西帕依固齦液治療糖尿病足潰瘍效果及網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析*

李 茜，郝 夢，李金耀，李建德，劉 婷，季志紅

（1.新奇康藥業(yè)股份有限公司，新疆 烏魯木齊 830011；2.新疆大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830049；3.新疆醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院，新疆 烏魯木齊 830054；4.新疆奇沐醫(yī)藥研究院，新疆 烏魯木齊 830011；5.新疆中藥＜民族藥＞制藥共性關(guān)鍵技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆 烏魯木齊 830011）

糖尿病足潰瘍（DFU）為嚴(yán)重的慢性糖尿病并發(fā)癥，臨床主要表現(xiàn)為伴有神經(jīng)病變和周圍血管病變的足部潰瘍［1］。DFU 可導(dǎo)致感染、壞疽、截肢，甚至死亡，給患者帶來身體痛苦和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。目前主要治療手段為在控制血糖基礎(chǔ)上，清潔護(hù)理創(chuàng)面、控制感染、增加血流灌注和足部減壓［2］。中醫(yī)將DFU 歸為“脫疽”，多以清熱解毒、祛腐排膿、活血散瘀、消癰止痛為治療原則［3］。西帕依固齦液主要組成藥材為沒食子，具有清熱解毒、化腐消癰、活血逐瘀功效，主要用于治療牙周疾病引起的牙齒酸軟、牙齦出血、口舌生瘡，咽喉腫痛等病癥［4］。本研究中探討了西帕依固齦液促進(jìn)模型大鼠DFU愈合的效果，并結(jié)合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析其作用機(jī)理，為后續(xù)研究該制劑治療DFU的藥物效應(yīng)動力學(xué)和機(jī)制提供參考，同時為制劑的二次開發(fā)探索提供研究基礎(chǔ)。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器、試藥與動物

儀器：PL2002型分析電子天平（梅特勒-托利多儀器＜上海＞有限公司）；EQ2016 -037 型顯微鏡（德國Leica公司）。

試藥：西帕依固齦液（新奇康藥業(yè)股份有限公司，批號為191021，規(guī)格為每瓶100 mL）；鏈脲佐菌素（STZ，美國西格瑪奧德里奇公司，批號為190209）、檸檬酸、檸檬酸三鈉均為分析純；水為純化水。

動物：SD 大鼠50 只，健康潔凈級，雄性，5～7 周齡，體質(zhì)量（200±20）g，均購自新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)，實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)許可證號SCXK（新）2018 -0002，倫理批件號2019011。所有大鼠均于無特定病原體環(huán)境中飼養(yǎng)，溫度（25±2）℃，相對濕度（50±5）%，人工光照12 h/12 h明暗交替，自由進(jìn)食飲水，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周。

1.2 方法

1.2.1 動物實(shí)驗(yàn)

糖尿病模型建立：適應(yīng)期結(jié)束后即稱定大鼠體質(zhì)量，并隨機(jī)分為空白組（10只）及實(shí)驗(yàn)組（40只）。實(shí)驗(yàn)組采用飲食誘導(dǎo)+化學(xué)試劑誘導(dǎo)的方法建模，給予正常飲食、飲水，灌胃高脂乳劑飼料（每100 g體質(zhì)量0.6 mL），每天1次，持續(xù)飼喂30 d，每5 d記錄1次體質(zhì)量，并觀察大鼠形態(tài)變化；30 d后腹腔注射1%STZ溶液（60 mg/ kg），連續(xù)注射3 d后，禁食12 h，于次日清晨對實(shí)驗(yàn)組大鼠尾尖部針刺采血，使用血糖儀和試紙測量血糖，連續(xù)2 次血糖＞16.7 mmol/L即為糖尿病大鼠模型復(fù)制成功。

