地下部位人參皂苷含量，并使地上部位人參皂苷含量降低，因此摘除花蕾可提高林下參藥材整體質量，但是林下參來源的人參葉藥材品質卻有所下降。但林下參根和根莖經濟價值更高，因此摘除花蕾可以提高林下參的綜合經濟價值。摘除花蕾可能通過改變內源性水楊酸的含量，從而調控林下參的生理活動，最終引起人參皂苷的含量變化。本研究闡明了摘除花蕾對林下參中人參皂苷和植物激素含量的影響，為林下參種植方式選擇提供理論依據。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Influence of buds removal on content of ginsenosides and phytohormones in different part of similar wild

LUO Jia-yi1, LUO Yi-lu1, HAN Hong-liang1, Galina Ramskaya2, YU Juan3, LIN Xue-mei3, SHEN Ling-ling4, HE Xin1, JI Rui-feng1

1. Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, China 2. I.M. Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow 119991, Russia 3. Lafang China Co., Ltd., Shantou 515041, China 4. Guangzhou Analytical Applications Center, Shimadzu (China) Co., Ltd., Guangzhou 510640, China

To provide basis for the optimization of planting mode of, and investigate the effects of buds removal on the contents of main ginsenosides and plant hormones like salicylic acid and abscisic acid in various parts of similar wild ginseng, including aerial part: leaf, petiole, stem tip, middle part stem base, and underground part: rhizome, root bark, root heart, lateral root and fibrous root. Moreover, the further study focus on the correlation of content between ginsenosides and plant hormones.The major ginsenosides and plant hormones ofin 10 parts were accurately quantified using UPLC-MS/MS technology. The quality ofaffected by buds removal was evaluated using one-way ANOVA, and the correlation between the content of plant hormones and ginsenosides was investigated using Spearman correlation analysis.The methodologies that had been established were reliable and practical. Total ginsenosides in root bark (＜0.05) and lateral root (＜0.001) of similar wild ginseng in the buds removed group were significantly increased, whereas total ginsenosides in aboveground parts of similar wild ginseng, including leaves, petioles, and stems, were significantly decreased (＜0.001). The contents of ginsenoside Rd in rhizome(＜0.05) and root bark (＜0.01) in buds removed group were significantly increased. The contents of salicylic acid in the root bark and root heart of ginseng in buds removed group were significantly decreased (＜0.001). Salicylic acid was positively correlated with ginsenoside Rb1and Rg1, and negatively correlated with ginsenoside Rg3and F1contents.Removal of buds significantly increased the content of total ginsenosides in the underground parts ofexcept fibrous roots, but decreased in the above-ground part, leading to an increase in the comprehensive value of forest cultivated ginseng. Furthermore, buds removal can cause changes in salicylic acid content, which was correlated to the change of ginsenoside contents.

C. A. Meyer; buds removal; ginsenoside Rb1; ginsenoside Rg3; ginsenoside Rd; salicylic acid; abscisic acid; UPLC-MS/MS

R286.2

A

0253 - 2670(2023)04 - 1243 - 09

10.7501/j.issn.0253-2670.2023.04.025

2022-08-06

2022年廣東省科技創新戰略專項資金（“攀登計劃”專項資金）（pdjh2022a0260）；2021年汕頭市精細化工企業引進科技領軍人才團隊及進口替代攻關專項資金項目（STLT2021007）；廣東省中醫藥局科研項目（20212125）；2021年度廣東省科技創新戰略專項資金（“攀登計劃”）（pdjh2021b0262）

羅嘉儀（1997—），女，在讀碩士，從事中藥分析及藥效物質基礎研究。E-mail: logaga2@163.com

何 新，博士生導師，教授，從事中藥藥理與中藥藥動學研究。E-mail: hexintn@gdpu.edu.cn

紀瑞鋒，博士，講師，從事中藥物質基礎與質量控制研究。E-mail: jiruifeng@edpu.edu.cn

[責任編輯 時圣明]