DFU 模型建立：取糖尿病模型大鼠，對其左踝關(guān)節(jié)周圍1.5 cm 范圍脫毛，后期用藥階段中每3 d 重復(fù)脫毛1 次，用棉簽蘸取飽和氫氧化鈉溶液涂抹于裸露皮膚持續(xù)30 s后，用生理鹽水和清水多次反復(fù)清洗以建立足部潰瘍模型。涂抹氫氧化鈉時，注意控制涂抹面積大致相當(dāng)且均勻，建模成功后，記錄大鼠初始潰瘍面積，并每7 d 記錄1 次潰瘍愈合情況。此期間給予所有大鼠正常飲食、飲水，不給予其他處理。

分組及給藥：將實(shí)驗(yàn)組26只DFU模型大鼠隨機(jī)分為模型組和給藥組，各13只。模型組大鼠2次血糖平均值分別為（18.4±3.4）mmol/L、（18.3±3.4）mmol/L，給藥組分別為（18.5±3.4）mmol/L、（20.0±3.3）mmol/L。給藥組大鼠潰瘍區(qū)域沖洗涂抹西帕依固齦液，每只2 mL，早晚各1次，先徹底沖洗潰瘍面，再用棉簽拭去多余液體。每次給藥后以無菌紗布覆蓋并固定。模型組及空白組大鼠給予等體積生理鹽水。連續(xù)給藥14 d。

檢測指標(biāo)：于治療第1，7，15 天采用計(jì)算機(jī)像素點(diǎn)法測量潰瘍面積，計(jì)算潰瘍面抑制率。潰瘍抑制率（%）=（模型組大鼠潰瘍面積-給藥組大鼠潰瘍面積）/模型組大鼠潰瘍面積×100%。對大鼠腹主動脈采血，取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法檢測表皮生長因子（EGF）水平。取大鼠潰瘍部位組織，固定于10%中性甲醛溶液中，脫水、透明、浸蠟、包埋、切片、蘇木素-伊紅（HE）染色、封片后，顯微鏡下觀察組織形態(tài)并攝片。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析。計(jì)量資料以表示，行t檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2.2 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)

化學(xué)成分及靶點(diǎn)獲取：以“沒食子”為檢索詞，在中國知網(wǎng)、萬方醫(yī)學(xué)網(wǎng)以及Geen Medical 等平臺獲取相關(guān)文獻(xiàn)，總結(jié)整理沒食子化學(xué)成分；將成分導(dǎo)入中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫和分析平臺（TCMSP，https：// tcmspw.com/ tcmsp.php），設(shè)置口服生物利用度（OB）≥30%進(jìn)行篩選。根據(jù)現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道補(bǔ)充沒食子酸乙酯（OB=25.61%），建立西帕依固齦液的成分?jǐn)?shù)據(jù)庫；通過TCMSP 獲取成分的靶點(diǎn)，運(yùn)用Uniprot 數(shù)據(jù)庫（https：//www.uniprot.org/）下載靶點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)名稱文件，對靶點(diǎn)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，構(gòu)建西帕依固齦液的靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫。

疾病靶點(diǎn)獲取：以“Diabetic foot ulcer”為關(guān)鍵詞，分別檢索藥物數(shù)據(jù)庫（DrugBank，https：// go.drugbank.com/）、人類基因組數(shù)據(jù)庫（GeneCards，https：// www.genecards.org/）、人類孟德爾遺傳數(shù)據(jù)庫（OMIM，https：// omim.org/）、治療靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫（TTD，https：//go.drugbank.com/）獲取DFU 相關(guān)靶點(diǎn)，去重后構(gòu)建DFU的靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫。

交集靶點(diǎn)獲取：利用R 語言3.6.1 軟件，整理前述2個靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫文件，獲取二者的交集靶點(diǎn)。

“成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建：將交集靶點(diǎn)、藥物-成分關(guān)系、成分-靶點(diǎn)關(guān)系相關(guān)數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape 3.8.0軟件，構(gòu)建“成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)。成分及靶點(diǎn)的形狀大小反映Degree值大小。

蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及分析：利用String數(shù)據(jù)庫（https：// string -db.org/），選擇“Multiple proteins”，導(dǎo)入交集靶點(diǎn)文件相關(guān)數(shù)據(jù)，物種選擇“Homo sapiens”，參數(shù)設(shè)置為“最低要求評分0.4分”“刪除游離節(jié)點(diǎn)”，獲取PPI 網(wǎng)絡(luò)圖。將PPI 網(wǎng)絡(luò)關(guān)系相關(guān)數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape 3.8.0 軟件，以“Degree centrality，DC”“Closeness centrality，CC”“Betweenness centrality，BC”“Eigenvector centrality，EC”“Network centrality，NC”“l(fā)ocalaverage Connectivity，LAC”為篩選條件，選取以上6個拓?fù)涮卣髦稻笥谄湎鄳?yīng)中位數(shù)的靶點(diǎn)作為核心靶點(diǎn)，進(jìn)行2輪分析，構(gòu)建PPI拓?fù)浞治鰣D。

富集分析：利用R 語言3.6.1 軟件的“dose bioconductor”“clusterprofiler bioconductor”“enrichplot bioconductor”“pathview bioconductor”包，對交集靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體論（GO）和京都基因與基因組百科全書（KEGG）富集分析，設(shè)定顯著性條件為q.adjust ＜0.05，篩選顯著的生物功能和信號通路，并制作氣泡圖和條形圖。

分子對接驗(yàn)證：將“成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)與PPI中Degree值排名前3的成分與靶點(diǎn)進(jìn)行對接。從PubChem 數(shù)據(jù)庫（https：// pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）中下載配體文件，利用Chem3D 軟件對配體進(jìn)行能量最小化處理。從蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫（PDB，http：//www1.rcsb.org/）中下載受體結(jié)構(gòu)文件，利用PyMOL 對受體進(jìn)行去水和除雜等處理；通過AutoDockTools 1.5.6軟件確定配體、受體結(jié)合的活性口袋相關(guān)參數(shù)，并進(jìn)行半柔性分子對接。借助PyMOL繪制最佳對接模型圖。結(jié)合能小于0 kcal/mol表明配體能和受體自發(fā)結(jié)合，結(jié)合能越小對接越好。小于-5.0 kcal/mol，表明結(jié)合性較好。

2 結(jié)果

2.1 動物實(shí)驗(yàn)

大鼠一般情況：大鼠體質(zhì)量變化情況見表1。實(shí)驗(yàn)期間空白組大鼠體質(zhì)量持續(xù)升高，給藥組和模型組大鼠僅在前期飲食誘導(dǎo)期間升高。在糖尿病模型復(fù)制成功后，大鼠皆出現(xiàn)典型的“三多一少”癥狀。且大鼠表觀毛色偏黃，暗淡無光澤，并有精神萎靡表現(xiàn)，其中1只大鼠出現(xiàn)厭食等抑郁相關(guān)癥狀。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，給藥組大鼠潰瘍面出現(xiàn)修復(fù)狀態(tài)，潰瘍顏色變淡，且未出現(xiàn)擴(kuò)大現(xiàn)象；模型組大鼠潰瘍顏色較深，其中個別潰瘍面擴(kuò)大。

表1 大鼠體質(zhì)量變化情況（，g）Tab.1 Changes of body mass in rats（，g）

表1 大鼠體質(zhì)量變化情況（，g）Tab.1 Changes of body mass in rats（，g）

檢測指標(biāo)：給藥7 d 及15 d 后給藥組大鼠潰瘍面積明顯小于模型組（P＜0.05），見表2。給藥15 d時給藥組大鼠潰瘍抑制率為58.38%。與空白組比較，模型組EGF水平顯著降低［（558.13 ± 87.84）pg/ mL 比（666.13 ±134.21）pg/mL，P＜0.05］；與模型組比較，給藥組EGF水平顯著升高［（638.82± 154.54）pg/mL 比（558.13 ±87.84）pg/mL，P＜0.05］。

表2 給藥后大鼠潰瘍面積比較（，mm2，n=13）Tab.2 Comparison of ulcer area of rats after administration（，mm2，n=13）

表2 給藥后大鼠潰瘍面積比較（，mm2，n=13）Tab.2 Comparison of ulcer area of rats after administration（，mm2，n=13）

注：與模型組比較，*P ＜0.05。Note：Compared with those in the model group，*P ＜0.05.

組織病理情況：結(jié)果見圖1。空白組大鼠潰瘍組織可見毛囊腺體下有脂肪組織，無修復(fù)，毛囊及表皮完整。模型組可見組織間有水腫，脂肪細(xì)胞少；有經(jīng)修復(fù)形成的角質(zhì)化新的凹凸面，潰瘍面大；潰瘍區(qū)域未見毛囊再生。給藥組可見潰瘍后的修復(fù)，毛囊再生過程不完善，且脂肪細(xì)胞較模型組增多。

圖1 大鼠組織病理學(xué)觀察（HE，×200）A1，A2.Blank group B1，B2.Model group C1，C2.Administration groupFig.1 Histopathological observation of rats（HE，×200）

2.2 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)

2.2.1 化學(xué)成分及靶點(diǎn)篩選

通過文獻(xiàn)挖掘及后續(xù)篩選，獲得西帕依固齦液化學(xué)成分7個；作用靶點(diǎn)54個，去重后得40個。結(jié)果見表3。分別從DrugBank，GeneCards，OMIM，TTD 數(shù)據(jù)庫中獲得DFU 作用靶點(diǎn)2 391，170，15，3 個，去重后共得靶點(diǎn)2 429 個。取交集共得到29 個靶點(diǎn)，詳見表4。

表3 西帕依固齦液化學(xué)成分及靶點(diǎn)數(shù)量Tab.3 Chemical composition and number of targets of Xipayi Mouth Rinse

表4 西帕依固齦液-DFU交集靶點(diǎn)Tab.4 Intersection targets of Xipayi Mouth Rinse -DFU

2.2.2 網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

“成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)：29個交集靶點(diǎn)與7個活性成分匹配后，最終得到6 個具有抗DFU 作用的活性成分，分別為鞣花酸（MOL001002）、沒食子酸（MOL000513）、沒食子酸甲酯（MOL001906）、沒食子酸乙酯（MOL001907）、丁香酸（MOL001807）、間雙沒食子酸（MOL000569），結(jié)果見圖2。

圖2 西帕依固齦液-DFU“成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)Fig.2 ″Component-Target″ network of Xipayi Mouth Rinse-DFU

交集靶點(diǎn)PPI 網(wǎng)絡(luò)：29 個交集靶點(diǎn)的PPI 網(wǎng)絡(luò)包括29 個節(jié)點(diǎn)，140 條邊，平均Degree 值9.66，PPI 富集P值＜1.0×10-16；將該網(wǎng)絡(luò)關(guān)系導(dǎo)入Cytoscape 3.8.0軟件進(jìn)行拓?fù)浞治觯谝惠喓Y選閾值為BC ≥6.677 777 778，CC ≥0.346 590 909，DC ≥9，EC ≥0.346 590 909，LAC ≥6.888 888 889，NC ≥7.75，共獲得9個中心節(jié)點(diǎn)。詳見圖3。

圖3 PPI拓?fù)浞治鰣DFig.3 PPI topological graph

2.2.3 富集分析

GO 功能富集：共得到1 240（q.value ＜0.05）個條目，包括生物過程（BP）1 094 條，分子功能（MF）127 條，細(xì)胞組分（CC）19 條；可視化處理各部分注釋結(jié)果的前10條，結(jié)果見圖4。西帕依固齦液治療DFU的靶點(diǎn)，主要參與調(diào)節(jié)對脂多糖、類固醇激素、細(xì)菌來源分子反應(yīng)等過程的調(diào)控；作用主要體現(xiàn)在酰胺結(jié)合、RNA 聚合酶Ⅱ一般轉(zhuǎn)錄起始因子結(jié)合、肽結(jié)合等方面；主要集中于調(diào)控細(xì)胞質(zhì)囊泡腔、囊泡腔、小窩等部位。

圖4 西帕依固齦液-DFU的GO功能富集可視化分析Fig.4 Visualization analysis of GO function enrichment of Xipayi Mouth Rinse-DFU

KEGG 通路富集：共得到124 條（q.value ＜0.05）信號通路，將前30條通路進(jìn)行可視化處理，結(jié)果見圖5。主要涉及前列腺癌、鉑類耐藥、乙型肝炎、人類巨細(xì)胞病毒感染、癌癥中的蛋白多糖、膀胱癌、卡波西肉瘤相關(guān)皰疹病毒感染、流體剪切應(yīng)力和動脈粥樣硬化、小細(xì)胞肺癌、IL-17 信號通路等。提示西帕依固齦液可能通過調(diào)節(jié)多個通路發(fā)揮治療DFU的作用。

圖5 西帕依固齦液-DFU的KEGG通路富集可視化分析Fig.5 Visualization analysis of KEGG pathway enrichment of Xipayi Mouth Rinse-DFU

2.2.4 分子對接

鞣花酸、沒食子酸、沒食子酸甲酯分別與細(xì)胞腫瘤抗原（TP53）、血管內(nèi)皮生長因子A（VEGFA）、半胱氨酸蛋白酶-3（CASP3）進(jìn)行分子對接，結(jié)合能均小于0 kcal/mol。分子對接結(jié)果見表5及圖6至圖8。

表5 核心成分與核心靶點(diǎn)的分子對接結(jié)果Tab.6 Results of molecular docking between key components and key targets

圖6 鞣花酸-核心靶點(diǎn)的分子對接結(jié)構(gòu)圖A.Ellagic acid-TP53 B.Ellagic acid-VEGFA C.Ellagic acid-CASP3Fig.6 Molecular docking structure of ellagic acid-key targets

圖7 沒食子酸-核心靶點(diǎn)的分子對接結(jié)構(gòu)圖A.Gallic acid-TP53 B.Gallic acid-VEGFA C.Gallic acid-CASP3Fig.7 Molecular docking structure of gallic acid-key targets

圖8 沒食子酸甲酯-核心靶點(diǎn)的分子對接結(jié)構(gòu)圖A.Methyl gallate-TP53 B.Methyl gallate-VEGFA C.Methyl gallate-CASP3Fig.8 Molecular docking structure of methyl gallate-key targets

3 討論

DFU 多種病因共存，目前尚未完全闡明其發(fā)病機(jī)制。目前普遍認(rèn)為其主要與足周圍神經(jīng)病變、血管病變及足部感染有關(guān)。DFU 發(fā)生的主要危險(xiǎn)因素之一是足周圍神經(jīng)病變，其主要累及感覺神經(jīng)、運(yùn)動神經(jīng)和自主神經(jīng)，尤其末梢神經(jīng)病變。血管病變亦是影響DFU 預(yù)后的重要因素之一，其中包括微血管病變和大血管病變。動脈粥樣硬化是大血管病變的主要病理改變，多數(shù)學(xué)者考慮DFU 的主要發(fā)病機(jī)制之一是下肢動脈硬化。感染是DFU 的發(fā)生并趨于加重的重要原因之一，其增加局部耗氧及促凝物質(zhì)產(chǎn)生，加重缺血，從而加重壞疽［5］。

測量DFU 模型大鼠潰瘍面積采用計(jì)算機(jī)像素點(diǎn)法（以中國人民銀行1角硬幣為參照物）。于電腦繪圖工具中分別圈索出潰瘍區(qū)域與硬幣區(qū)域，記錄像素點(diǎn)。以潰瘍區(qū)域像素點(diǎn)和硬幣像素點(diǎn)的比值乘以硬幣的面積，即得大鼠足部潰瘍區(qū)域的面積。潰瘍創(chuàng)面的愈合是創(chuàng)面修復(fù)的過程。脂肪細(xì)胞對創(chuàng)面修復(fù)有重要作用，能分泌合成轉(zhuǎn)化生長因子1、血管內(nèi)皮生長因子、腫瘤壞死因子-α、骨形成蛋白等60 多種蛋白［6］，從而促進(jìn)表皮細(xì)胞的增殖和分化，進(jìn)而形成良好的表皮層結(jié)構(gòu)。毛囊與皮膚創(chuàng)面的修復(fù)及瘢痕的形成具有密切關(guān)系，其再生程度可反映潰瘍創(chuàng)傷深部及表層的修復(fù)情況。關(guān)于毛囊與創(chuàng)傷修復(fù)的研究證實(shí)，毛囊單位可有效促進(jìn)創(chuàng)面愈合［7-8］。

有研究表明，EGF 可增加DFU 患者傷口處的膠原含量，促進(jìn)肉芽組織快速形成，有利于傷口的愈合。本研究中也發(fā)現(xiàn)，西帕依固齦液可顯著增加DFU 模型大鼠的EGF水平，促進(jìn)創(chuàng)面愈合［9-12］。

沒食子作為西帕依固齦液主要組成藥材，其主要活性成分為沒食子酸、鞣花酸等成分，具有固澀、收斂、燥濕、止血、消炎等功效［13］。成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)顯示，西帕依固齦液抗DFU 的核心成分可能是鞣花酸、沒食子酸等。鞣花酸屬鞣質(zhì)類成分，具有抗炎、抗氧化、抗菌、降糖、調(diào)脂作用［14-16］。沒食子酸具有顯著的抗炎、抗菌、抗病毒、抗氧化等作用，對心血管系統(tǒng)疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、糖尿病、肝纖維化和腫瘤等具有防治作用［17-18］。PPI 網(wǎng)絡(luò)顯示，TP53，VEGFA，CASP3 等為核心靶點(diǎn)。TP53 具有調(diào)控細(xì)胞分裂和增殖的作用。VEGFA 在血管的生成和發(fā)生及內(nèi)皮細(xì)胞生長中有重要作用，可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞遷移、抑制凋亡并誘導(dǎo)血管通透性，對生理和病理性血管生成均必需。CASP3 在細(xì)胞凋亡的執(zhí)行階段起關(guān)鍵作用，與癌癥的發(fā)生、衰老、心血管疾病的發(fā)生等有重要聯(lián)系。KEGG 富集分析顯示，PI3K-Akt、NF-κB信號通路等為核心通路。PI3K/Akt信號通路可介導(dǎo)多種細(xì)胞信號傳遞并調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬、增殖、轉(zhuǎn)錄、翻譯等多個過程［19］。PI3K-Akt-mTOR 信號通路有獨(dú)立的激活劑，介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞遷移、促進(jìn)新生血管形成，從而促進(jìn)DFU 愈合［20］。細(xì)胞外囊泡是PI3KAkt-mTOR信號通路的激活劑之一，可通過激活PI3KAkt-mTOR通路，加速血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移，增加傷口的血管密度，從而促進(jìn)糖尿病小鼠的創(chuàng)面愈合［21-22］。NF-κB是一種異源性二聚體，它不僅與慢性低度炎癥相關(guān)還與糖尿病等代謝性疾病相關(guān)。DFU創(chuàng)面愈合可由JNK-NFκB-NLRP3信號通路介導(dǎo)，NF-κB、NLRP3活化時可使糖尿病創(chuàng)面的炎癥細(xì)胞浸潤，延長炎癥持續(xù)狀態(tài)，減慢糖尿病創(chuàng)面的愈合速度［19］。

綜上所述，西帕依固齦液可通過減少足部潰瘍面積，增加病灶組織的脂肪細(xì)胞和再生毛囊數(shù)量，發(fā)揮抗大鼠DFU作用。其作用機(jī)制可能與西帕依固齦液中鞣花酸、沒食子酸等核心成分作用于TP53，VEGFA，CASP3等核心靶點(diǎn)，繼而影響PI3K-Akt、NF-κB 等信號通路有關(guān)。本研究為后續(xù)西帕依固齦液治療DFU的藥物效應(yīng)動力學(xué)及機(jī)制研究奠定了基礎(chǔ)，并為西帕依固齦液二次開發(fā)利用研究提供參考依據(jù)。